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畜產(chǎn)品中瘦肉精快速檢測(cè)技術(shù)

來源:    作者:    時(shí)間: 2006-08-21
  瘦肉精,又名克喘素、氨哮素等,是β一腎上腺素激動(dòng)劑(簡(jiǎn)稱β一興奮劑)的一種,有增加心率、心血輸出量、心縮壓,提高骨骼肌、冠狀動(dòng)脈和肝臟等局部血流量的作用,臨床上主要作為支氣管解痙藥物,用于治療哮喘。人們偶然發(fā)現(xiàn)它具有促進(jìn)畜禽脂肪分解、增加肌肉生長(zhǎng)作用,便作為營(yíng)養(yǎng)重分配劑開始應(yīng)用于飼料生產(chǎn)中。但隨之而來的問題是人食用了飼喂克倫特羅的動(dòng)物所生產(chǎn)的畜產(chǎn)品后,殘留的克倫特羅會(huì)引起中毒,出現(xiàn)肌肉震顫、心悸、肌肉疼痛、暈眩、嘔吐、發(fā)抖等癥狀,大面積的中毒事件在世界范圍內(nèi)時(shí)有發(fā)生。因此,許多國(guó)家禁止在飼料中使用克倫特羅,我國(guó)政府已明文規(guī)定在畜牧生產(chǎn)中嚴(yán)禁使用克倫特羅等β一興奮劑。因此,對(duì)農(nóng)畜產(chǎn)品中瘦肉精殘留的檢測(cè)是目前我國(guó)藥物殘留檢測(cè)的一項(xiàng)重要工作。
    一、傳統(tǒng)的檢測(cè)方法——儀器法
     測(cè)定飼料中的克倫特羅的方法有高效液相色譜一一質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC-MS)、氣相色譜一一質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)、高效波相色譜法(HPLC),這些都是比較傳統(tǒng)的辦法,日前仍作為確認(rèn)方法,該方法是利用儀器設(shè)備對(duì)瘦肉精進(jìn)行定量定性檢測(cè)。農(nóng)業(yè)部2001年頒布的強(qiáng)制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)一一飼料中鹽酸克倫特羅測(cè)定(Ny-438)包括GC-MS和 HPLC兩種方法。該方法準(zhǔn)確,精度可達(dá)到0.5UG/KG,需要昂貴的儀器設(shè)備作為基本條件而且操作繁雜、耗時(shí)較長(zhǎng),僅限于少數(shù)的大型檢測(cè)機(jī)構(gòu)使用,也作為仲裁方法。
    二、快速檢測(cè)方法一~試劑盒和試紙法
    目前常用的是酶聯(lián)免疫法(ELISA),其原理是利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的高效催化作用,通過化學(xué)方法將植物辣根過氧化物酶(HRP)與克倫特羅(cL)結(jié)合,形成酶偶聯(lián)克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體(羊抗兔Lgc抗體)與特異性的抗克倫特羅抗體結(jié)合,然后加入待測(cè)克倫特羅和酶偶聯(lián)克倫特羅,它們競(jìng)爭(zhēng)性與克倫特羅抗體結(jié)合,洗滌后加底物,根據(jù)有色物的變化計(jì)量待測(cè)克倫特羅量。若待測(cè)克倫特羅多,則被結(jié)合的酶偶聯(lián)克倫特羅少,有色物量就少。用目測(cè)法或比色法測(cè)定樣品中的克倫特羅含量,比色的最佳波長(zhǎng)為450 nm,參比波長(zhǎng)應(yīng)大于600nm。
    1試劑盒法
    該方法是利用ELISA的基本原理,將抗原與抗體的特異性免疫反應(yīng)在微量孔中進(jìn)行,在特定的實(shí)驗(yàn)程序反應(yīng)后,用眼睛或酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下對(duì)測(cè)定反應(yīng)液的吸光度,再繪制標(biāo)準(zhǔn)樣品的標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而推算樣品的待測(cè)樣品的濃度,達(dá)到測(cè)定瘦肉精的目的。
     該方法在農(nóng)畜產(chǎn)品的檢測(cè)應(yīng)用已有幾年的歷史,和傳統(tǒng)的儀器相比,檢測(cè)時(shí)間大大縮短,一般只需要幾I一分鐘的時(shí)間,只需要簡(jiǎn)單的儀器設(shè)備,目前是生產(chǎn)實(shí)踐中初篩的主要方法,也已被廣大的檢驗(yàn)工作者所接受。目前在市場(chǎng)上應(yīng)用的產(chǎn)品主要來自進(jìn)口,以德國(guó)拜發(fā)公司為代表,靈敏度可達(dá)到001PPB;近兩年國(guó)內(nèi)科技工作者也在努力開展此方面的工作,以大連普瑞康為代表的國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品正被人們認(rèn)識(shí)和接受。
