關鍵詞：豬瘟；豬瘟防制；中國

　　 中日分類號：S858．28 文獻標識碼： A 文章編號：0529-5130(2002)11-0001-04

　　 我國是世界上養豬最多的國家，歷來十分重視豬病的防制和研究。在豬病中，豬瘟（Hog

　　 chofera，HC）是危害最大、最受重視的一種病。建國初期，何正禮、方時杰等選用抗原性優良的石門系毒株研究改進制成的豬瘟結晶紫疫苗效果明顯，廣泛應用后對控制當時豬瘟的流行曾起過一定作用。1956年周泰沖、袁慶志等研制成功的中國系（C系）豬瘟兔化弱毒疫苗，證明有高度安全性和優良的免疫原性，且無殘毒，毒力不返強。自1957年起，除在我國廣泛應用外，并已推廣到歐亞很多國家，使這些國家控制或消滅了豬瘟。該疫苗被公認為目前世界上比較理想的豬瘟疫苗、這是我國獸醫科學工作者的一大杰出貢獻。我國在豬瘟免疫程序、免疫診斷、免疫監測以及豬瘟病毒的遺傳變異等方面的研究都取得了顯著成果。

　　 豬瘟具有高度接觸傳染性，流行廣泛，發病率、死亡率高，危害極大。國際獸疫局（OIE）將之列為A類16種法定傳染病之一，我國亦將之列為一類動物傳染病。由于豬瘟造成的經濟損失嚴重，促使很多國家制定和執行豬瘟的防制和根除計劃，并在歐美20多個國家取得成功。但目前世界上仍有敘多個國家和地區有豬瘟流行。近年來在一些原已宣布消滅豬瘟的歐洲國家（荷蘭、比利時、英國、德國、意大利、西班牙等）又相繼復發，我國一些地區的豬瘟發病率亦有上升的趨勢。目前在各國的HC流行中，除典型的病例外，HC流行和發病的特點已發生了很大變化，這種變化是世界性的。如上世紀。年代，英國在撲滅HC的過程中就證明大部分HC病例屬于溫和型和隱性感染；我國在70年代后期也發現HC的流行形式發生了很大變化。由于多年實施以免疫預防為主的HC防制策略起到了決定性作用，有效地控制了HC在我國的急性發生和大流行。使流行形式轉變為地區性散發流行，疫點顯著減少，多局限于所謂“豬瘟不穩定地區”。病程由急性變為慢性過程，臨床癥狀由典型變為非典型的溫和型HC。癥狀顯著減輕，發病率不高，疫勢較緩和，死亡率減低。仔豬死亡率較高；成年豬較輕或可耐過，病理變化也不特征。由于病原毒力降低，出現持續感染（亞臨床隱性感染）、胎盤垂直感染（仔豬先天感染），妊娠母豬帶毒綜合征（母豬繁殖障礙）及新生仔豬的免疫耐受等。這些帶毒病豬的存在，成為豬瘟發生的禍根，尤其是亞臨床感染豬。依靠常規方法很難確診并剔除此類病豬，從而給HC的防制工作帶來新的困難。在出現這些現象的地區和豬場，往往還伴隨有多種原因引起的免疫失敗，嚴重威脅養豬業的健康發展。

　　 1 導致目前HC發生的原因

　　 1．1生豬和肉品市場流通頻繁，檢疫不嚴，防疫密度不錯

　　 生豬和肉品市場流通頻繁，檢疫不嚴，防疫密度不夠是HC傳播流行的重要因素。

　　 近年來集體、個體養豬發展迅速，使豬的自由貿易增多，大量生豬頻繁調動常可使HC隱性感染豬在全國范圍內流傳。豬群中新引進的外表健康帶毒仔豬常是5；起HC流行的一個主要原因。小刀手為私利驅動，宰殺和販賣病豬肉；養豬場病死豬處理不當；執法檢疫不嚴，使病豬肉產品在市場流通，也是造成HC廣泛傳播的重要原因。我國雖早已公布實施《動物防疫法》（1998），但其配套的實施細則尚未出臺，使很多防疫。檢疫措施難以到位。加以執法主體多頭，各自為政、互相扯皮、分割執法，即不符合國際慣例，又不利于疫病的控制和消滅。此夕，一些基層獸醫組織渙散，技術觀念落后，重治輕防，防疫密度不夠，也易促使HC傳播流行。

