我國的養(yǎng)豬水平和規(guī)模在近年有了很大的提高。但隨之而來的是豬群的密度也越來越大，豬的抵抗力逐步降低，另外在引進(jìn)新品種時(shí)也不斷引進(jìn)新的豬病，特別是免疫抑制性疾病如豬圓環(huán)病毒和豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒的引進(jìn)，導(dǎo)致豬病越來越錯(cuò)綜復(fù)雜，給診斷和防制帶來很多困擾。因而對(duì)于一個(gè)現(xiàn)代養(yǎng)豬企業(yè)，出現(xiàn)豬病的問題或生產(chǎn)表現(xiàn)不理想，不能簡(jiǎn)單地歸因于某一疾病，而要全面系統(tǒng)的分析問題，找到問題的關(guān)鍵，提出綜合防制措施。但很多豬場(chǎng)即使通過臨床觀察、病理解剖、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)分析，仍然不能準(zhǔn)確地獲得豬病的有關(guān)信息，制定有針對(duì)性的綜合防制措施，這就關(guān)系到要正確設(shè)計(jì)豬場(chǎng)的檢測(cè)項(xiàng)目，對(duì)整個(gè)豬群的疫病進(jìn)行動(dòng)態(tài)的分析，然后對(duì)取得的化驗(yàn)結(jié)果能夠正確分析，并用于指導(dǎo)生產(chǎn)。本文是對(duì)某一大型豬場(chǎng)的疾病的臨床觀察和主要豬并的動(dòng)態(tài)的系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)于結(jié)果分析，希望能拋磚引玉，通過對(duì)這一個(gè)案的分析和處理，給廣大養(yǎng)豬企業(yè)和豬場(chǎng)獸醫(yī)提供一個(gè)診斷和分析豬病的參考。
1 材料與方法
1.1 豬場(chǎng)的背景
該豬場(chǎng)是一個(gè)大型豬場(chǎng)，年出欄量為60，000頭，檢測(cè)的是其中的一條生產(chǎn)線，存欄母豬為1，200頭。產(chǎn)房小豬的成活率、保育小豬的成活率以及生長(zhǎng)肥育舍的成活率都在較高的水平。生長(zhǎng)肥育的早期有消瘦、喘氣等問題。母豬的年均窩產(chǎn)活仔數(shù)偏低，主要表現(xiàn)在復(fù)配率高、流產(chǎn)率高、死胎木乃伊和弱仔多。另外通過屠宰場(chǎng)的觀察可以看到中豬的肺有較多的炎癥反應(yīng)，脾有腫大、腎有腫大及出血點(diǎn)等問題。豬瘟疫苗是某品牌的兔化弱毒, 用牛睪丸細(xì)胞培養(yǎng)而成, 4和8周齡分別注射3和5頭份；偽狂犬疫苗是某品牌的進(jìn)口疫苗，母豬每年免疫3次，小豬10周齡注射一次；小豬在10日齡和21日齡分別注射豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒弱毒疫苗（美洲株）。
1.2 血清樣品的采集
對(duì)該生產(chǎn)線的各個(gè)階段的豬，包括后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬和1、2、3、4、6、8、10、12、14、16、18、20周齡的豬各10頭（12周齡組為9頭）采血5毫升，分離血清用于檢測(cè)分析。分析豬繁殖與呼吸障礙綜合征時(shí),也用的是同一生產(chǎn)線的豬,但分組有一定的變化,采集了后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、出生后1小時(shí)（吃初乳前）、7、14、21、45、90、180日齡的豬各10頭，采集血液5毫升，分離血清用于檢測(cè)分析。
1.3 檢測(cè)試劑盒
豬瘟抗體檢測(cè)用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，試劑盒為HIRPA產(chǎn)品; 豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體檢測(cè)應(yīng)用間接ELISA法，試劑盒為HIRPA產(chǎn)品；豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)用間接ELISA方法，試劑盒由華中農(nóng)大出品；豬胸膜肺炎放線桿菌抗體檢測(cè)用ELISA，試劑盒為HIRPA產(chǎn)品; 豬偽狂犬病病毒野毒抗體檢測(cè)為競(jìng)爭(zhēng)ELISA，試劑盒為IDEXX產(chǎn)品；豬衣原體檢測(cè)用間接血凝試驗(yàn)，試劑盒由蘭州獸醫(yī)研究所提供；豬弓形體檢測(cè)用間接血凝試驗(yàn)，試劑盒由蘭州獸醫(yī)研究所提供。所有檢測(cè)分析在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所豬病研究室完成。
