（浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 310021）
（浙江省金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程學(xué)院 321017）
摘要 試驗(yàn)選用28日齡斷奶的杜洛克×長(zhǎng)白×大約克三元雜交仔豬90頭，以玉米-大麥-豆粕-魚(yú)粉型日糧飼喂，進(jìn)行為期28天的飼養(yǎng)試驗(yàn)。于試驗(yàn)期末采集試豬血液進(jìn)行生化指標(biāo)測(cè)定和免疫功能測(cè)定。試驗(yàn)組每噸全價(jià)飼料添加快大素150克。結(jié)果表明，試驗(yàn)組豬只平均日增重提高8.78%（P<0.05），料肉比下降6.43%（P<0.05）；血液中甲狀腺素、生長(zhǎng)激素、睪酮、胰島素及胰島素樣生長(zhǎng)因子I的含量分別提高26.24%（P<0.05）、19.72%（P<0.05）、80%（P<0.05）、118.36%（P<0.05）和28.93%（P<0.05）；通過(guò)LPS刺激和PHA刺激分別使試驗(yàn)組豬只的淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)提高20%（P<0.05）和21.88%（P<0.05），提高C3b受體花環(huán)率84.13%（P<0.05）。日糧中添加快大素150克/噸，可有效提高豬只的生長(zhǎng)性能和免疫功能。
關(guān)鍵詞 快大素 生長(zhǎng)性能 免疫功能 早期斷奶仔豬
花粉是種子植物體上的雄性生殖細(xì)胞，它是植物賴以繁衍后代的“精子”，是植物體中精華之所在。蜂花粉（BEE POLLEN）系蜜蜂采自植物花朵雄蕊的花粉，具有植物發(fā)育所需的全部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是天然的全營(yíng)養(yǎng)庫(kù)，在歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家，它作為人的保健產(chǎn)品及用于醫(yī)藥已得到普遍認(rèn)可和廣泛開(kāi)發(fā)應(yīng)用。
快大素是采用先進(jìn)的破壁技術(shù)和萃取工藝從天然花粉中提取的濃縮物的預(yù)混劑。省內(nèi)外數(shù)家養(yǎng)殖場(chǎng)的大量飼養(yǎng)試驗(yàn)證實(shí)，該產(chǎn)品具有顯著的生長(zhǎng)促進(jìn)作用和免疫增進(jìn)作用。本次試驗(yàn)旨在驗(yàn)證快大素對(duì)早期斷奶仔豬生產(chǎn)性能和免疫功能的影響，并通過(guò)對(duì)血液生化指標(biāo)及免疫功能的測(cè)定，深入探討其作用機(jī)理，為實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)
2001.7.—2001.9.在浙江省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所下沙試驗(yàn)豬場(chǎng)進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)和血液采集。
2001.10—2001.11在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院進(jìn)行血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)測(cè)定。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與分組
試驗(yàn)選擇出生日齡、體重相近的28日齡杜長(zhǎng)大三元雜交斷奶仔豬90頭，隨機(jī)分為2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15頭。
1.3 試驗(yàn)日糧
基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1，作為對(duì)照組。試驗(yàn)組在對(duì)照日糧基礎(chǔ)上添加快大素150克/噸。
表1 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)成分
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原料 |
配比（%） |
營(yíng)養(yǎng)指標(biāo) |
含量 |
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玉米 |
51.9 |
消化能（MJ/Kg） |
13.39 |
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大麥 |
15 |
粗蛋白（%） |
19.8 |
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膨化全脂大豆 |
8.5 |
粗脂肪（%） |
4.62 |
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豆粕 |
13 |
粗纖維（%） |
2.02 |
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魚(yú)粉 |
8 |
鈣（%） |
0.98 |
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預(yù)混料 |
3.6 |
有效磷（%） |
0.55 |
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合計(jì) |
100 |
賴氨酸（%） |
1.20 |
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蛋+胱（%） |
0.70 |
1.4 飼養(yǎng)管理
供試豬舍為雙列式結(jié)構(gòu)，半漏縫地板。試驗(yàn)豬按欄飼養(yǎng)，每重復(fù)為一欄，群飼充分喂料，自由飲水。試前對(duì)豬舍清洗消毒，免疫程序按常規(guī)進(jìn)行。試驗(yàn)至仔豬56日齡結(jié)束。試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)仔豬空腹稱個(gè)體重，統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)期間各重復(fù)組飼料消耗量，計(jì)算平均日增重、采食量、料肉比。
試驗(yàn)結(jié)束前，于每重復(fù)中抽取中等體重的2頭仔豬，前腔靜脈采血，全血作血涂片；用肝素抗凝10ml，分成2份，其中1份離心，制備血漿，—20℃冷凍保存，供血液生化指標(biāo)分析，1份4℃冷藏保存，采血結(jié)束馬上送至指定實(shí)驗(yàn)室測(cè)定淋巴細(xì)胞增殖能力和紅細(xì)胞免疫功能測(cè)定。
1.5 測(cè)定指標(biāo)與方法