　　 1．2病原的遺傳變異

　　 弱毒疫苗的普遍使用改變了豬瘟病毒（HCV）原有的生態環境和病毒群落。從70年代末開始，全世界HC流行的特點均發生了重大變化，以溫和型HC為主。而近年來我國又出現了HC疫情的反彈現象，許多豬場的免疫豬群頻繁發病。因此，了解HCV的遺傳變異情況，了解HCV疫苗毒與現流行毒之間的差異，對于防制HC是十分重要的。

　　 1986年 Lowungs對世界上

　　 20多個國家的115株HCV進行了序列比較、中和單抗反應性及內切酶分析后，將115株毒劃分成2個群（或血清亞型）。血清型1有2個亞群，主要包括Brescia株（荷蘭）、疫苗毒株和

　　 60年代流行毒；血清型 Ⅱ有

　　 3個亞群，主要包括Alfrt株（德國）和近10年來的流行毒。在此基礎上，1999年Sakoda通過對4O余株HCV流行毒的序列分拆，將HCV分為3群：HCVI稱為古典HCV，以Bonn株為代表ZHCVZ以Ahart株為代表ZHCV3與上述2個群均有較大差異，包括日本、泰國和中國臺灣等地70～90年代的流行毒株［1］

　　 我國開展HCV分子流行病學的研究工作雖然較遲，但在蘭州獸醫研究所和解放軍軍需大學等研究單位的不懈努力下，已使我國HCV遺傳發生關系全貌的系譜圖日漸清晰。軍需大學獸醫研究所采用RT-PCR方法，從我國10個省、市、自治區收集四個HCV流行毒株中，擴增了

　　 HCV EZ基因中主要抗原位點編碼區。對各擴增片段進行了序列測定，通過計算機分析

　　 構建了系統發生樹，并確定了它們之間的遺傳相關性。結果表明，對個流行毒株中的 18株屬基因 Ⅱ群，占78．26％；另外

　　 5個流行株與傳統的石門系強毒，兔化弱毒株屬基因1群，占21．74％。兩群間測序區的核酸同源性只有78．9％。此外，根據序列差異程度將基因Ⅱ群流行株分為3個亞群，各基因群HCV在地域分布上末發現明顯的特征性。該研究初步揭示了我國較大范圍內流行的HCV毒株與傳統的石門強毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在較大的差異，以及我國HCV流行株在地域分布的多樣性［2,3］。蘭州獸醫研究所的研究結果同樣表明，我國和世界其他國家一樣，近年來HCV流行毒已呈遠向疫苗毒的方向演變。近期HCV流行毒與古典HCV之間已有較大差異（核酸和氨基酸同源性分別為82．2％～84．3％和87．9％～90.％）［4］

　　 但根據中國獸藥監察所進行的豬瘟兔化弱毒疫苗對不同HCV野毒株的免疫保護相關性研究結果表明：雖然在我國不同地區所分離的HCV野毒株在其病原生物學上有所差異，但用我國目前使用的豬瘟免化弱毒疫苗免疫的豬完全能夠抵抗這些野毒的攻擊。結果再一次證明：我國現用的豬瘟兔化弱毒疫苗對預防目前流行的

　　 HCV是完全有效的［1］。

　　 1．3疫苗的質量問題

　　 我國研制的中國系（C系）豬瘟兔化弱毒是國際公認的最佳疫苗用株，很多歐亞國家采用了C系弱毒苗有效地控制了HC流行。但我國近年來常有免疫失敗的報道，其原因雖然很多，疫苗的質和量有著重要的影響。疫苗免疫效果通常以防止臨床感染為標準。應用這一標準時，常有部分豬免疫后，抗體水平不能達到防止亞臨床感染水平，這部分豬感染強毒后常可引起亞臨床感染。此種亞臨床感染豬雖無明顯癥狀，但在其存活期終生帶毒、散毒，為HCV主要儲存宿主，剖檢可見胸腺萎縮，淋巴結腫大。這些豬的存在，便可形成HC常發地區。因此，專家指出，疫苗應以能保護防止亞臨床感染為標準。

