1 材料與方法

    1.1 藥品 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液，規(guī)格5 ml:500 mg(SMMNa)+100 mg(TMP)+250 mg(乙胺嘧啶)，渝獸藥字（2003）×068060（批號20040629）；青霉素鉀可溶性粉，規(guī)格160萬IU/瓶，黑獸藥字（2001）×005030（批號20040403）；硫酸慶大霉素注射液，規(guī)格5 ml：20萬IU/支，遼獸藥字（2000）×017024（批號：20040918）；硫酸卡那霉素注射液，規(guī)格10 ml：100萬IU（10 ml：1.0 g），浙獸藥字（2001）×013410(批號：20030411)；長效抗菌劑土霉素注射液，規(guī)格5 ml:100萬IU，贛獸藥字（2003）×001023（批號：20040607）。1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 盤錦、錦州等地自然發(fā)病杜洛克、長白、約克夏三元雜交仔豬，公母均有，40～50日齡，體重為11.6～13.8 kg，共116頭。?

    1.3 豬附紅細(xì)胞體病的確診?

    1.3.1 臨床癥狀 急性型：病初患豬體溫升高達(dá)40℃～42℃，呈稽留熱型，厭食，反應(yīng)遲鈍，不愿活動(dòng)。隨后可見鼻腔分泌物增多，咳嗽，呼吸困難，可視黏膜蒼白、黃疸。糞便初期干硬并帶有黏液和黏膜，有時(shí)便秘和腹瀉交替發(fā)生。耳廓、尾部和四肢末端皮膚發(fā)紺，呈暗紅色或紫紅色。慢性型：患畜出現(xiàn)漸進(jìn)性衰弱，消瘦，皮膚蒼白、黃疸，易繼發(fā)感染導(dǎo)致死亡。

    1.3.2 病理變化 剖檢：可見黏膜、皮膚蒼白，血液稀薄，脾臟腫大，淋巴結(jié)腫大，腹水，胸腔積水，心包積水。 病理組織學(xué)特點(diǎn)：腦血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，有漿液性纖維素滲出，腦軟膜充血、出血，大量白細(xì)胞聚集。神經(jīng)細(xì)胞核腫脹、壞死、破碎。骨髓增殖。肝臟有含鐵血黃色素沉積，肝小葉部分壞死，肝細(xì)胞濁腫、空泡變性，有點(diǎn)狀出血和壞死灶，中央靜脈擴(kuò)張、水腫，肝竇狀隙擴(kuò)張，小葉間膽管擴(kuò)張，間質(zhì)性肺炎，脾充血、出血，濾泡纖維素增生，濾泡消失。?

    1.3.3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn) (1)取抗凝血或鮮血一滴，加生理鹽水置載玻片上，蓋以蓋玻片，滴香柏油后用油鏡放大1000倍觀察，在鏡下見有帶刺紅細(xì)胞（有稱齒狀），或紅細(xì)胞周圍附著若干半圓形或圓形附著物（有稱狼牙棒狀、菠蘿狀、檸檬狀等），紅細(xì)胞并有微微顫動(dòng)，以及紅細(xì)胞的皺縮、變形等?；蛟谘獫{中見有圓形或不定形大小不一的游動(dòng)物體的情況，即診斷為附紅細(xì)胞體?。ê喎Q鮮血壓片陽性）。(2)每頭豬推制血片兩張以上，干燥后固定，用姬姆薩氏和瑞氏染液各染一張，置油鏡下觀察。在紅細(xì)胞表面或血漿中檢出圓盤狀、球狀、環(huán)狀，呈稍淡紫紅色大小為?0.8～?2.5 μm的豬附紅細(xì)胞體。(3)取3頭病死豬的血液和1頭健康無附紅細(xì)胞體易感染豬的血液各2 ml，各加青霉素、鏈霉素1000 IU(μg)，分別接種于附紅細(xì)胞體陰性的健康兔（2～3月齡）各2只，觀察2周。結(jié)果：病豬血液接種兔4天后，兔表現(xiàn)精神沉郁，被毛松亂，不好動(dòng)，7天后，血檢發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞表面有蟲體附著，其形態(tài)、大小和運(yùn)動(dòng)性均與上述豬血片中所見相同，紅細(xì)胞感染率為60%～80%，10天后兔可視黏膜蒼白、表現(xiàn)明顯消瘦，紅細(xì)胞感染率80%以上；健康豬血液接種兔后，對照兔無臨床表現(xiàn)，血液也未檢出附紅細(xì)胞體。?

