克倫特羅是一種β-興奮劑，添加于飼料中能提高幾種家畜包括豬的瘦肉率。由于其在黑市可買到，克倫特羅在歐洲、美國、亞洲非法用于家畜。在某些國家，非法用過克倫特羅的牛組織中的殘留引起人的中毒。最近有人報(bào)道，人食用了含有克倫特羅的豬肉導(dǎo)致中毒。
　　雖然14C-鹽酸克倫特羅總殘留和克倫特羅原形藥殘留在牛和肉雞體內(nèi)的消除規(guī)律已有報(bào)道，但以前沒有關(guān)于14C-鹽酸克倫特羅或非放射性標(biāo)記的克倫特羅在豬體內(nèi)的處置和消除規(guī)律的報(bào)道。放射性標(biāo)記作為殘留消除規(guī)律研究的基礎(chǔ)，是因?yàn)樵嗡幒推浯x產(chǎn)物的動(dòng)力學(xué)容易估計(jì)以及原形藥在總殘留中的百分比也可估計(jì)。
本實(shí)驗(yàn)的目的： ① 測定添加于飼料中的1 ppm14C-鹽酸克倫特羅在豬體內(nèi)的處置； ② 0、3、7天休藥期后屠宰，14C-鹽酸克倫特羅在豬可食用組織和不可食用組織的分布； ③ 0、3、7天的休藥期后，肝、腎、肌肉、脂肪、肺中克倫特羅原形藥的濃度。
　　一、實(shí)驗(yàn)
　　9頭閹豬和9頭母豬購回后，立即稱重，打耳號，驅(qū)蟲，然后分成3組，每組3頭閹豬和3頭母豬。實(shí)驗(yàn)之前，動(dòng)物飼喂兩周以適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境。適應(yīng)期間，訓(xùn)練動(dòng)物在代謝籠中直到它們可整晚呆在代謝籠。同時(shí)，訓(xùn)練動(dòng)物采食，一天飼喂兩頓，每頓給料量為0.5~0.6 kg/頭。給料30分鐘后，通常能完全吃完。兩周后，正式實(shí)驗(yàn)，1 ppm14C-鹽酸克倫特羅添加于飼料中連續(xù)7天給藥，開始3頓，每頓給料量為0.5 kg/頭，隨后由于觀察到每頭豬給0.5 kg飼料，豬不能吃飽。因此，以后每頓給料量增加到0.6 kg/頭。通過計(jì)算，7天給藥期，每頭豬總共消耗了8159±8g的添加了14C-鹽酸克倫特羅的飼料，每頭豬消耗的14C-鹽酸克倫特羅總劑量平均為76.1μCi，即8.3 mg克倫特羅。停藥后的0、3、7天，隨機(jī)從每個(gè)試驗(yàn)組挑選1頭閹豬和1頭母豬屠宰，即每個(gè)休藥期屠宰3頭閹豬和3頭母豬。屠宰后，采集各種組織樣品，如肝、腎、肺、脾、胃腸道、皮膚、腦、眼睛、心、膽汁、脂肪、肌肉，冷凍保存，然后對樣品進(jìn)行分析處理。
　　二、結(jié)果
休藥期內(nèi)，閹豬和母豬的平均開始體重、終體重、總增重或平均日增重差異不顯著（p>0.2），見表1（略）。休藥期對終體重和總增重有明顯的影響（p<0.01），但對日增重沒有影響，這些結(jié)果表明各實(shí)驗(yàn)組豬的生長不一致。第2組豬的開始體重（24.0 kg）大于第3組的開始體重（22.7kg）(p<0.05)，但與第1組的差別不大(p>0.15)。重要的是休藥期內(nèi)閹豬和母豬的增重沒有差異。