　　 用不同劑量的C株苗免疫豬，證實免疫劑量與保護水平密切相關。劑量不足時，攻毒后不能阻止強毒在體內復制和帶毒。免疫劑量提高到80～100P50（約

　　 320～400

　　 RID，RID為兔體反應量），攻毒后能制止亞臨床感染，所有耐過豬均不帶毒。目前歐洲為消滅HC亞臨床感染，多采用加大免疫劑量的方法。歐洲藥典規定用C株疫苗免疫時，肌肉注射劑量為100PD50（400RID）。我國豬瘟細胞苗出廠檢驗以5萬倍稀釋能致兔體熱反應為合格，即每毫升原液含5萬RID。規定的免疫劑量為15萬RID，折算為37PDN。這一劑量遠低于國際標準，顯然在HC不穩定地區應用這一劑量，不足以切斷HC亞臨床感染引起的惡性循環［5］

　　 HCV和牛病毒性腹瀉病毒（BWDV）2種瘟病毒之間有較密切的抗原性和血清學關系。兩者同源性很高，能互相誘導一定程度的同源病毒抗體。在西歐國家，豬BVDV的感染率很高（20％～40％）。BVDV感染妊娠母豬可引起繁殖障礙，病毒可經胎盤傳染胎兒，使所產仔豬構成亞臨床感染。據國內生產廠家反映，用家兔測定牛睪丸原代細胞生產的豬瘟兔化弱毒疫苗效價時，各批次間相差懸殊。究其原因有多種，但其中最值得注意的是瘟病毒（BVDV）污染。因為瘟病毒在體外培養大多不產生CPE，故不易引起檢驗人員注意。污染主要來源是小牛血清，從瘟病毒先天感染的小牛分離的血清含有感染性病毒，常規的熱滅活又不能確保瘟病毒滅活。用BVDV污染的HC疫苗免疫母豬后，仔豬發生類似先天性HC感染，死亡率增加，

　　 因此給生產造成很大損失。

　　 疫苗的運輸、保存、使用不當，亦易影響免疫效果。豬瘟凍干苗應在低溫條件下運輸和保存，稀釋后應立即使用，不能存放過久。有人曾在夏季一個市場防疫注苗點進行試驗，早晨剛稀釋的疫苗經檢驗完全符合出廠標準，即每頭份含

　　 150RID，但到傍晚，自注苗點抽檢最后剩下1瓶稀釋的疫苗檢測，每1頭份只有15個兔體反應量，在Id中效價已損失90％。因此，稀釋后的疫苗如不能立即用完，應放在冰瓶內低溫保存。此外，疫苗注射操作過程中的失誤，如使用失真空的疫苗或過有效期的疫苗；消毒不嚴，造成潛伏期病毒的傳播等都會影響疫苗的免疫效果。

　　 1．4免疫程序問題

　　 我國各地對HC的防制工作一般都很重視，但有些地區仍時有HC暴發流行，免疫失敗的現象也常有發生。其原因除免疫劑量不夠，免疫覆蓋率偏低以外，免疫程序不盡合理也是一個重要因素。為了尋求更加科學、合理、有效的豬瘟免疫程序，各地進行了大量試驗研究。

　　 免疫程序的關鍵是排除母源抗體干擾，確定合適的首免日齡。門常平等（1982）報道母豬在配種前免疫接種的，所產仔豬血中母源抗體的中和效價，3～5日齡時約為1:64～128母源抗體的半衰期約

　　 10

　　 d，仔豬2O日齡前可得到母源抗體的保護。25日齡后保護力下降，至40日齡已完全喪失對強毒的抵抗力，45日齡前后母源抗體效價已降至l：4～8.豬瘟疫苗的仔豬首免日期，最好選定在仔豬持有的母源抗體不會影響疫苗的免疫效果而又能防御病毒感染的期間，即母源抗體為1：8～64時。因此提出25日齡和65日齡2次免疫的建議，此種免疫程序目前已為多數豬場采用［1］。如在母源抗體效價尚高時接種疫苗，即會被母源抗體中和掉部分弱毒，阻礙疫苗弱毒的復制，仔豬就不能產生堅強的主動免疫力。

