一． “瘦肉精”的危害
    “瘦肉精”是腎上腺類神經(jīng)興奮劑，屬β－興奮劑類激素，是指能夠促進(jìn)瘦肉生長(zhǎng)的藥物添加劑。目前，常見(jiàn)的被稱為“瘦肉精”的藥物添加劑主要有萊克多巴胺、克侖特羅、沙丁胺醇、特布他林、西布特羅、西馬特羅、齊帕特羅、氯丙那林、馬布特羅、溴布特羅、班布特羅等11種，其代表物主要是克侖特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇。另外，近期在飼料中檢測(cè)出的“瘦肉精”新品種苯乙醇胺A，再次敲響食品安全的警鐘。
  “瘦肉精”添加到飼料中，不但可以提高動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)化率、生長(zhǎng)速度，還可以使動(dòng)物的肥肉減少，瘦肉增加，胴體瘦肉率可提高10%以上。但作為飼料添加劑，使用劑量是人用藥劑量的10倍以上，才能達(dá)到提高瘦肉率的效果。其用量大、使用的時(shí)間長(zhǎng)、代謝慢，所以直至屠宰前到上市，“瘦肉精”在豬體內(nèi)的殘留量都很大。殘留的藥物通過(guò)食物進(jìn)入人體，就會(huì)使人體蓄積中毒，因此目前被禁用。
但一些飼料加工企業(yè)及養(yǎng)豬飼養(yǎng)業(yè)主為謀取暴利，仍在飼料中添加 “瘦肉精”，前后只需10～20d的時(shí)間，就可把一頭普通豬催變成瘦肉型豬。使用“瘦肉精”的生豬皮毛光亮，宰后肌肉特別鮮紅，后臀肌肉飽滿，肥肉特別薄。屠宰后的豬肉由于“瘦肉精”的蓄積，色澤鮮紅誘人十分搶手。
    “瘦肉精”進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)會(huì)在組織中形成殘留，尤其是在肝臟等內(nèi)臟器官殘留較高。食用含有“瘦肉精”的肉和內(nèi)臟組織會(huì)對(duì)身體產(chǎn)生危害，常見(jiàn)的有惡心、頭暈、四肢無(wú)力、手顫等中毒癥狀，特別對(duì)心臟病、高血壓、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大，長(zhǎng)期食用則可能導(dǎo)致染色體基變，誘發(fā)惡性腫瘤，嚴(yán)重的可導(dǎo)致死亡。
     2 飼料中“瘦肉精”的檢測(cè)
    實(shí)驗(yàn)室中主要檢測(cè)的是克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇三種。檢測(cè)方法有膠體金免疫層析法、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）以及儀器法。現(xiàn)就以上幾種檢測(cè)方法淺談試驗(yàn)過(guò)程中的幾點(diǎn)注意事項(xiàng)。
    一、膠體金免疫層析法

膠體金免疫層析法為競(jìng)爭(zhēng)抑制法，適用于飼料中“瘦肉精”的快速篩選檢測(cè)，克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇這三種的檢測(cè)卡較為常見(jiàn)。檢測(cè)卡含有被事先固定于硝酸纖維膜測(cè)試區(qū)（T）的抗原和控制區(qū)（C）的Ⅱ抗以及固定于結(jié)合墊上的金標(biāo)抗體。樣品經(jīng)簡(jiǎn)單前處理，取上清液滴入檢測(cè)卡的樣品孔中，根據(jù)兩條色帶的顏色判斷陰性和陽(yáng)性。

使用檢測(cè)卡篩選，一般注意以下幾點(diǎn)：

1.樣品處理所需容器要保證干凈無(wú)污染。

2.檢測(cè)卡的事宜溫度在15-25℃，在過(guò)高或過(guò)低溫度下不適于檢測(cè)。

3.于樣品孔中應(yīng)滴加無(wú)氣泡的液體3-4滴。

4.試驗(yàn)中一定要做陰性對(duì)照，要用陰性樣品做對(duì)照，不能用水或其他液體代替。

5.在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察C線及T線，一般只要C線顯色，T線無(wú)論顏色深淺均可判定為陰性。