2 結(jié)果
對(duì)不同階段的豬群進(jìn)行了系統(tǒng)的采血化驗(yàn)分析，主要分析了豬瘟、豬偽狂犬病、豬傳染性胸膜肺炎、弓形體、衣原體等疾病，結(jié)果見圖1。 豬繁殖與呼吸障礙病毒抗體的檢測(cè)結(jié)果見圖4。
通過檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)豬場(chǎng)的疫病情況比較復(fù)雜，主要的問題是在圓環(huán)病毒的基礎(chǔ)上,存在豬瘟、豬偽狂犬病、藍(lán)耳病、豬傳染性胸膜肺炎、弓形體、衣原體等問題。尤其是豬瘟和豬偽狂犬的問題比較突出。
圖1 某豬場(chǎng)幾種主要豬病抗體水平分析結(jié)果
3 討論
為了更充分地分析該豬場(chǎng)存在的問題, 我們將圖1中的每一個(gè)病的試驗(yàn)數(shù)據(jù)單獨(dú)列出來進(jìn)一步分析, 以找出疾病發(fā)生和變化的規(guī)律。
3.1 豬瘟抗體檢測(cè)結(jié)果分析
圖2為豬瘟的抗體變化規(guī)律，我們可以看到后備母豬和20周齡的大豬的豬瘟抗體水平達(dá)到了100%合格。經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體合格率為80%，1和2周齡的小豬的合格率為70%，3周齡的小豬的抗體水平降低到50%陽性，到第4周升高為90%，此時(shí)注射了一次豬瘟疫苗第6周時(shí)有所降低，第8周降至最低點(diǎn)，此時(shí)注射一次豬瘟疫苗，但疫苗注射后看不到抗體水平的迅速升高，直到第16周采達(dá)到60%的陽性率，第18周達(dá)到90%的陽性率。
圖2 某豬場(chǎng)豬瘟抗體的變化規(guī)律
分析圖2的豬瘟抗體變化規(guī)律，我們可以看出豬瘟抗體有兩個(gè)明顯的低谷，第一個(gè)是在第4周時(shí)，造成這一低谷的可能性有以下幾方面：其一可能是母源抗體的自然下降，其二可能是在15日齡以后有豬瘟野毒的感染中和了豬瘟抗體，其三可能是斷奶應(yīng)激引起的抗體水平降低。第二個(gè)抗體低谷是在8周齡時(shí)，此時(shí)的低谷可能是豬的母源抗體自然下降到最低水平，也可能是大量自然感染或應(yīng)激造成的抗體水平下降，但令人感到不滿意的是第8周的疫苗注射并沒有起到應(yīng)有的作用，抗體水平?jīng)]有如預(yù)期的在1～2周達(dá)到高峰，而是波浪狀緩慢上升，其原因很復(fù)雜，第一，疫苗的質(zhì)量問題；第二，免疫抑制問題，引起免疫抑制的原因很多，我想其中有圓環(huán)病毒的感染，有偽狂犬的感染，有其他細(xì)菌病的繼發(fā)感染，更有可能是豬瘟野毒在疫苗注射前的感染，造成對(duì)疫苗無免疫反應(yīng)。根據(jù)以往的研究，豬瘟病毒的母源抗體可以持續(xù)到42日齡，因而我個(gè)人的觀點(diǎn)是要想辦法把母豬的抗體水平盡量提高并且保持較好的整齊度，這樣母豬最好每年3次（或分娩前加強(qiáng)免疫一次），選用好的疫苗，如果母豬達(dá)到了較高且整齊的抗體水平，則小豬的首次免疫可以安排在40～45日齡，第二次免疫可以安排在10～15 d后，兩次這樣的免疫應(yīng)該可以使豬維持對(duì)豬瘟病毒的抵抗力到出欄。
3.1 豬偽狂犬病病毒抗體的檢測(cè)結(jié)果分析
圖3 是偽狂犬的野毒抗體變化規(guī)律，豬群的采樣方法同豬瘟，偽狂犬野毒的百分率越低，說明感染越少。我們可以清楚地看出大豬階段（16～20周齡）幾乎沒有偽狂犬野毒的感染，在后備母豬階段感染率為30%，到經(jīng)產(chǎn)母豬階段感染率為50%，從后備母豬到經(jīng)產(chǎn)母豬有一個(gè)感染上升期，說明我們的疫苗免疫保護(hù)程度不夠，或同時(shí)豬群內(nèi)的偽狂犬野毒濃度過高。除了1周齡外，偽狂犬野毒抗體還有兩個(gè)高峰，第一個(gè)是在第4周齡，第二個(gè)是在第14周齡。在第二個(gè)感染高峰前注射過一次偽狂犬疫苗（進(jìn)口gE基因確失疫苗），但所起到的作用似乎不大，沒能有效抵御偽狂犬野毒的感染，說明疫苗使用的時(shí)機(jī)有一定的問題，因此我建議偽狂犬疫苗要進(jìn)行兩次免疫，第一次要早，要控制一周齡時(shí)的早期感染，第二次免疫要提前到第7～8周。