　　 1.5其他免疫抑制疾病的影響

　　 一些其他常見疾病如豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）在豬群中的存在，會使豬體免疫力下降，從而影響HC的免疫保護力。PRRS所引起的最顯著病理變化是嚴重損傷肺泡巨噬細胞，造成其大量破壞，并伴有循環淋巴細胞及粘膜纖毛清除系統的破壞，從而抑制免疫力，使豬對各種繼發感染易感。PRRS感染產生的免疫抑制，也可以惡化慢性傳染性疾病，并使豬對其他疾病如豬瘟等各種疫苗的免疫應答下降，造成免疫失敗。

　　 2有效控制和消滅HC的對策

　　 2．1加強HC診斷和免疫監測

　　 典型HC可主要根據臨床癥狀和病理變化作出診斷，實驗室診斷為輔助手段。非典型HC由于癥狀不明顯和缺乏特異性特征，通常需取決于實驗室診斷。

　　 實驗室診斷目前常用的方法有：①冰凍組織切片（或觸片）的直接熒光抗體（FA）試驗。許多國家和地區已將該法作為執行消滅HC規劃的法定診斷方法，此法簡便、快速。可靠。作為FA試驗的樣品應采自病死豬的扁桃體、脾、腎或回腸末端。②將病豬扁桃體和脾制成20

　　 g／L的混合勻漿后接種PK-15細胞， 24～72 h以后用

　　 FA試驗或酶標抗體檢查證實培養物中的病毒（HCV無CPE）。此種病毒分離方法比FA更為敏感。③經典的HC診斷方法是接種易感豬和免疫豬，或用兔體交叉免疫試驗（可區別免毒和強毒）。④間接法酶聯免疫吸附試驗，可作為HCV感染豬血清抗體的檢測與分析。⑤為區分HCV和BVDV需借助單克隆抗體技術和核酸探針技術。

　　 為了弄清群體的免疫水平和疫苗免疫效果，必須加強HC免疫監測。杜念興等（1998）［5］建立的PPA-EISA，曾對抗體不同水平的豬進行攻毒保護試驗。結果ODde值在0．3以上100％保護；≥0．17至≤0．3之間者，保護率在75％左右。據此制定了群體總保護率的估算公式：

　　 免疫良好的免疫群體保護率多在90%以上，總保護率小于50％者為免疫無效或HC不穩定地區，需加強免疫或采取措施消除不穩定因素。

　　 總之，做好免疫監測是減少我國HC發生的重要手段。應用免疫檢測可隨時掌握豬群的免疫狀態，制定適合于該豬場合理的免疫程序，并隨時淘汰免疫耐受豬（疫苗接種后不產生或僅產生低水平抗體的豬），保持豬群的整體免疫。此外，結合HCV抗原檢測，堅決淘汰隱性感染或潛伏感染的種公豬和母豬，消除引起仔豬先天感染和免疫耐受的傳染源。

　　 2．2制定合理的免疫程序和適當加大免疫劑量

　　 目前國內還沒有統一的HC免疫程序。劉勁松等（1991）在相同條件下對5種常用的HC免疫程序進行了比較研究。結果表明：在HC控制區采用1月齡一次免疫或2月齡一次免疫；

　　 在HC本控制區采用超前免疫或1月齡一次免疫。母豬的免疫應避開配種和妊娠期，以免5！起胎盤感染或超前免疫時仔豬發生過敏性休克（可能由于母源抗體過高）。林毅等（2000）［6］提出，由于現在一些規模化養豬場實行28日齡早期斷奶，對日齡轉人育肥會的生產工藝流程。為便于生產實際操作和盡量減少應激次數，試驗制定了28日齡首免；70日齡二免2頭份豬瘟疫苗的免疫程序。在母源抗體較高或未流行過HC的豬場，選用此程序免疫較好。吳楚斯（2000你在廣東廣三保養豬公司的試驗結果表明，在無豬瘟流行的地區，仔豬在歷日齡時進行一次性大劑量（5頭份）免疫，抗體有效效價高于2次免疫豬（35日齡首免3頭份；65日齡二免5頭份），與2次免疫相比，既節省免疫費用，又可獲得較好的免疫保護力。蔡葵蒸等（2002）試驗指出，在豬瘟威脅區，免疫母豬所產仔豬以28日齡首免4頭份疫苗，55日齡二免2頭份疫苗的免疫程序效果較為可靠?；蛟?5、40、日齡分別以4、2．2頭份疫苗免疫，可有效控制豬瘟的流行。為了排除母源抗體的干擾，使仔豬獲得較強免疫力，對初生仔豬進行超前免疫（又稱乳前免疫或時免疫）已達成共識，并在生產中廣泛應用，且日漸成熟。一般認為在超前回次免疫后應在70齡前后進行第2次免疫，才能保證絕大多數豬具有能抵抗HCV感染的抗體水平。