二、 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）
  

 1.原理

ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，此種結(jié)合不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無(wú)色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此，可通過(guò)底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過(guò)ELISA檢測(cè)儀進(jìn)行定量測(cè)定，這樣就將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來(lái)，使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測(cè)方法。

2.試樣的準(zhǔn)備：為保證樣品充分被提取，可適當(dāng)延長(zhǎng)渦旋時(shí)間、離心時(shí)間及離心轉(zhuǎn)數(shù)，效果比較理想。

3. 試劑的準(zhǔn)備

3.1不同批次的試劑盒不能混用，特異性不同。

3.2 ELISA中用的蒸餾水或去離子水，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。

3.3試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。

3.4檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)保持在室溫20-25℃，避免陽(yáng)光直射下實(shí)驗(yàn)。

 4. 加樣
 4.1加樣時(shí)應(yīng)加在板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡，當(dāng)有氣泡時(shí)，可用干凈的槍頭小心刺破。
4.2在加酶標(biāo)物、底物、終止液時(shí)，建議盡量使用多道移液槍，以縮短反應(yīng)時(shí)間。動(dòng)作一定要迅速、準(zhǔn)確，避免槍頭碰壁或液體濺出。

5. 保溫孵育

5.1一般為常溫（20℃-25℃）溫育，可根據(jù)室溫適當(dāng)調(diào)節(jié)保溫時(shí)間。

5.2孵育期間，如工作臺(tái)溫度過(guò)低，應(yīng)適當(dāng)鋪墊若干紙巾或其他材料。

5.3孵育時(shí)間的計(jì)算越規(guī)范越好，保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性。

 6. 洗板

6.1將孔內(nèi)液體甩干時(shí)，動(dòng)作要快，要把整板垂直倒置，將液體甩出，防止各孔液體混流，最后在吸水紙上拍干，不可甩干。此種方法可有效避免試劑盒孔的交叉污染。

6.3洗板次數(shù)和兩次洗板間隔時(shí)間應(yīng)盡量按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
7. 顯色
7.1在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無(wú)色，而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。

7.2在定量測(cè)定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。7.3定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。
8.測(cè)定
8.1對(duì)定量判定應(yīng)繪制半對(duì)數(shù)曲線，從曲線上讀出樣品對(duì)應(yīng)濃度值。

8.2對(duì)于每次試驗(yàn)濃度值的準(zhǔn)確性判定可觀察標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光度值是否為線性關(guān)系，即吸光度值是否呈梯度遞減來(lái)判定。當(dāng)吸光度值無(wú)明顯梯度時(shí)應(yīng)考慮重新檢測(cè)。