圖3 偽狂犬野毒抗體的變化規(guī)律
3.2 豬圓環(huán)病毒2型抗體的變化規(guī)律
從圖4 的結(jié)果可以看出,豬的圓環(huán)病毒抗體有一定的階段性,抗體有兩個(gè)高峰,一個(gè)在1～2周齡時(shí), 是從母體獲得的母源抗體, 另外一個(gè)是在8～10周齡,是由于圓環(huán)病毒感染造成的,然后到大豬階段,抗體水平降低到無法檢測(cè),也說明病毒在這一階段的感染較輕微。豬圓環(huán)病毒的感染對(duì)豬的危害很大，豬群健康水平較低的時(shí)段與圓環(huán)病毒感染在時(shí)間上是吻合的，這就為我們對(duì)免疫失敗、繼發(fā)感染嚴(yán)重、豬的呼吸道問題的增多等提供了理論依據(jù)，也為我們對(duì)疫病防制提供了新的思路。
圖4 豬2型圓環(huán)病毒抗體的變化規(guī)律
3.3 豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體的變化規(guī)律
圖4表示的是同一個(gè)生產(chǎn)線的(早一個(gè)月)的豬的繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體變化規(guī)律。豬群的采血安排有一定的變化，我們更注意了早期的抗體水平的檢測(cè)。分別采了經(jīng)產(chǎn)母豬、出生1h的小豬（吃初乳前）、7日齡、14日齡、21日齡、45日齡、90日齡、180日齡的豬各10頭，同時(shí)用ELISA方法（為HIRPA的PRRSV抗體試劑盒）測(cè)定抗體水平，圖中的縱坐標(biāo)是抗體陽性百分率。紅色箭頭表示的是在10日齡和21日齡注射過蘭耳病的弱毒疫苗。從圖4 中我們可以知道，小豬在獲得母源抗體前幾乎沒有PRRSV抗體。在吃到初乳后，抗體水平出現(xiàn)顯著的升高。由于連續(xù)注射了兩次蘭耳病的疫苗，所以蘭耳病的抗體沒有出現(xiàn)明顯的高峰和低谷，但我們?nèi)匀豢梢园l(fā)現(xiàn)一些規(guī)律，如第二次疫苗注射后，抗體水平看不到明顯的上升，而是有所下降，說明因?yàn)樽⑸鋾r(shí)機(jī)、豬體的免疫抑制等原因，疫苗的的免疫效果并未得到充分的表現(xiàn)。另外一個(gè)令人吃驚的現(xiàn)象是在中豬特別是在大豬階段，PRRSV的抗體水平有一定的升高，說明在大豬階段豬體對(duì)蘭耳病仍然有很強(qiáng)的感染力，要提醒大家注意蘭耳病對(duì)中豬尤其是大豬的影響。
圖4 豬場(chǎng)的蘭耳病病毒抗體和圓環(huán)病毒抗體水平的變化情況
3.4 豬胸膜肺炎放線桿菌抗體的變化規(guī)律
圖5是對(duì)豬群的胸膜肺炎放線桿菌抗體的調(diào)查。我們可以很清楚地看出我們的大豬階段并沒有APP的感染, 到了后備母豬階段有60%的感染率, 而到了經(jīng)產(chǎn)母豬階段,感染率進(jìn)一步提高, 達(dá)到80%, 說明我們的大豬的通風(fēng)等飼養(yǎng)環(huán)境要比后備母豬好,另外一個(gè)原因可能是后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的生活周期長(zhǎng),導(dǎo)致感染的幾率增加,但我更傾向于前者。這就提醒我們注意后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的環(huán)境條件對(duì)豬病的影響。
APP抗體水平的變化也有幾個(gè)明顯的高峰，第一個(gè)是由母源抗體引起的，位于1周齡，但下降很快，在第二周即達(dá)到了一個(gè)低谷，然后是第二個(gè)高峰。在這兩個(gè)高峰中間應(yīng)該有一個(gè)早期的感染過程。這兩個(gè)高峰對(duì)我們有一定的啟示，其一是APP的母源抗體下降很快，10d左右即下降到不足以保護(hù)小豬的程度，其二是APP的感染可以很早，當(dāng)然早期的這些抗體也可能是副豬嗜血桿菌引起的，因?yàn)樵撛噭┖袑?duì)也可以檢測(cè)到早期的副豬嗜血桿菌的感染，只是數(shù)值較低。APP的抗體的另外一個(gè)高峰是在第12周。說明在APP抗體較低、豬感染圓環(huán)病毒的階段、豬的應(yīng)激較大的階段APP的繼發(fā)感染較嚴(yán)重。