　　尿、糞、屠體、內(nèi)臟中14C-鹽酸克倫特羅的回收率見表2（略）。閹豬和母豬中14C-鹽酸克倫特羅的總回收率分別是95.1%和99.3%。尿中14C-鹽酸克倫特羅排泄比率最大（55%~75.4%），糞次之。休藥期間，母豬糞中14C-鹽酸克倫特羅含量明顯大于閹豬糞中的含量（p<0.01）；然而，母豬尿中14C-鹽酸克倫特羅排泄量小于閹豬尿中的排泄量（p=0.05）。休藥期間，閹豬和母豬通過尿排泄的14C-鹽酸克倫特羅差異不顯著（P>0.11）。由于代謝籠結(jié)構(gòu)原因，母豬的尿和糞不可能完全分離，但閹豬的尿和糞容易分離。因此，母豬和閹豬尿、糞中14C-鹽酸克倫特羅消除的差異可能是由于代謝籠的設(shè)計(jì)而不是豬的生理原因。
　　休藥3天后，屠體內(nèi)14C-鹽酸克倫特羅下降到總給藥量的2%。屠體內(nèi)14C-鹽酸克倫特羅含量、內(nèi)臟中14C-鹽酸克倫特羅含量或14C-鹽酸克倫特羅放射性物質(zhì)的總回收率與性別無關(guān)。
　　可食用組織中14C-鹽酸克倫特羅的總殘留量（ppb）見表3。肺為可食用組織，因?yàn)閳?bào)道過有人食用過含克倫特羅的豬肺發(fā)生中毒，可食用組織中14C-鹽酸克倫特羅總殘留量與性別無關(guān)。零休藥期，肝和肺中克倫特羅的殘留量最大，超過腎中殘留的2倍，大約是脂肪和肌肉的15倍。休藥3天后，肝中克倫特羅的總殘留量最大，肺、腎、脂肪組織中的殘留濃度幾乎相等，肌肉的總殘留量仍大約是肝中的1/15。休藥7天后，脂肪中的克倫特羅總殘留量大約是零休藥期的25%，腎、肺、肌肉中的克倫特羅總殘留量分別大約是零休藥期的4%、5%、2%及6%。
　　可食用組織中克倫特羅原形藥的濃度和克倫特羅原形藥占14C-鹽酸克倫特羅殘留總量的百分比見表４。零休藥期，脂肪、腎、肌肉中克倫特羅原形藥占14C-鹽酸克倫特羅殘留總量的比率大于５％，肝中克倫特羅原形藥占總殘留的比率為42%。休藥３天后，脂肪、腎、肌肉中克倫特羅原形藥的比率明顯降低，但不如肝或肺中下降那么明顯。休藥7天后，肝和肺中克倫特羅原形藥的比率下降到15%~30%，脂肪或肌肉中克倫特羅原形藥的含量低于0.25 ppb，但這時(shí)肝和肺中容易檢測到克倫特羅原形藥。零休藥期，所有可食用組織中，肺中克倫特羅原形藥的濃度最大，但休藥7天后，肺中克倫特羅原形藥的濃度低于肝中的。休藥期間，可食用組織中克倫特羅原形藥的濃度與性別無關(guān)。
　　除休藥3天后的血液外，性別不影響不可食用組織中克倫特羅的總殘留量。任何休藥期，眼睛中克倫特羅的總殘留量都在200 ppb以上。血液中的14C-鹽酸克倫特羅殘留量小于其它不可用食組織中的。三個(gè)休藥期，膽汁中都存在克倫特羅，表明至少有一部分克倫特羅或其代謝物是通過膽汁排泄。
　　三、討論
　　14C-鹽酸克倫特羅從尿排泄的數(shù)據(jù)表明，克倫特羅在豬體內(nèi)吸收迅速、廣泛。14C-鹽酸克倫特羅在閹豬中的吸收率至少73.8%，在母豬中的吸收率至少64%。對小母豬，64%是最低估計(jì)值，因?yàn)槭占瘯r(shí)它的尿和糞不能完全分離。閹豬和母豬克倫特羅在膽汁的消除對14C-鹽酸克倫特羅在糞中消除的影響沒有計(jì)算，因?yàn)?天給藥期間沒有測量膽汁的流速。但屠宰時(shí)膽汁中存在克倫特羅表明，克倫特羅在膽汁的消除對14C-鹽酸克倫特羅在糞中的消除有潛在的影響。