    2試紙條法
    也是利用免疫學(xué)原理,結(jié)合先進(jìn)的膠體金技術(shù),使特異性的抗原抗體反應(yīng)在試紙上進(jìn)行。產(chǎn)品在試紙條的“中央判讀區(qū)”噴有兩條隱形的線,上面一條為對(duì)照線,下面一條為測(cè)試線。操作的時(shí)候?qū)⒃嚰垪l插入經(jīng)處理的樣品液中,反應(yīng)幾分鐘,則可以根據(jù)兩條線顏色的深淺不同而判定檢測(cè)結(jié)果。目前這種技術(shù)還不多見,以大連普瑞康產(chǎn)品為代表,靈敏度可達(dá)到2個(gè)PPB,一投放市場(chǎng),以其方便、快速和容易操作等特點(diǎn)越來越受到人們的關(guān)注。
    三、不同檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較
    傳統(tǒng)的儀器法以其準(zhǔn)確為特點(diǎn)至今仍作為仲裁和確認(rèn)的方法。但是中國(guó)檢測(cè)機(jī)構(gòu)的條件千差萬(wàn)別,農(nóng)業(yè)檢測(cè)機(jī)構(gòu)更是如此,能具備該條件的實(shí)驗(yàn)室少之又少,而且檢測(cè)成本很高。而我國(guó)檢測(cè)瘦肉精的檢測(cè)點(diǎn)大多數(shù)分布在基層,因此限制了該方法的推廣。
     試劑盒法通過幾年的推廣已經(jīng)被人們所接受,也節(jié)約了大量的人力物力,不需要大量的設(shè)備投入,作為初篩法正越來越普遍的使用,但該方法仍需要基礎(chǔ)的試驗(yàn)設(shè)備、熟練的技術(shù)人員操作、場(chǎng)地限制,使許多執(zhí)法部門無法使用,在許多企業(yè)的推廣也受到了限制。盡管時(shí)間很短,但在產(chǎn)品投入市場(chǎng)的環(huán)節(jié)還顯得非常緩慢,和物流速度不相匹配。
    試紙條法方便簡(jiǎn)潔,不需要基本的儀器和熟練的技術(shù)要求,不受場(chǎng)地的限制,靈敏度也可滿足市場(chǎng)的使用要求,是企業(yè)、基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)和市場(chǎng)理想的選擇。但其不能定量,只能做為初篩的方法,限制了它在一些檢測(cè)機(jī)構(gòu)的使用。
    四、檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的展望
    就目前我國(guó)瘦肉精檢測(cè)工作,從上到下都極為重視,但是由于技術(shù)條件的限制,檢測(cè)的力度和廣度都遠(yuǎn)未達(dá)到要求,瘦肉精等違禁藥物污染的產(chǎn)品在市場(chǎng)仍不鮮見。為確保該項(xiàng):工作的順利進(jìn)行,檢測(cè)工作應(yīng)朝以下方面發(fā)展。
    1.前處理更簡(jiǎn)單
    我國(guó)的檢測(cè)條件和發(fā)達(dá)國(guó)家相比差距很大,農(nóng)業(yè)行業(yè)尤其如此,大面積推廣快速檢測(cè)產(chǎn)品在農(nóng)畜產(chǎn)品的生產(chǎn)中更為重要。目前檢測(cè)技術(shù)的要求都需要繁雜的前處理,影響了產(chǎn)品檢測(cè)的速度。今后的工作應(yīng)摸索和探討更為簡(jiǎn)便的樣品前處理方法,完善產(chǎn)品的快速檢測(cè)。
    2.定性定量結(jié)合起來
    有些產(chǎn)品如檢測(cè)試紙檢測(cè)速度很快精度也可達(dá)到生產(chǎn)的需求,但不能準(zhǔn)確的定量。在以后的工作中,加大試紙的定性研究,將定性和定量結(jié)合起來,使檢測(cè)更準(zhǔn)確更快捷。
    3.加快國(guó)產(chǎn)化的步伐
     目前檢測(cè)成本也是制約檢測(cè)產(chǎn)品推廣的主要因素。過去的時(shí)間里,市場(chǎng)使用的主要是來自進(jìn)口的產(chǎn)品,~度價(jià)格昂貴,目前雖然有所降低,但與市場(chǎng)的要求還有很大的距離。引進(jìn)先進(jìn)技術(shù),加大國(guó)產(chǎn)化的力度,在保證基本質(zhì)量的前提下,降低成本是國(guó)內(nèi)檢測(cè)工作者的需求,也是檢測(cè)工作者努力的目標(biāo)。