    1.4 實(shí)驗(yàn)性治療 當(dāng)發(fā)病后約10天，豬只出現(xiàn)體溫升高、黃疸、貧血、精神沉郁、食欲下降或廢絕等癥狀時(shí)，按表1分別對各組豬給藥。每次用藥前測量直腸溫度及臨床癥狀。觀察期為第1次給藥后15天，并對每頭豬進(jìn)行試驗(yàn)前后的稱重及體況觀察，療程均為5天。?

    療效評價(jià)指標(biāo)：(1)死亡率。在試驗(yàn)期間，豬只出現(xiàn)附紅細(xì)胞體病的典型癥狀并死亡，尸體剖檢有典型特征性病變，血液壓片陽性，血液推片姬姆薩氏和瑞氏染色檢驗(yàn)，有附紅細(xì)胞體存在。根據(jù)每組動(dòng)物中的死亡數(shù)計(jì)算死亡率。(2)治愈率。在試驗(yàn)期間，豬只用藥后體溫、精神、食欲均恢復(fù)正常，不再出現(xiàn)體溫升高、黃疸、貧血等臨床癥狀，根據(jù)這些豬只的數(shù)量計(jì)算出治愈率。(3)有效率。治愈的豬以及給藥后體溫降低或恢復(fù)正常，食欲增加，但出現(xiàn)黃疸、貧血等癥狀的豬，均判定為有效。據(jù)此計(jì)算有效率。(4)增重率。根據(jù)開始時(shí)及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每頭豬的體重，計(jì)算每頭豬的增重量，然后根據(jù)此計(jì)算每組實(shí)驗(yàn)豬的平均增重和標(biāo)準(zhǔn)差。相對增重率是按各用藥組與健康對照組的平均增重之比計(jì)算，其中健康對照組設(shè)定為100%。

    表1 實(shí)驗(yàn)豬分組和處理情況

    組別 1 2 3 4 5 6 7

    藥物 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉?混懸注射液組青霉素鉀 慶大霉素 卡那霉素 土霉素 感染?對照組 健康對照組

    動(dòng)物頭數(shù) 20 20 20 20 20 6 20

    給藥途徑 肌肉注射 靜脈注射 肌肉注射 肌肉注射 靜脈注射

    劑量 0.3 ml/kg體重?24 h 1次 3萬IU/kg體重?12 h 1次 2 mg/kg體重?12 h 1次 15 mg/kg體重?12 h 1次 15 mg/kg體重?12 h 1次

    1.5 數(shù)據(jù)分析和處理 用生物統(tǒng)計(jì)方法處理數(shù)據(jù)，其中死亡率、有效率及治愈率均用卡方

    檢驗(yàn)，增重采用t檢驗(yàn)。?

    2 結(jié)果 ?

    2.1 感染對照組 感染對照豬均出現(xiàn)體溫升高達(dá)40℃～42℃，精神沉郁，食欲不振，貧血，鼻腔分泌物增多，咳嗽，呼吸困難，可視黏膜蒼白、黃疸。 糞便初期干硬并帶有黏液和黏膜，有時(shí)便秘和腹瀉交替發(fā)生。16頭豬中8頭在發(fā)病4～10天死亡，剖檢可見黏膜、皮膚蒼白，血液稀薄，脾臟腫大，淋巴結(jié)腫大，腹水，胸腔、心包積水。?