　　克倫特羅在家畜和人體內(nèi)吸收好，而且與其它β-興奮劑相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克倫特羅的豬肉出現(xiàn)中毒。Zimmer（1976）證實(shí)人內(nèi)服20 μg的14C-鹽酸克倫特羅，峰濃度時(shí)，血漿中克倫特羅原形藥占總的14C-鹽酸克倫特羅的75%。克倫特羅內(nèi)服生物利用度高的事實(shí)對估計(jì)消費(fèi)者食用了含有克倫特羅的組織，從中獲得的克倫特羅的量很重要。引起人中毒的動(dòng)物組織含有克倫特羅原形藥的量差異很大。Martinez-Navarro(1990)報(bào)道犢牛肝中克倫特羅原形藥的殘留量為161~291 ppb，Pulce等（1991）報(bào)道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為375~500 ppb，Salleras等（1995）報(bào)道犢牛肝中克倫特羅的殘留量為19~5395 ppb。此外，Maistro等（1995）報(bào)道犢牛肌肉中克倫特羅的殘留量為500 ppb， Brambilla等（1997）報(bào)道“肉樣品”中克倫特羅的殘留量為450 ppb。Sporan等（1998）報(bào)道的可能是最嚴(yán)重的，他報(bào)道污染的屠體的“肉”中克倫特羅的殘留量為800~7400 ppb，這個(gè)肉樣是來自一個(gè)賣肉檔，其賣的肉引起人中毒。假定克倫特羅在人體內(nèi)的生物利用度為75%，食用267克含有100 ppb克倫特羅原形藥的肉品就能達(dá)到20 μg的治療劑量。另外，如果肉品中含有500 ppb的克倫特羅，僅食用53克就會(huì)出現(xiàn)毒性反應(yīng)。克倫特羅在常規(guī)烹飪條件下的穩(wěn)定性和它在人體內(nèi)高的生物利用度使肉產(chǎn)品成為傳遞克倫特羅治療或毒性劑量的最合適媒介。克倫特羅在兒童的治療劑量是5μg，因此兒童食用67g含有100 ppb克倫特羅原形藥的組織就能達(dá)到5μg的治療劑量。
　　由于克倫特羅內(nèi)服的生物利用度高，成年人內(nèi)服克倫特羅不出現(xiàn)任何反應(yīng)的劑量僅為2.5μg，按平均60 kg的體重?fù)Q算，人不出現(xiàn)反應(yīng)的劑量為0.042μg/kg體重或42 ng/kg體重。在美國，克倫特羅僅批準(zhǔn)用于非食用的馬，考慮到食品安全性，獸醫(yī)不允許克倫特羅進(jìn)行標(biāo)簽外使用。由于美國不批準(zhǔn)克倫特羅用于食品動(dòng)物，所以美國FDA獸藥中心沒有制定其殘留限量。然而，在歐洲克倫特羅可用于牛的提前分娩和治療動(dòng)物的支氣管痙攣或呼吸道堵塞。歐洲規(guī)定克倫特羅用于食品動(dòng)物必需要有28天的休藥期，并規(guī)定所有可食組織中的最大殘留限量（MRL）為0.5 ppb。
　　歐洲的MRL應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)，我們能容易算出1 ppm的克倫特羅連續(xù)7天添加于豬飼料中給藥，所有可食用組織中的克倫特羅殘留大大超過歐洲的MRL。零休藥期，脂肪中克倫特羅的殘留量是所有可食組織中最低的，但卻超過歐洲的MRL30倍。休藥7天后，脂肪、肌肉、腎中克倫特羅殘留量下降到歐洲的MRL以下，但肝中的克倫特羅殘留量仍超過歐洲的MRL30倍，肺，在歐洲不作為可食用組織超過歐洲的MRL60倍。雖然這些數(shù)據(jù)僅闡明了1 ppm的克倫特羅添加于飼料給藥的殘留消除規(guī)律，不能反映其它濃度的克倫特羅在豬體內(nèi)的消除規(guī)律。克倫特羅非法用于動(dòng)物的殘留數(shù)據(jù)差異很大（前面）表明，不可能預(yù)測克倫特羅的非法用量。由于不可能預(yù)測克倫特羅的非法用量，因此很難預(yù)測克倫特羅非法用于動(dòng)物的殘留消除，故非法使用了克倫特羅的動(dòng)物及其屠體不能被消費(fèi)者食用。