ANAE染色法 按南京鐵道醫(yī)學(xué)院組織胚胎教研室的方法，以反應(yīng)液中不加底物（α—醋酸萘酯）者為陰性對(duì)照。用1%甲基綠復(fù)染2分鐘。在油鏡下檢查，凡胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕紅色反應(yīng)產(chǎn)物者被判斷為T細(xì)胞。每張涂片計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞。
MTT比色法 按黃志堅(jiān)介紹的方法（1999）。SI（刺激指數(shù)）=OD刺激組/OD對(duì)照組，其中以PHA作為T淋巴細(xì)胞刺激原，以LPS作為B淋巴細(xì)胞刺激原。
紅細(xì)胞免疫功能測(cè)定 參照郭峰等方法對(duì)紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率和免疫復(fù)合物花環(huán)率進(jìn)行測(cè)定。凍干補(bǔ)體致敏酵母多糖和凍干未致敏酵母多糖由上海長(zhǎng)海醫(yī)院免疫室提供，用前均用生理鹽水洗滌3次后配成1×108個(gè)/ml酵母菌懸液。以一個(gè)紅細(xì)胞上結(jié)有兩個(gè)或兩個(gè)以上酵母菌為一朵花環(huán)，計(jì)數(shù)200個(gè)紅細(xì)胞，算出百分率。
血漿生化指標(biāo)測(cè)定 血漿三碘甲腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、睪酮（T）、雌二醇（E2）、生長(zhǎng)激素（GH）、胰島素（INS）、免疫球蛋白（IgG、IgM）、胰島素樣生長(zhǎng)因子I（IGF—I）以放射免疫法測(cè)定，血漿尿素氮含量用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。
1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析均用SAS6.12 FOR WINDOWS進(jìn)行。
2 結(jié)果與分析
2.1 對(duì)生長(zhǎng)性能的影響
不同處理對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 不同處理對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的影響
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對(duì)照組 |
試驗(yàn)組 |
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始重Initial Wt(kg) |
8.58±0.19 |
8.68±0.03 |
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終重Final Wt(kg) |
16.34±1.55a |
17.47±1.73 b |
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日增重ADG（g） |
288.5±40.7a |
313.8±41.5 b |
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采食量ADFI（g） |
494.0±77.5 |
501.7±65.1 |
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料肉比FCR |
1.71±0.09a |
1.60±0.03b |
注：同行肩標(biāo)不同，表示差異顯著（P<0.05），下同。
由表2可見(jiàn)，飼糧中添加天然花粉提取物預(yù)混劑快大素150g/t，可顯著提高試驗(yàn)豬只的日增重及對(duì)飼料養(yǎng)分的利用效率，日增重提高8.78%（P<0.05），料肉比下降6.43%（P<0.05）。采食量差異不顯著（P>0.05），但快大素組有提高趨勢(shì)。
2.2 對(duì)血液生化指標(biāo)的影響
本試驗(yàn)測(cè)定了與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在體內(nèi)代謝利用相關(guān)的一些血液生化指標(biāo)，如三碘甲腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、睪酮（T）等，從代謝層次上來(lái)揭示快大素的作用機(jī)理，結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 血漿生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
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對(duì)照組 |
試驗(yàn)組 |
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T3(ng/ml) |
0.81±0.17 |
0.85±0.39 |
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T4(ng/ml) |
50.83±7.63a |
64.17±11.17b |
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T(nmol/L) |
0.15±0.11a |
0.27±0.14b |
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E2(pmol/L) |
8.44±0.80 |
7.52±1.31 |
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GH(ng/ml) |
0.71±0.33a |
0.85±0.32b |
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INS(uIU/ml) |
11.22±2.38a |
24.50±14.49b |
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IgG(g/L) |
0.40±0.07 |
0.40±0.06 |
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IgM(g/L) |
0.07±0.01 |
0.07±0.01 |
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BUN(mmol/L) |
3.31±0.32 |
3.94±0.38 |
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IGF-I(ng/ml) |
243.88±77.36a |
314.43±77.26b |
由表可見(jiàn)，飼糧中添加快大素，使血液中甲狀腺素（T4
