1  適用范圍
         
      本方法用于測定動物可食性組織中磺胺間甲氧嘧啶（SMM）、磺胺二甲基嘧啶（SM?2）、磺胺甲惡唑（SMZ），磺胺二甲氧嘧啶（SDM）、磺胺喹惡啉（SQ）單個或混合物的殘留量。

         2  原理
         
      組織經乙腈提取后，其上清液再加入正己烷，向離心后的下層溶液加入正丙醇，減壓干燥后的殘留物用乙腈溶解，過Sep-Pak氧化鋁B柱，洗脫液再用正丙醇處理，減壓干燥后的殘留物經流動相溶解后，所制樣液用高效液相色譜儀進行檢測。

         3  可靠的檢測限
          本方法在動物可食性組織中的檢測限為0.05μg／g。
         4  儀器
         4.1  高效液相色譜儀，配紫外檢測器。
         4.2  勻漿機。
         4.3  旋轉蒸發儀。
         4.4  磁力攪拌器。
         4.5  電子天平：感量0.000 01g。
         4.6  離心機。
         4.7  振蕩器。
         4.8  抽濾器。
         4.9  離心管。
         5  藥品和試劑
         5.1  SMM，SM2，SMZ，SDM，SQ標準品：純度≥99％。
         5.2  乙腈：色譜純。
         5.3  甲醇：分析純，經重蒸餾。
         5.4  乙酸：分析純。
         5.5  正己烷：分析純，經重蒸餾。
         5.6  正丙醇：分析純，經重蒸餾。
         5.7  無水硫酸鈉：分析純。
         6  溶液
         
      磺胺類藥物標準液：準確稱取適量各個磺胺藥，用甲醇溶解，配制成適當濃度的標準儲備液。臨用前，取此儲備液，用流動相稀釋成濃度為0.1μg／mL～20μg／mL的標準工作液。

         7  分析
         7.1  Sep-Pak氧化鋁B柱的制備
          稱取高溫下加熱3h的氧化鋁粉，加水攪拌均勻，振蕩3h后填充入玻璃柱中，用95％乙腈5mL前處理后備用。
         7.2  提取和純化
          稱取組織樣品5g（精確到0.1 g），加人乙腈25mL，無水硫酸鈉少許（血清除外），勻漿后，以3
      000r／min的速度離心5min。分離后的殘渣再用25mL乙腈處理，振蕩10min后，以3
      000r／min的速度離心5min。合并兩次的上清液，加入正己烷30mL，振蕩10min后，以3
      000r／min的速度離心5min，取下層液體，加入正丙醇10mL，50℃：下減壓干燥，殘留物用95％乙腈3mL溶解，過Sep-Pak氧化鋁B柱。用95％乙腈5mL過柱，不收集，再用70％乙腈10mL洗脫后，洗脫液中加入5mL正丙醇，50℃下減壓干燥后，殘留物用2.0mL流動相溶解，所制樣液用高效液相色譜儀進行檢測。

         7.3  檢測條件
         7.3.1  色譜柱：C18?柱，250mm×4.6mmi.d.。
         7.3.2  流動相：乙腈-甲醇-水-乙酸（2+2+9+0.2）。
         7.3.3  流動相流速：1.0mL／min。
         7.3.4  檢測波長：270nm。
         7.3.5  進樣量：20／μL。
         7.4  樣品測定
         
      分別將等體積標準液和試樣溶液注入液相色譜儀，標準工作液及試樣中磺胺類藥物的響應值均應在儀器檢測的線性范圍之內。試樣液測定過程中要參插注入標準工作液，以便準確定量。

         7.5  計算
          用色譜數據處理機或按式（E.1）計算試樣中磺胺類藥物殘留量：
            W=H·cs.................（E.1）
            Hs·c

          式中：
          W--試樣中磺胺類藥物殘留量，單位為微克每克（μg／g）；
          H--試樣中磺胺類藥物峰高，單位為毫米（mm）；
          Hs--標準工作液中磺胺類藥物峰高，單位為毫米（mm）；
          cs--標準工作液中磺胺類藥物濃度，單位為微克每毫升（μg／mL）；
          c--最終試樣液所代表的試樣濃度，單位為克每毫升（g／mL）。
          注：計算結果需扣除空白值。