　　本實(shí)驗(yàn)選擇1 ppm的克倫特羅添加于飼料中是根據(jù)有人報(bào)道添加該濃度的克倫特羅足以起到提高瘦肉率的作用。按動(dòng)物體重?fù)Q算給藥劑量，本實(shí)驗(yàn)豬的給藥劑量（開始為50μg/kg體重，給藥后期為42μg/kg體重）大大超過靜注或內(nèi)服的建議治療劑量（0.8μg/kg體重，10μg每天3次），也大大超過常用的10倍治療劑量（16μg/kg體重）的促生長劑量。然而，引起人中毒的動(dòng)物產(chǎn)品中的克倫特羅的含量表明非法使用的促生長劑量明顯大于10倍的治療劑量。
　　本實(shí)驗(yàn)，在零休藥期，肝中14C-鹽酸克倫特羅的總殘留量為300 ppb，克倫特羅原形藥僅占41%（120 ppb）。引起人中毒的可食用組織中克倫特羅的殘留大大超過120 ppb。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝中克倫特羅的殘留量范圍大約是30~300 ppb，具體多少與動(dòng)物種屬、給藥劑量、給藥期有關(guān)。總之，本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中克倫特羅原形藥的殘留量低于引起人中毒的動(dòng)物組織中的殘留量，這可能是由于本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的用量低于非法使用的劑量。
　　眼睛中克倫特羅的殘留量最大且持續(xù)時(shí)間最長。休藥7天后，眼睛中14C-鹽酸克倫特羅總殘留量仍保持在200 ppb以上，表明眼睛是監(jiān)測克倫特羅非法使用的最佳靶組織。克倫特羅在眼睛中的消除很慢，因此眼睛在監(jiān)視克倫特羅非法使用中起了很大的作用。
克　　倫特羅任何標(biāo)簽外使用作為人或動(dòng)物的生長促進(jìn)劑都是非法的，并對人類有潛在的危害性。近十年，歐洲、亞洲、北美和中美洲都報(bào)道過克倫特羅作為生長促進(jìn)劑的非法使用。盡管歐洲已禁止同化激素用于食品動(dòng)物，但歐洲仍檢測到克倫特羅大量非法使用，禁令沒有阻止克倫特羅和其它β-興奮劑的非法使用，動(dòng)物食品仍存在危險(xiǎn)的殘留問題。人不斷有中毒病例似乎證實(shí)了Meyer（1991）的結(jié)論：禁令不但沒有解決已存在的問題，而是激起了新的安全問題。
　　四、小結(jié)
　　1 ppm的克倫特羅添加于豬飼料中用于促生長，人食用豬肝或豬肺足夠引起中毒。世界沒有任何正規(guī)機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)克倫特羅作為飼料添加劑用于動(dòng)物促生長。標(biāo)簽外使用作為生長促進(jìn)劑是非法的，會(huì)導(dǎo)致肉產(chǎn)品對人類有害。按標(biāo)簽說明用于治療，沒有人證實(shí)克倫特羅會(huì)在食品動(dòng)物中出現(xiàn)對人不安全的殘留.。