8.3當(dāng)板間差異性大時(shí)，可能原因是板與板之間孵育時(shí)間相差太大，板與板之間洗滌不一致，移液槍使用不當(dāng)，溫度不同等。

  三、儀器法

1、高效液相色譜法：
    2.2.1 方法原理
    用加有甲醇的稀酸溶液將飼料中的鹽酸克侖特羅鹽酸鹽溶出，溶液堿化，經(jīng)液液萃取和固相萃取凈化后，直接在HPLC儀上分離、測(cè)定，或經(jīng)衍生后于GC—MS儀器上分離、檢測(cè)。
    2.2.2 樣品處理
    稱取樣品適量（配合飼料5g，預(yù)混料和濃縮料2g）精確至0.0001g，置于100mL三角瓶中，準(zhǔn)確加入提取液（偏磷酸 : 甲醇=80 : 20，其中偏磷酸的濃度為0.5%）50mL，振搖使全部潤(rùn)濕，放在超聲水浴中超聲提取15min，期間每5min振搖一次，取上層液于離心機(jī)上4 000rpm離心10min。準(zhǔn)確吸取上清液10.00mL，置150mL分液漏斗中滴加2mol/L氫氧化鈉溶液，充分振搖，將pH調(diào)至11～12，溶液用30、25mL乙醚萃取兩次，令醚層通過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥，用少許乙醚淋洗分液漏斗和無(wú)水硫酸鈉，并用乙醚定容至50mL。準(zhǔn)確吸取25.00mL于50mL燒杯中，置通風(fēng)櫥內(nèi)、低于50℃加熱塊或沙浴上蒸干，殘?jiān)苡?span lang="EN-US">2.00mL 0.02mol/L鹽酸溶液，取1.00mL置于預(yù)先已分別用1mL甲醇和1mL去離子水處理過(guò)的SPE小柱上，用注射器稍試加壓，使其過(guò)柱速度不超過(guò)1mL/min，再先后分別用1mL SPE淋洗液—1（含2%氨水的5%甲醇水溶液）和—2（含2%氨水的30%甲醇水溶液）淋洗，最后用甲醇洗脫，洗脫液置70±5℃加熱塊或沙浴上，用氮?dú)獯蹈伞?span lang="EN-US">
    2.2.3 HPLC法（篩選法）
    在凈化、吹干的樣品殘?jiān)袦?zhǔn)確加入1.00～2.00mL 0.02mol/L鹽酸溶液，充分振搖、超聲，使殘?jiān)芙猓匾獣r(shí)過(guò)0.45μm的濾膜，清液上機(jī)測(cè)定，用鹽酸克侖特羅標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)。
    2.2.4 GC—MS法（仲裁法）
    在凈化、吹干的樣品殘?jiān)屑尤胙苌鷦?span lang="EN-US">BSTFA 50μL，充分渦旋混合后，置70±5℃烘箱中，衍生反應(yīng)30min。用氮?dú)獯蹈桑蛹妆?span lang="EN-US">100μL，混勻，上機(jī)測(cè)定。同時(shí)用鹽酸克侖特羅標(biāo)準(zhǔn)系列做同步衍生。

    3 “瘦肉精”的危害
    20世紀(jì)80年代初，美國(guó)一家公司為增加瘦肉率開(kāi)始將“瘦肉精”添加到飼料中，此舉不但可以提高動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)化率、生長(zhǎng)速度，還可以使動(dòng)物的肥肉減少，瘦肉增加，胴體瘦肉率可提高10%以上。但作為飼料添加劑，使用劑量是人用藥劑量的10倍以上，才能達(dá)到提高瘦肉率的效果。其用量大、使用的時(shí)間長(zhǎng)、代謝慢，所以直至屠宰前到上市，“瘦肉精”在豬體內(nèi)的殘留量都很大。殘留的藥物通過(guò)食物進(jìn)入人體，就會(huì)使人體蓄積中毒，因此目前被禁用。
    早在2002年，我國(guó)農(nóng)業(yè)部、衛(wèi)生部、國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局就發(fā)布公告，明令禁止在飼料和動(dòng)物飲用水中添加鹽酸克侖特羅和萊克多巴胺等7種“瘦肉精”。2008年，最高人民檢察院、公安部規(guī)定新的刑事案件立案追訴標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)使用 “瘦肉精”養(yǎng)殖生豬，以及宰殺、銷售此類豬肉的，將以生產(chǎn)、銷售有毒、有害食品罪追究刑事責(zé)任。但一些飼料加工企業(yè)及養(yǎng)豬飼養(yǎng)業(yè)主為謀取暴利，仍在飼料中添加 “瘦肉精”，前后只需10～20d的時(shí)間，就可把一頭普通豬催變成瘦肉型豬。使用“瘦肉精”的生豬皮毛光亮，宰后肌肉特別鮮紅，后臀肌肉飽滿，肥肉特別薄。屠宰后的豬肉由于“瘦肉精”的蓄積，色澤鮮紅誘人十分搶手。
    “瘦肉精”進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)會(huì)在組織中形成殘留，尤其是在肝臟等內(nèi)臟器官殘留較高。食用含有“瘦肉精”的肉和內(nèi)臟組織會(huì)對(duì)身體產(chǎn)生危害，常見(jiàn)的有惡心、頭暈、四肢無(wú)力、手顫等中毒癥狀，特別對(duì)心臟病、高血壓、甲亢和前列腺肥大等疾病患者危害更大，長(zhǎng)期食用則可能導(dǎo)致染色體基變，誘發(fā)惡性腫瘤，嚴(yán)重的可導(dǎo)致死亡。