　　 多數學者認為適當提高免疫劑量有利于提高抗體水平，同時加大劑量亦可中和一定的母源抗體?？晒﹨⒖嫉拿庖邉┝繛榉N豬4～5頭份；仔豬2～3頭份；仔豬母源抗體在1：32以上時（25日齡左右），以4頭份疫苗劑量的免疫效果最佳。

　　 2．3豬瘟疫苗的改進

　　 豬瘟弱毒疫苗的廣泛應用，對于控制HC的流行起到了關鍵作用。但是，由于用這類疫苗免疫后并沒有徹底阻斷HCV的傳遞途徑，HCV野毒仍然存在并以低水平傳播，致弱疫苗毒也存在因突變或與野毒發生重組而造成毒力返強的機率。另一方面，弱毒疫苗的普遍使用，促使了HCV的變異這一事實已為近期流行毒與疫苗毒在分子水平上存在較大差異所證明。因此，研制可克服傳統疫苗不足之處的新型疫苗是十分必要的［9］

　　 2．3．1基因工程亞單位疫苗

　　 利用真核細胞高效表達系統來表達HCV免疫蛋白，并以此表達產物為抗原可制造疫苗。桿狀病毒（boulovilus）一昆蟲細胞系統可高水平表達外源蛋白基因，而且大部分蛋白質的加工過程與哺乳動物細胞相同。Hdri等（1993）將HCV基因CDNA重組人核型多角體病毒（ACNPV），并在SF21細胞中表達。用

　　 2O～ 100 ng的表達蛋白免疫豬，可抵抗 100LD50的

　　 HCV強毒攻擊，其誘導產生的中和抗體水平遠高于由弱毒疫苗免疫產生的水平。目前，該蛋白的表達水平已被提高至

　　 60%，該疫苗于1998年被列入歐洲藥典。由于該疫苗生產技術具有安全、穩定、可規模化等優點，同時又可根據流行毒的變化，更換合適的馬基因，因此具有廣闊的應用前景。

　　 2．3．2病毒活載體疫苗

　　 以天致病力或低毒力的痘菌病毒或偽狂犬病病毒為載體，將HCV

　　 K基因與之重組研制出的基因重組疫苗，免疫動物后可對2種病毒產生良好的保護力。但對此類疫苗的安全性和實用價值目前還有爭議。因為人類至今還不了解病毒的自然發生及變異機制，一旦將該病毒放入自然界中，有可能衍變出對人和動物有危害的病毒變種。

　　 2．3．3核酸疫苗

　　 即DNA疫苗。將外源基因克隆至真核質粒表達載體上，然后將重組的質粒DNA直接注射到動物體內，使外源基因在活體內表達。產生的抗原激活機體的免疫系統，引發免疫反應。近年來有關質粒DNA疫苗在人類及動物產生預防和治療作用的研究報道不斷增加，應用范圍也逐漸擴大。在豬瘟DNA疫苗方面，解放軍軍需大學作了初步研究，成功地保護了豬瘟強毒對豬的攻擊。但要使DNA疫苗的研制獲得成功并得到推廣應用，還有很長的路要走。

　　 2．4認真制定執行控制和消滅HC規劃

　　 我國曾多次制定控制和消滅HC規劃，但由于種種原因未取得預期成效。美國在上世紀扣年代，HC流行也很嚴重。1961年美國農業部開始組織全國范圍內消滅HC，同年參眾兩院通過立法消滅HC，并由總統批準了國家消滅HC計劃。經過16年的努力，1978年宣布在全國范圍徹底消滅了HC。16年間州和聯邦共撥款1．4億美元用于執行消滅HC計劃，而16年間豬場由于控制了疫病獲利達15億美元。且由于消滅了HC，美國豬產品可重返國際市場，所獲利潤遠大于滅病開支。雖然兩國國情、疫情不同，但美國的滅病經驗仍有可借鑒之處。