    2.2 試驗(yàn)性治療 開始給藥后15天內(nèi)，各組豬的死亡率、治愈率、有效率見表2。

    表2 治療結(jié)果

    組別 頭數(shù) 死亡率% 有效率% 治愈率% 15天增重kg 相對增重率%

    1 20 0.00 100.00 100.00 5.60±1.43 86.7

    2 20 25.00 80.00 75.00 5.08±1.35 78.6

    3 20 30.00 75.00 70.00 4.53±1.32 70.1

    4 20 20.00 85.00 80.00 5.18±1.36 80.1

    5 20 10.00 90.00 85.00 5.36±1.40 83.0

    6 16 50.00 25.00 00.00 1.78±1.26 27.6

    7 20 0.00 — — 6.46±1.48 100.00

    2.3 各組死亡率統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 青霉素組、慶大霉素組、卡那霉素組、土霉素組與感染對照組的差異無顯著性意義（P＞0.05）。復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液組和感染對照組比較差異極顯著（P0.01）。?

    2.4 治愈率、有效率統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液組與青霉素組、慶大霉素組、卡那霉素組、土霉素組在治愈率、有效率上差異極顯著（?P＜0.01）。?

    2.5 相對增重率分析 各治療組與感染對照組的相對增重率比較差異極顯著（P＜0.01），但均低于健康對照組。?

    3 小結(jié)

    3.1 各組死亡率、治愈率、有效率統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 說明復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液在控制豬附紅細(xì)胞體病死亡上有很好的效果；復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液在豬附紅細(xì)胞體病治愈率、有效率上高于青霉素、慶大霉素、卡那霉素、土霉素。?

    3.2 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液為長效復(fù)方磺胺類藥物，SMM及TMP抑制病原體二氫葉酸合成酶和二氫葉酸還原酶的活性，對病原體核酸代謝起著雙重阻斷作用，從而使SMM的抗菌效果增強(qiáng)數(shù)倍至數(shù)十倍，并產(chǎn)生殺菌作用，減少耐藥菌株的產(chǎn)生。乙胺嘧啶具有抑殺血蟲作用。對革蘭氏陰性、陽性細(xì)菌和弓形蟲均有殺滅作用。?

    試驗(yàn)結(jié)果和藥理作用顯示出復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液在治療豬附紅細(xì)胞體病方面將

    有廣闊的應(yīng)用前景。

    1 材料與方法

    1.1 藥品 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液，規(guī)格5 ml:500 mg(SMMNa)+100 mg(TMP)+250 mg(乙胺嘧啶)，渝獸藥字（2003）×068060（批號20040629）；青霉素鉀可溶性粉，規(guī)格160萬IU/瓶，黑獸藥字（2001）×005030（批號20040403）；硫酸慶大霉素注射液，規(guī)格5 ml：20萬IU/支，遼獸藥字（2000）×017024（批號：20040918）；硫酸卡那霉素注射液，規(guī)格10 ml：100萬IU（10 ml：1.0 g），浙獸藥字（2001）×013410(批號：20030411)；長效抗菌劑土霉素注射液，規(guī)格5 ml:100萬IU，贛獸藥字（2003）×001023（批號：20040607）。1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 盤錦、錦州等地自然發(fā)病杜洛克、長白、約克夏三元雜交仔豬，公母均有，40～50日齡，體重為11.6～13.8 kg，共116頭。?

    1.3 豬附紅細(xì)胞體病的確診?

    1.3.1 臨床癥狀 急性型：病初患豬體溫升高達(dá)40℃～42℃，呈稽留熱型，厭食，反應(yīng)遲鈍，不愿活動(dòng)。隨后可見鼻腔分泌物增多，咳嗽，呼吸困難，可視黏膜蒼白、黃疸。糞便初期干硬并帶有黏液和黏膜，有時(shí)便秘和腹瀉交替發(fā)生。耳廓、尾部和四肢末端皮膚發(fā)紺，呈暗紅色或紫紅色。慢性型：患畜出現(xiàn)漸進(jìn)性衰弱，消瘦，皮膚蒼白、黃疸，易繼發(fā)感染導(dǎo)致死亡。

    1.3.2 病理變化 剖檢：可見黏膜、皮膚蒼白，血液稀薄，脾臟腫大，淋巴結(jié)腫大，腹水，胸腔積水，心包積水。 病理組織學(xué)特點(diǎn)：腦血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，有漿液性纖維素滲出，腦軟膜充血、出血，大量白細(xì)胞聚集。神經(jīng)細(xì)胞核腫脹、壞死、破碎。骨髓增殖。肝臟有含鐵血黃色素沉積，肝小葉部分壞死，肝細(xì)胞濁腫、空泡變性，有點(diǎn)狀出血和壞死灶，中央靜脈擴(kuò)張、水腫，肝竇狀隙擴(kuò)張，小葉間膽管擴(kuò)張，間質(zhì)性肺炎，脾充血、出血，濾泡纖維素增生，濾泡消失。?

