1 化學合成法
有固相與液相兩種方式,操作雖然不同,但是其原理幾乎是一樣的。化學合成法雖然發展較早,也比較成熟,但仍有許多缺點,包括①消旋化現象;②側鏈官能團需要保護;③整體效率低;④使用大量的有毒溶劑,且成本高昂。因此化學合成法多半用在實驗室,或是高價肽的生產上。
2 DNA重組法 沒有化學合成法的缺點,且一旦整合成系統建立好,將可以大量的重復性生產所要的活性肽。但目前的技術在基因的表達與產品回收上仍有問題,同時該法生產的活性肽種類也有限制,不能生產酰胺肽,也不適合制備短鏈肽。
3 酶法 此法則有許多的優點,包括反應較溫和、使用的試劑毒性較低、反應具有空間立體性,產物沒有消旋化現象、反應位點具有方向性等。然而,酶發也有局限,利用蛋白酶催化活性肽的合成,最明顯的副作用是蛋白酶本身的水解作用,會造成許多不必要的產物生成,此外缺乏適合使用的蛋白酶、產率低等技術問題也限制酶法的廣泛應用。
4 微生物發酵法
此法是通過微生物的生化反應將大豆蛋白轉化為大豆肽。此法生產的肽不是將大豆蛋白質簡單切成小肽,而是通過微生物作用可以對某些苦味基因進行修飾和轉移、重組、在發酵過程中,小肽氨基酸之間又經過代謝、同化,將大豆肽轉化為生物活性肽。