本標準適用于化學合成法制得的瘤胃微生物脲酶抑制劑,在飼料工業中作為反芻動物飼料添加劑。
1、 外觀和性狀
本品為白色或淡黃色粉末,易溶解于水,在乙醇或乙醚中易溶解。
2、項目和指標
項 目 |
指 標 |
脲酶抑制劑純度,%≥ |
80% |
酸度,pH |
3-6 |
干燥失重,%≤ |
5 |
熾灼殘渣,%≤ |
5 |
3、脲酶抑制劑純度測定方法
所使用的水為蒸餾水。
3.1 溶液的配制
3.1.1 含2%FeCl3 的0.1mol/L的HCl溶液
首先量取9ml HCl,置于1000ml容量瓶中,用水稀釋至刻度,混勻即為0.1mol/L HCL溶液;按重量體積比 稱取氯化鐵20克,溶于1000ml 0.1mol/L 的HCL溶液中,即配成含2% FeCl3 的0.1mol/L的HCl溶液。
3.1.2 10%的三氯乙酸
稱取10g三氯乙酸,用水定容至100ml,即為10%的三氯乙酸。
3.1.3 標準溶液的配置
準確稱取1.0000g脲酶抑制劑標準品,用水定容至1000ml,配成1mg/L溶液,從中分別量取10ml、5ml、2.5ml、2ml、1ml、0.5ml、和0ml,用水分別定容至100ml,配制成標準濃度梯度為每毫升含AHA 0.1000mg、0.0500mg、0.0250mg、0.0200mg、0.0100mg、0.0050mg、0.0000mg。
3.1.4 待測樣品溶液的配制
稱取0.5-1g (精確至0.0001g)的待測樣品放入1000ml的容量瓶中,用水定容至刻度,從中取10ml,放入100ml的容量瓶中,用水定容至刻度,使待測樣品中AHA的含量在每毫升含0.05mg和0.1mg之間。
3.2 儀器與設備
3.2.1 高速離心機
離心力能夠達到12800xg。
3.2.2 分光光度計
用500nm波長可見光比色。
3.3 測定方法
取2ml的標準溶液或待測樣品溶液,用10%的三氯乙酸稀釋到10ml,靜置20min,然后在12800xg離心15min,取2ml上清液,加入1ml蒸餾水和1ml含2%FeCl3 的0.1mol/L的HCl溶液。將該溶液混勻,當出現葡萄酒紅色時立即在500nm下比色,從加入FeCl3 開始,這種紅色能夠穩定20min。參比溶液的配制方法相同,只是用2ml水取代2ml的待測樣品,在比色過程中用每次都用參比溶液調節滿度和零點。
3.4 公式與計算
脲酶抑制劑純度(%)=A*V*100/(m*1000)=A*1000/m
式中:
A=對應標準曲線吸光值查得的樣品質量,mg/ml;
m=稱取樣品的質量,g
V=待測樣品稀釋的總體積=1000*10=10000ml
4、脲酶抑制劑酸度測定方法
稱取0.0751gAHA,放入100ml容量瓶內,用蒸餾水定容至刻度。從中取1ml放入100ml容量瓶內,用蒸餾水定容至刻度,混合均勻即配制成0.1mol/L溶液,用吸管吸取數滴滴在廣泛pH試紙(1-14)上,用標準比色板對比pH。
5、脲酶抑制劑干燥失重測定方法
取脲酶抑制劑樣品,混合均勻,稱取1g共3份,放入預先在60℃烘干10小時至恒重并稱取的扁形稱量瓶中,然后將蓋半開,在60℃烘干10小時至恒重。取出時將蓋蓋好,置于干燥器中冷卻至室溫,然后稱重,從取樣量和減失的重量計算干燥失重。
6、脲酶抑制劑熾灼殘渣測定的方法
取脲酶抑制劑1g,置于熾灼至恒重的坩堝中,精確稱重,緩緩熾灼至完全炭化,放冷,加硫酸0.5ml使其濕潤,低溫加熱至硫酸蒸汽除盡后,在550℃熾灼至完全炭化,放冷,精確稱重后,在550℃熾灼至恒重即可。
7、脲酶抑制劑的用量和使用方法
7.1 用量
每天每頭肉牛飼喂AHA50-150毫克,或每千克日糧干物質含AHA5-25mg;每天每頭奶牛飼喂AHA50-150毫克,或每千克日糧干物質含AHA5-30mg;每天每只羊飼喂AHA10-50毫克,或每千克日糧干物質含AHA5-30mg。
7.2 使用方法
按照對不同反芻動物的用量,將AHA用載體均勻稀釋,可配制成為預混料、濃縮料或配合飼料,然后使用。
8、貯存條件和貯存期
用密封防潮包裝貯存,貯存有效期為18個月。
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