禽病毒性關節炎是由呼腸孤病毒(Reovirus)引起雞、火雞和其它家禽的一種傳染病。本病主要侵害關節滑膜、腱鞘和心肌,以發生關節炎、腱鞘炎及腓腸肌腱斷裂為特征。世界動物衛生組織(OIE,2002)將禽病毒性關節炎劃歸為B類動物疫病。
1957年Olson等最先發現病毒性關節炎,1967年又證實呼腸孤病毒是引起本病的病原。從那以后,美國、加拿大、法國、意大利、荷蘭、英國、以色列、澳大利亞、新西蘭、日本等國家和地區相繼有發生本病的報道。我國由于引進肉雞時檢疫不嚴格,80年代中后期在某些肉雞場也發生本病。1984年,王錫塑首次報道我國存在病毒性關節炎病毒(VAV)。本病多數情況下呈隱性感染。雞感染呼腸孤病毒后發病與否與嚴重程度,取決于宿主的年齡、病毒毒力和感染途徑。本病的經濟損失在于由運動障礙而引起生產性能下降,飼料利用率降低及淘汰率的增加。可使產蛋量下降10%~15%。
病原學
病毒性關節炎的病原是呼腸孤病毒。是呼腸孤病毒科(Reoviridae)正呼腸孤病毒屬(Orthoreovirus)成員之一。該病毒有兩層衣殼,衣殼為二十面體,由92個空心的殼粒組成。一般核心直徑為56 nm~65nm。衣殼直徑約為75nm。核酸是雙股RNA。在氯化銫中浮密度為1.36~1.37g/ml。病毒的基因組由分段的雙鏈RNA構成,病毒在細胞漿中復制,沒有囊膜。常在感染細胞漿中呈晶格狀排列。
本病毒可在雞胚卵黃囊、絨毛尿囊膜、雞胚成纖維細胞、幼齡雞腎、肺、睪丸等原代細胞、綠猴腎(Vero)、乳地鼠腎(BHK21)、貓腎(CRFK)、兔腎(RK)細胞內增殖。在細胞培養物中經3~5次盲目傳代,可產生典型的細胞病變—細胞融合。病毒經卵黃囊接種時,雞胚在接種后3~5天死亡,胚體發紫,內臟出血,延遲死亡的雞胚可見肝、脾腫大,并有壞死灶。經絨毛尿囊膜接種時,在死亡雞胚的絨毛尿囊膜上見到痘斑,在絨毛尿囊膜細胞內見到胞漿內包涵體。經尿囊腔接種時雞胚通常不死亡。
禽呼腸孤病毒株間有一個共同的抗原族,可以用免疫熒光、瓊脂擴散試驗來檢查。病毒株間抗原性不完全交叉,與哺乳動物的呼腸孤病毒沒有相關性。以血清中和試驗為基礎,在日本已分離出4個血清型,在美國有5個血清型。有人通過對很多地區的毒株作比較試驗,認為至少有11個血清型。該病毒不能凝集雞、鴨、鵝、火雞、牛、綿羊、兔、豚鼠、大鼠、小鼠和人O型的紅細胞。
病毒對氯仿、乙醚、DNA代謝抑制劑、放線菌素D、阿糖胞苷、pH3胰蛋白酶和脫氧膽酸鈉等有抵抗力,病毒對熱穩定,在卵黃中的病毒能耐56℃24h或60℃8~10h,37℃15~16周,22℃48~51周,4℃3年以上,-20℃4年以上,-63℃10年以上。病毒對2%~3%氫氧化鈉和70%乙醇較為敏感。
流行病學
傳染源:病雞和帶毒雞是主要傳染源,病毒在雞體內存留115天~289天。
傳播途徑:本病可以水平傳播和垂直傳播。水平感染是其主要的傳播方式。病雞、帶毒雞能長時間從糞便中排毒,污染飼料、飲水。本病也能經種蛋而垂直傳播,但傳播效率不高。在病毒血癥期間,昆蟲也可能起傳播作用。至于傳播的速度,與飼養方式和毒株有關,在平面飼養的肉雞群則水平傳播迅速,在籠養的蛋雞群則傳播緩慢,有些毒株的水平傳播能力很大,有些毒株則小。
