Resistant starch,簡稱RS，這一概念由Englyst提出，國內大多數文章譯為抗性淀粉，也有的將其譯為抗淀粉及抗消化淀粉（楊參等，2003），1993年，歐洲抗性淀粉研究協會（EURESTA）將其定義為“健康者小腸中不被吸收的淀粉及其降解產物的總稱”。抗性淀粉一般分為4類：ＲS1型（生理不可消化性截留淀粉）；ＲS2型(抗性淀粉顆粒)；ＲS3型(老化淀粉)；ＲS4型(化學改性淀粉)（Adamu.Augustine和金征宇，2000）。.Englyst等(1985，1987，1992)，楊光和丁霄霖(2002)分別就抗性淀粉的測定方法進行了討論，但測定結果卻不盡一致，本文通過參考Megazyme公司試劑盒提供的方法，結合國內實際情況，研究出一套準確，方便、快捷測定飼料中抗性淀粉含量的方法，為飼料行業測定抗性淀粉提供一種新的方法。
　　1 原理
　　先用胰α-淀粉酶（Pancreatic α-amylase）將非抗性淀粉水解成葡萄糖，再利用抗性淀粉能溶于KOH中的性質，用淀粉葡萄糖苷酶（Amyloglucosidase,AMG）使其水解成葡萄糖，然后測定糖的含量，從而推算出非抗性和抗性淀粉的含量。
　　2 儀器與試劑
　　2.1 儀器
　　GILSON移液槍，DSHZ-300多用途水浴恒溫振蕩器（江蘇太倉王秀實驗設備廠），分析天平（0.000 1g），Beckman Synchron CX4/Pro全自動生化分析儀，WH-1微型旋渦混合儀（上海滬西分析儀器廠） ，離心機（Eppendorf Centrifuge 5810 R）。
　　2.2 溶液的配制
　　2.2.1 馬來酸緩沖液（0.1M，pH=6.0）將23.2g馬來酸溶解于1 600ml蒸餾水中，用4M（160g/l）NaOH調pH至6.0，加入0.6g CaCl22H2O和0.4g疊氮鈉，蒸餾水定容至2L，室溫保存。
　　2.2.2 醋酸鈉緩沖液（1.2M，pH=3.8）取69.6ml冰醋酸于800ml蒸餾水中，用4M NaOH調PH至3.8，蒸餾水定容至1L，室溫保存。
　　2.2.3 氫氧化鉀（2M）稱取112.2g KOH溶于900ml去離子水中，用玻璃棒攪動，使之溶解，去離子水定容至1L。
　　2.2.4 乙醇（50%，V/V）取526ml 95%乙醇于1L容量瓶中，蒸餾水定容，混勻，室溫保存。
　　2.2.5 淀粉葡萄糖苷酶（Amyloglucosidase,AMG）工作液（300U/ml）：取1.0ml AMG母液（3300U/ml，Megazyme公司試劑盒提供），用馬來酸緩沖液稀釋到11ml. （注意：此試劑要求現配現用）

　2.2.6胰α-淀粉酶（Pancreatic α-amylase）反應液：稱取1.0g胰α-淀粉酶(Megazyme公司試劑盒提供)用適量馬來酸緩沖液溶解，轉入于100ml容量瓶，加入1.0mlAMG工作液，振搖5min，搖勻，用馬來酸緩沖液定容。溶液于12 000r/min離心10min，取出上清液，以備后用（注意：此試劑要求現配現用）

　　3 測定步驟
　　3.1 稱取100mg（±5mg）樣品于15ml離心試管（帶蓋）中，并輕輕敲打試管，使樣品掉入試管底部。
　　3.2 每管內加胰α-淀粉酶（Pancreatic α-amylase）反應液4.0ml（現配現用）。
　　3.3 蓋緊蓋子，旋渦混勻，然后用橡皮筋扎緊（一般為六個試管一扎）。
　　3.4 將扎好的試管放入37℃的水浴恒溫振蕩器中（200次/min）水解，16h后取出。
　　3.5 用紙巾將試管外的水擦干，加入4.0ml乙醇（95%）旋渦混勻。
　　3.6 在離心機上于1 500g(大約3 000r/min)離心12min。
　　3.7 輕輕將試管移出（因為是低速離心，過重搖晃會使沉淀松散）將上清液倒入100ml容量瓶中，向剩下的沉淀中加入2ml乙醇（50%）旋渦混勻，再加入6ml乙醇（50%）旋渦混勻，仍然在1 500g離心12min

　　3.8 重復步驟3.7一次。
　　3.9 將上清液倒入原先的100ml容量瓶中，將試管倒置，用濾紙吸干試管內液體（防止非抗性淀粉水解成的糖轉入下一步抗性淀粉的水解過程中）注意：只有在沉淀吸附得比較牢固時才能用，當沉淀比較松散時則盡量將上清液倒出后立即扶正試管。
　　3.10 將上述100ml容量瓶用蒸流水定容，搖勻。吸取100μl溶液至Beckman Synchron CX4/Pro全自動生化分析儀樣品杯中，測定葡萄糖（GLU），計算出非抗性淀粉含量。
　　3.11 向試管中加入2.0ml KOH溶液（2M）冰浴振蕩20min（注意不能旋渦混勻）
　　3.12 向每管中加8.0ml醋酸鈉緩沖溶液(1.2M，pH3.8)搖勻。
　　3.13 加入100μl AMG酶液（3 300U/ml），蓋緊蓋子，反復搖勻，用橡皮筋扎緊，放入50℃水浴恒溫振蕩器中（200次/min），30min后取出。
　　3.14 1 500g離心12min，吸取100μl上清液至Beckman Synchron CX4/Pro全自動生化分析儀樣品杯中，測定葡萄糖（GLU），計算出抗性淀粉含量。
　　4 計算公式
　　非抗性淀粉含量=G×（100/W）×0.9×100%

　　抗性淀粉含量=G×（10.3/W）×0.9×100%

　　總淀粉含量=非抗性淀粉含量+抗性淀粉含量
　　式中：G——水解樣中葡萄糖含量(mg/ml)

　　W——樣品干物質重量(mg)

　　0.9為淀粉與葡萄糖的轉換系數
　　A式中100代表體積100ml；
　　B式中10.3為一經驗值，表示步驟3.14中上清液的總體積為10.3ml。
　　5 應用實例
　　根據上述方法，對不同物質中抗性淀粉與非抗性淀粉的含量進行了測定。由此不難看出：土豆粉和芋頭中抗性淀粉的含量非常之高，其次為玉米等，而小米，燕麥等物質中抗性淀粉的含量則比較少。