通過對(duì)APP抗體的分析，我們對(duì)APP的防制有了一個(gè)總體的概念，就是第一要重視母豬的保健，預(yù)防小豬在產(chǎn)房階段的早期感染，第二是在敏感的6～12周階段注意合理的用藥，當(dāng)然必要時(shí)也可以使用藥物進(jìn)行控制。
圖5 豬胸膜肺炎放線桿菌抗體的變化規(guī)律
3.5 豬衣原體抗體的變化規(guī)律
我們也對(duì)衣原體的情況進(jìn)行了分析，結(jié)果見圖6。
從圖6可以明白, 該豬場(chǎng)始終存在較嚴(yán)重的衣原體感染,而且仔細(xì)分析會(huì)發(fā)現(xiàn),衣原體的感染在經(jīng)產(chǎn)母豬達(dá)到了最高峰, 提示產(chǎn)房母豬是一個(gè)重要的傳染源, 再進(jìn)一步往上推,可以發(fā)現(xiàn)公豬在衣原體的傳播中起到了不可忽視的作用,該場(chǎng)公豬有較高的感染率(數(shù)據(jù)未顯示)。
衣原體是一個(gè)以繁殖障礙為主的疾病,從圖中也可以看出,種豬群的問題比較突出,從一個(gè)側(cè)面印證了衣原體對(duì)處于繁殖期的生產(chǎn)種豬的影響較大。
圖6 衣原體的抗體變化規(guī)律
3.6 豬弓形體抗體的變化規(guī)律
對(duì)豬場(chǎng)的弓形體[10]的發(fā)生情況也進(jìn)行了檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見圖7。
圖7 弓形體抗體的變化規(guī)律
從圖7可以看出，在檢測(cè)前豬場(chǎng)的發(fā)生過一次弓形體爆發(fā)流行，可能在檢測(cè)時(shí)仍在流行。我們從中可以得到的有用信息是后備母豬、母豬、16～20周齡的大豬均未檢測(cè)到抗體，而抵抗力較弱的第6～8周感染最嚴(yán)重，陽性率達(dá)到了20%，2～4周齡和10～14周齡的豬也較易感，那么我們?cè)诩铀帟r(shí)就可以對(duì)一些重點(diǎn)階段重點(diǎn)關(guān)照。此結(jié)果也是對(duì)豬的抵抗力的一個(gè)很好的檢驗(yàn),從中我們可以很清楚地了解到現(xiàn)代養(yǎng)豬生產(chǎn)中哪個(gè)階段豬群的抵抗力最弱。
3.7 豬瘟病毒和豬圓環(huán)病毒抗體的比較分析
通過這一次調(diào)查我們也發(fā)現(xiàn)了一個(gè)有趣的現(xiàn)象，我們將PCV2的和豬瘟的抗體變化曲線放在一起比較，結(jié)果見圖8。
從圖8我們可以發(fā)現(xiàn)每當(dāng)圓環(huán)病毒抗體水平高的時(shí)候，豬瘟抗體的合格率就明顯下降，共有4個(gè)這樣的交叉變化。第一個(gè)是在后備母豬和母豬階段；第二個(gè)是在4～6周齡；第三個(gè)是在8～10周齡；第四個(gè)是在14～20周齡。通過這樣4個(gè)交叉，我們可以看出豬圓環(huán)病毒對(duì)豬瘟的免疫抑制是多么強(qiáng)烈，也提醒我們預(yù)防和控制豬圓環(huán)病毒的重要性。
圖8 豬瘟和豬圓環(huán)病毒抗體水平的比較
綜上所述， 該豬場(chǎng)第2周各種抗體因?yàn)槟冈纯贵w的原因抗體水平均較高，但第三周有一個(gè)低谷，可能是受到了病原的感染，也可能是斷奶的應(yīng)激造成的，到第6周開始母源抗體開始下降，各種感染也開始嚴(yán)重，是豬群抵抗力最弱的階段，與實(shí)際生產(chǎn)中的豬群的臨床表現(xiàn)和生產(chǎn)水平也是一致的（見圖1）。這樣就為我們?cè)谝呙绲淖⑸鋾r(shí)機(jī)，疫苗效果的評(píng)估，藥物預(yù)防和治療的時(shí)機(jī)等方面提供了較有意義的參考資料。所以對(duì)有條件的大型豬場(chǎng)，可以定期進(jìn)行系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)的豬病檢測(cè)分析，這樣才能在豬病預(yù)防和治療過程中有的放矢，取得滿意的效果。
豬業(yè)科學(xué)