    1.3.3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn) (1)取抗凝血或鮮血一滴，加生理鹽水置載玻片上，蓋以蓋玻片，滴香柏油后用油鏡放大1000倍觀察，在鏡下見有帶刺紅細(xì)胞（有稱齒狀），或紅細(xì)胞周圍附著若干半圓形或圓形附著物（有稱狼牙棒狀、菠蘿狀、檸檬狀等），紅細(xì)胞并有微微顫動(dòng)，以及紅細(xì)胞的皺縮、變形等?；蛟谘獫{中見有圓形或不定形大小不一的游動(dòng)物體的情況，即診斷為附紅細(xì)胞體病（簡稱鮮血壓片陽性）。(2)每頭豬推制血片兩張以上，干燥后固定，用姬姆薩氏和瑞氏染液各染一張，置油鏡下觀察。在紅細(xì)胞表面或血漿中檢出圓盤狀、球狀、環(huán)狀，呈稍淡紫紅色大小為?0.8～?2.5 μm的豬附紅細(xì)胞體。(3)取3頭病死豬的血液和1頭健康無附紅細(xì)胞體易感染豬的血液各2 ml，各加青霉素、鏈霉素1000 IU(μg)，分別接種于附紅細(xì)胞體陰性的健康兔（2～3月齡）各2只，觀察2周。結(jié)果：病豬血液接種兔4天后，兔表現(xiàn)精神沉郁，被毛松亂，不好動(dòng)，7天后，血檢發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞表面有蟲體附著，其形態(tài)、大小和運(yùn)動(dòng)性均與上述豬血片中所見相同，紅細(xì)胞感染率為60%～80%，10天后兔可視黏膜蒼白、表現(xiàn)明顯消瘦，紅細(xì)胞感染率80%以上；健康豬血液接種兔后，對照兔無臨床表現(xiàn)，血液也未檢出附紅細(xì)胞體。?

    1.4 實(shí)驗(yàn)性治療 當(dāng)發(fā)病后約10天，豬只出現(xiàn)體溫升高、黃疸、貧血、精神沉郁、食欲下降或廢絕等癥狀時(shí)，按表1分別對各組豬給藥。每次用藥前測量直腸溫度及臨床癥狀。觀察期為第1次給藥后15天，并對每頭豬進(jìn)行試驗(yàn)前后的稱重及體況觀察，療程均為5天。?

    療效評價(jià)指標(biāo)：(1)死亡率。在試驗(yàn)期間，豬只出現(xiàn)附紅細(xì)胞體病的典型癥狀并死亡，尸體剖檢有典型特征性病變，血液壓片陽性，血液推片姬姆薩氏和瑞氏染色檢驗(yàn)，有附紅細(xì)胞體存在。根據(jù)每組動(dòng)物中的死亡數(shù)計(jì)算死亡率。(2)治愈率。在試驗(yàn)期間，豬只用藥后體溫、精神、食欲均恢復(fù)正常，不再出現(xiàn)體溫升高、黃疸、貧血等臨床癥狀，根據(jù)這些豬只的數(shù)量計(jì)算出治愈率。(3)有效率。治愈的豬以及給藥后體溫降低或恢復(fù)正常，食欲增加，但出現(xiàn)黃疸、貧血等癥狀的豬，均判定為有效。據(jù)此計(jì)算有效率。(4)增重率。根據(jù)開始時(shí)及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每頭豬的體重，計(jì)算每頭豬的增重量，然后根據(jù)此計(jì)算每組實(shí)驗(yàn)豬的平均增重和標(biāo)準(zhǔn)差。相對增重率是按各用藥組與健康對照組的平均增重之比計(jì)算，其中健康對照組設(shè)定為100%。