易感宿主:本病只感染雞和火雞,肉雞比蛋雞易感,5~7周齡的肉用仔雞最常見。本病的發生與雞只日齡有著密切的關系,日齡越小,易感性愈高,1日齡雛雞最易感。隨著日齡的增加,易感性降低,日齡較大的雞雖可感染,但病情不嚴重,同時,潛伏期也較長。最近有人報道,鴨、鵝、鸚鵡也有一定的易感性。在自然感染后,病毒首先在呼吸道和消化道復制,24~48小時后出現病毒血癥,隨后即向體內各組織器官擴散,但以關節腔、腱鞘及消化道的含毒量較高。排毒途徑主要是消化道。
流行特征:本病的發病率可能很高,但病死率一般不高。本病感染率可高達100%,但死亡率通常不超過6%。大多數感染雞呈隱性經過,只有血清學和組織學的變化而無明顯臨床癥狀。發病雞一般占雞群總數的1%~10%。
癥狀
潛伏期的長短因毒株的毒力、接種途徑及雞的種類不同而不等。足掌接種第2天即見癥狀,肌肉接種需要5~9天,鼻竇內或氣管內接種需要9~11天,接觸感染的潛伏期更長。自然感染發病多見于4~7周齡的雞。
急性發病雞群,病初有較輕微的呼吸道癥狀,食欲和活力減退,不愿走動,蹲伏,貧血以及消瘦,隨后出現跛行,跗關節及其上方的腱鞘呈不同程度的腫脹,隨著病程發展,病雞跛行嚴重,關節和腱鞘腫脹,觸之有波動感和疼痛感,行走困難。接著病雞不愿站立,常以跗關節為支點,蹲坐在地面,幾乎不能行動,采食困難,食欲下降,經過10天后病雞開始死亡。
慢性雞群,病雞的跗關節及其腱鞘輕度腫脹,輕度跛行。多數病雞一肢患病較重,呈蹣跚樣步態,生長緩慢,飼料消耗量大,開產期延遲。個別雞的跗關節硬固,跖骨歪扭,趾向后屈曲,腓腸肌腱不同程度斷裂,脛跖關節失去控制,不能走動。還有一些雞,臨床上見不到什么癥狀,只是在血清學檢查時呈陽性反應。
有資料報道,患本病的雞常見灰綠色或黃綠色稀便,肛門周圍被糞便污染。另有報道,商品蛋雞發生本病時,關節疾患并不顯著,但產蛋量會下降10%~15%。
病理變化
本病的主要病變在脛跖關節(跗關節)、趾關節、趾屈肌腱及跖伸肌腱。急性病例,表現為關節囊及腱鞘水腫、充血或點狀出血。關節腔內含有少量較透明呈淡黃色或帶血色的滲出物,少數病例有膿性分泌物存在,有時含纖維素絮片。慢性病例關節腔內的滲出物較少,表現為關節硬固變形,不能將跗關節伸直到正常狀態,關節軟骨糜爛,滑膜出血。嚴重病例可見肌腱斷裂,出血和壞死等。此外,還可見心外膜炎,雛雞可見肝和心有小壞死灶。有的資料報道,病雞常見到不同程度卡他性腸炎變化。
組織學變化 可見急性病例的關節囊、腱鞘和滑膜水腫、凝固性壞死,異嗜性白細胞聚集,血管周圍細胞浸潤,滑膜細胞肥大增生,淋巴細胞和巨噬細胞浸潤,網狀細胞增生,滑膜腔內積聚大量的異嗜性白細胞,巨噬細胞及脫落的滑膜細胞。心肌纖維間異嗜性白細胞浸潤,這些是較為恒定的病理變化。慢性病例,可見滑膜的結締組織增生,網狀細胞、巨噬細胞、漿細胞的大量滲出物增生,滑膜形成纖毛狀突起等。有時可見到特征性的細胞浸潤顯著的心膜炎變化。
診斷
根據流行病學特征、典型癥狀及病理變化可作出初步診斷。確診需要進行病毒分離、鑒定及血清學試驗。
1.臨床綜合診斷:病雞群中有腱斷裂、腱鞘炎、脛跗部腱鞘腫脹的同時伴有心肌纖維間的異嗜性白細胞浸潤是有診斷意義的。
2.病毒分離與鑒定
(1)病料的采集:腫脹的腱鞘,跗關節或股關節液,氣管及腸內容物,脾臟等均含有較多的病毒,可作為病料的采集部位。本病可用雞胚卵黃囊或絨毛尿囊膜培養,也可用雞腎或雞繁殖,病毒的初代分離可采用雞胚卵黃囊途徑接種。
(2)雞胚接種:雞蛋應來自無呼腸孤病毒雞群,用5~7日齡雞胚,卵黃囊接種0.1~0.2ml可疑病料,絨毛尿囊膜途徑用觀察痘斑樣病變和胞漿包涵體。卵黃囊接種后3~5天,雞胚死亡,胚體明顯出血或紫紅,內臟器官充血出血,存活的雞胚矮小,肝脾和心臟增大,有壞死點,10日齡雞胚絨毛尿囊膜接種,3~5天死亡,絨毛尿囊膜出現痘斑樣病變。