    4 “瘦肉精”的添加成因及利益驅(qū)動(dòng)
    20世紀(jì)90年代初“瘦肉精”流入中國(guó)后，飼料生產(chǎn)商通過(guò)添加“瘦肉精”來(lái)提高產(chǎn)品的市場(chǎng)占有率和影響力，當(dāng)時(shí)，大多數(shù)人還不知道此類添加劑的危害。但后來(lái)發(fā)現(xiàn)人吃了這種豬肉后，易出現(xiàn)心跳加速、呼吸困難等癥狀。香港、廣東等地發(fā)生的因食用豬肺湯中毒事件，才使“瘦肉精”問(wèn)題浮出水面。
    鹽酸克倫特羅自21世紀(jì)初被國(guó)家明令禁止添加之后，很快被成本約為1 400元/kg的鹽酸萊克多巴胺替代，與前者相比，鹽酸萊克多巴胺長(zhǎng)期被漏檢，此外，還有沙丁安醇等，這些“瘦肉精”安全性相對(duì)較高，被稱為“瘦肉精二代”。
    “瘦肉精”在某種程度上對(duì)養(yǎng)殖戶形成了一種利益驅(qū)動(dòng)，這是“瘦肉精”黑市交易長(zhǎng)期盛行的關(guān)鍵所在。

    5 “瘦肉精”的監(jiān)管與預(yù)防 
    從近幾年風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)的結(jié)果看，非法使用的主要是鹽酸克侖特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇3種“瘦肉精”藥物，各地的監(jiān)督抽查工作也就相應(yīng)地集中在這3種藥物上。美國(guó)、加拿大、墨西哥等20多個(gè)國(guó)家先后批準(zhǔn)將萊克多巴胺用于豬、牛、羊等動(dòng)物養(yǎng)殖，除萊克多巴胺外，其他“瘦肉精”類藥物都沒(méi)有被批準(zhǔn)用于生豬養(yǎng)殖。近年來(lái)，美國(guó)一直向歐盟和我國(guó)施壓，要求解除萊克多巴胺使用禁令，但歐盟和我國(guó)基于安全性考慮不同意解除該禁令。“瘦肉精”難以禁絕關(guān)鍵在于利益驅(qū)動(dòng)。解決“瘦肉精”問(wèn)題的根本出路，還是要大力推進(jìn)生豬標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)模養(yǎng)殖，完善活畜流通追溯體系，加快轉(zhuǎn)變畜牧業(yè)發(fā)展方式。
    “瘦肉精”是國(guó)家明令禁止在牲畜飼料和飼養(yǎng)過(guò)程中使用的藥品，制售和使用“瘦肉精”等違禁藥品的違法行為不僅危害人民群眾身體健康，還危害養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展和社會(huì)安定。因此，要突出源頭治理，從源頭上加大飼料和養(yǎng)殖產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢測(cè)力度，嚴(yán)格飼料和養(yǎng)殖產(chǎn)品市場(chǎng)準(zhǔn)入，嚴(yán)把生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、使用3道關(guān)口，嚴(yán)肅查處違法違規(guī)行為，同時(shí)加強(qiáng)市場(chǎng)的監(jiān)督抽查、抽檢力度。