    表1 實(shí)驗(yàn)豬分組和處理情況

    組別 1 2 3 4 5 6 7

    藥物 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉?混懸注射液組青霉素鉀 慶大霉素 卡那霉素 土霉素 感染?對照組 健康對照組

    動(dòng)物頭數(shù) 20 20 20 20 20 6 20

    給藥途徑 肌肉注射 靜脈注射 肌肉注射 肌肉注射 靜脈注射

    劑量 0.3 ml/kg體重?24 h 1次 3萬IU/kg體重?12 h 1次 2 mg/kg體重?12 h 1次 15 mg/kg體重?12 h 1次 15 mg/kg體重?12 h 1次

    1.5 數(shù)據(jù)分析和處理 用生物統(tǒng)計(jì)方法處理數(shù)據(jù)，其中死亡率、有效率及治愈率均用卡方

    檢驗(yàn)，增重采用t檢驗(yàn)。?

    2 結(jié)果 ?

    2.1 感染對照組 感染對照豬均出現(xiàn)體溫升高達(dá)40℃～42℃，精神沉郁，食欲不振，貧血，鼻腔分泌物增多，咳嗽，呼吸困難，可視黏膜蒼白、黃疸。 糞便初期干硬并帶有黏液和黏膜，有時(shí)便秘和腹瀉交替發(fā)生。16頭豬中8頭在發(fā)病4～10天死亡，剖檢可見黏膜、皮膚蒼白，血液稀薄，脾臟腫大，淋巴結(jié)腫大，腹水，胸腔、心包積水。?

    2.2 試驗(yàn)性治療 開始給藥后15天內(nèi)，各組豬的死亡率、治愈率、有效率見表2。

    表2 治療結(jié)果

    組別 頭數(shù) 死亡率% 有效率% 治愈率% 15天增重kg 相對增重率%

    1 20 0.00 100.00 100.00 5.60±1.43 86.7

    2 20 25.00 80.00 75.00 5.08±1.35 78.6

    3 20 30.00 75.00 70.00 4.53±1.32 70.1

    4 20 20.00 85.00 80.00 5.18±1.36 80.1

    5 20 10.00 90.00 85.00 5.36±1.40 83.0

    6 16 50.00 25.00 00.00 1.78±1.26 27.6

    7 20 0.00 — — 6.46±1.48 100.00

    2.3 各組死亡率統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 青霉素組、慶大霉素組、卡那霉素組、土霉素組與感染對照組的差異無顯著性意義（P＞0.05）。復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液組和感染對照組比較差異極顯著（P0.01）。?

    2.4 治愈率、有效率統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液組與青霉素組、慶大霉素組、卡那霉素組、土霉素組在治愈率、有效率上差異極顯著（?P＜0.01）。?

    2.5 相對增重率分析 各治療組與感染對照組的相對增重率比較差異極顯著（P＜0.01），但均低于健康對照組。?

    3 小結(jié)

    3.1 各組死亡率、治愈率、有效率統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 說明復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液在控制豬附紅細(xì)胞體病死亡上有很好的效果；復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液在豬附紅細(xì)胞體病治愈率、有效率上高于青霉素、慶大霉素、卡那霉素、土霉素。?

    3.2 復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液為長效復(fù)方磺胺類藥物，SMM及TMP抑制病原體二氫葉酸合成酶和二氫葉酸還原酶的活性，對病原體核酸代謝起著雙重阻斷作用，從而使SMM的抗菌效果增強(qiáng)數(shù)倍至數(shù)十倍，并產(chǎn)生殺菌作用，減少耐藥菌株的產(chǎn)生。乙胺嘧啶具有抑殺血蟲作用。對革蘭氏陰性、陽性細(xì)菌和弓形蟲均有殺滅作用。?

    試驗(yàn)結(jié)果和藥理作用顯示出復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶鈉混懸注射液在治療豬附紅細(xì)胞體病方面將有廣闊的應(yīng)用前景。