(3)細胞培養:2~6周齡雞腎原代細胞,適于呼腸孤病毒的分離,接種病料后,通常24~48小時形成包涵體,合胞體細胞脫壁,細胞單層上留下空斑,整個細胞單層可于24小時內變性。
(4)病毒鑒定:呼腸孤病毒為雙股RNA病毒,其病毒的復制不為DNA代謝抑制物所抑制。該病毒耐熱,耐受乙醚和PH3的作用,從病毒結構看呼腸孤病毒粒子由一個56nm-65nm的芯髓和75nm的衣殼構成,在感染細胞漿中常呈晶格狀排列,衣殼由92個殼粒組成的20面體構成。感染的雞腎原代細胞或雞胚絨毛尿囊膜的中胚層細胞,經蘇木精染色或直接熒光抗體試驗可見胞漿包涵體,而上清液中不含包涵體,健康易感雞接種,瓊脂擴散和病毒中和試驗用于病毒鑒定。用雞胚液經腳墊接種1日齡SPF雛雞,應出現病毒性關節炎的典型病變。
3.血清學試驗
(1)瓊脂擴散試驗:主要用于流行病學調查。所有禽的呼腸孤病毒含有相同的群特異性沉淀抗原。血清中的沉淀抗體在感染后的第17天出現,一般在感染后4周內消失,但患有關節炎病禽體內的沉淀抗體可長期存在。可以每日進行一次抗體監測。將標準毒株接種于5~7日齡的雞胚卵黃囊內,待其死亡后立即收獲絨毛尿囊膜,磨成乳劑,即為抗原。也可用感染雞腎細胞培養物作為抗原。經腳掌人工感染的雞,于接種后2~3周,血清中出現瓊脂擴散抗體,在有關節病變的雞體內,抗體可能長期持續存在。
(2)熒光抗體診斷:多用直接法檢查病雞。可用于病毒血清型的鑒定。最好用雞腎原代細胞做空斑減少試驗,血清滴度達40或更高時具有診斷意義。據資料報道,肝、脾、腱鞘等組織檢出的特異性熒光非常明顯,而心、肺、腎等器官的陽性檢出率較低。本法能在2小時內得出結果,是目前實用的快速診斷法。
4.鑒別診斷
本病易與傳染性滑膜炎及葡萄球菌感染等相混淆。
(1)傳染性滑膜炎是由滑膜霉形體引起,病雞關節腔內的滲出物比較粘稠,呈乳酪樣,肉眼鑒別有困難時,可進行血清學試驗或病原的分離鑒定。
(2)葡萄球菌引起的關節炎,多發生于2~4周齡的雞,滑液混濁呈化膿性,細菌分離有大量的金黃色葡萄球菌。
(3)其他如沙門氏菌、巴氏桿菌和丹毒絲桿菌偶爾也引起關節炎,也可以通過培養及鑒定加區別。
(4)馬立克氏病以及非感染性疾病如佝僂病,脊椎前移,軟骨發育不良,中毒,維生素及微量元素的缺乏等也可導致跛行,應注意區分。
防疫措施
對發病雞只尚無有效的治療方法。對本病的預防和防制,目前主要依靠綜合性防疫措施。對商品雞采取“全進、全出”的飼養方式,每批雞出售后要徹底消毒雞舍,并空置一段時間。不從有本病的雞場引入雞苗,防止發生經蛋傳播。對患病種雞要堅決淘汰,種蛋要慎重選擇。
應用疫苗時,應考慮病毒血清型的差異;如用弱毒疫苗,需注意弱毒活苗對雛雞的致病性,有些弱毒活苗還能通過種蛋傳給下—代。最好選用滅活苗給繁殖母雞進行免疫,通過母源抗體的被動免疫來保護雛雞。對于種雞群,—般于1~7日齡、4周齡時各接種1次多價弱毒疫苗,在開產前接種1次滅活疫苗。對于肉雞群,在1日齡以多價弱毒疫苗接種1次即可。但該活苗可能影響馬立克氏病疫苗的免疫效果。為了克服這一缺陷,可用油佐劑滅活苗免疫種雞群,可在種雞開產前2~3周注射油乳劑滅活苗,使雛雞獲得較高的母源抗體而得到保護,可保護小雞在3周內不受感染。也可以在雛雞2周齡時先接種一次弱毒疫苗,在開產前再注射一次油乳劑滅活苗。疫苗的保護作用只對同源性的血清型有效。