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“生死時速”挑戰禽流感———北京檢驗檢疫局高致病性禽流感快速檢測技術研究紀實

  作者: 來源: 日期:2005-05-27  
     2005年2月3日,一個消息慰藉了北京檢驗檢疫局干部職工長久的等待與期盼:該局研制的禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR試劑盒過五關斬六將,經過初審、臨床實驗、符合實驗和復審等,最終獲得了農業部國內同類技術的第一個一類新獸藥證書。

    不僅如此,該項科研課題還被科技部“食品安全”專家組譽為“十五”科技攻關“食品安全關鍵技術”中的“標志性成果”。

    時值春節前夕,人們正沉浸在節日臨近的喜慶中,消息傳來,北京檢驗檢疫人更加振奮。一向以穩健著稱的該局局長魏傳忠,臉上也露出了笑容。

    “要奪取同疫病斗爭的勝利,最關鍵的是充分發揮科學技術的重要作用”。胡錦濤總書記曾在多個場合的強調大家記憶猶新,國家質檢總局局長李長江“科技興檢”的話語言猶在耳。自到北京檢驗檢疫局工作以來,魏傳忠一次又一次與他帶領的科研人員,分享著科研攻關成功后的喜悅。

    2001年,面對我國禽肉出口屢遭國外封殺的危情,北京檢驗檢疫局與深圳匹基生物有限工程公司聯手攻關。從此,他們與高致病性禽流感病毒展開了爭分奪秒、驚心動魄的“生死時速”之戰。

    如今,在我國的人類與病毒搏斗史冊上,禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR試劑盒寫下了第一筆,為我國禽肉出口插上了技術保障的翅膀,這怎不令人欣慰萬分?!

    禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR快速檢測技術像璀璨的明珠,閃耀著迷人的光彩。

    封殺聲中磨槍上陣

    日歷翻回至2001年6月,在歷史的記載中,封殺再次針對我國禽肉出口。

    受高致病性禽流感影響,近年來,我國禽肉出口一直在風雨飄搖中度日,道路異常艱難。早在1997年,因香港在進口雞肉中檢出高致病性禽流感病毒,世界上17個國家隨之宣布停止進口中國雞肉。

    初夏正是陽光燦爛、鮮花盛開的季節??墒巧虾4笥馇萋摵瞎靖刹柯毠兊男膮s猶如經霜的葉片,萎靡而沒有生氣。6月4日,韓國農林部以從該公司出口到韓國的鴨肉中檢測出H5N1型禽流感病毒為由,全面禁止進口中國產家禽肉及其制品?! ?

    偏偏禍不單行。6月8日,日本因擔心該年5月中國香港、澳門地區發生的高致病性禽流感波及中國內地,宣布停止進口中國雞肉和鴨肉。

    似晴天霹靂,這一連串的“雷”在擊倒企業的同時,也震動了北京檢驗檢疫局。

    我國禽肉每年出口40多萬噸,創匯近9億美元。面對這兩個龐大的數字,禽肉出口受阻不僅令國家質檢總局領導的心揪緊了,也讓北京局陷入尋求解決方法的思索中。

    就在這種情況下,2001年魏傳忠局長主持召開了一次關于高致病性禽流感檢測技術的決策會。全局科研方面的有識之士和精兵強將都被請來,稱得上是一次群英會了。

    “我國目前防治高致病性禽流感面臨的主要問題之一是疫病的快速診斷,如果快速診斷不解決,勢必延誤疫情報告時間,造成疫情擴散。如果有了快速、準確的檢測技術,將為疫情的迅速撲滅起到積極作用?!痹摼旨夹g中心研究員賴平安的一番話,很顯然在大家心中引起了共鳴,許多人紛紛點頭表示贊許。

    時任動物檢疫實驗室主任的張鶴曉也開口了:“由于高致病性禽流感問題,我國禽肉出口一直處于高風險狀態,加上禽肉進口大戶日本對我國采取嚴格檢疫措施,使很多企業的出口處于停滯狀態。而目前我們使用的雞胚病毒分離方法周期太長,需要21天左右,等到診斷出了結果,可能早被進口國查出病毒封關了。如果快速檢測技術不解決,禽肉出口不僅不會擴大,反而會大大減少。”

    …… 

    圍繞防止和解決禽肉出口受阻問題,大家各抒己見,獻計獻策。

    在這期間,魏傳忠局長一言未發,他時而雙眉緊蹙,陷入思索;時而嘴角緊閉,神態嚴肅;時而微微一笑,眼神明亮。大家的發言早已在他心里撞起了激動的火花,這位敢想敢干、工作務實的“班長”思維敏捷地思考著,并作出了一個大膽的決斷:“盡快開展高致病性禽流感病毒熒光快速檢測方法的研究,走前人沒走過的路,我們應該有這樣的勇氣?!?

    話音剛落,立刻引來全場掌聲。正如魏傳忠局長所言:“檢驗檢疫的需要就是我們科研的方向。”北京檢驗檢疫局再次擔起了為促進外貿出口提供有效技術支撐的重任。

    時間就是一切

    “要做就做最好的,做國際領先的?!鼻萑獬隹谑茏韬头怅P的痛楚,讓北京檢驗檢疫局黨組迅速確立了研究目標:既然雞胚分離法不能滿足高致病性禽流感檢測工作中一線的“急需”,也無法適應我國進出口活禽及產品的快速檢驗、快速通關放行、以及國內消費者對禽肉安全性的需求,那就要建立一種能解決所有這些問題的方法。

    這時,深圳匹基生物有限工程公司的熒光RT-PCR技術走進了北京檢驗檢疫局的視野。作為20世紀90年代末才發展起來的新技術,其具有高靈敏度和高特異性的優點,靈敏度高出普通RT-PCR百倍左右,還可做到實時定量,并已成功用于人傳染性乙型肝炎病毒、衣原體、艾滋病病毒等的檢測。

    就是它了!

    很快,兩家單位強強聯合,建立了由20多人組成的“禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR快速檢測方法”課題組。魏傳忠局長親自出任課題組組長,技術中心副主任張鶴曉具體負責牽頭研究。

    國家質檢總局和出口企業均將寄予厚望的目光投向了北京檢驗檢疫局。

    “我們的攻關能早一點成功,就能對禽肉出口多作一點貢獻。”對課題組來說,時間就是一切。所有的成員立即行動起來,齊心協力投身這場攻堅戰。

    然而,攻關的道路并非一帆風順,不是時時處處都能按設想的軌道向前延伸。

    除了科研攻關,課題組的很多人還要不折不扣地完成他們的日常檢疫工作。言外之意,是在同一時間,做著兩件事兒,壓力和忙碌可想而知。

    “有時候恨不能生出四只手、兩個腦袋來?!边@樣的感受在大家說笑般的話語中道出,不由令人生出一股心酸的感動。為了盡早研究出快速、靈敏的禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR檢測方法,休息日早已在課題組的日歷中被刪除,而工作日的加班加點則是家常便飯。

    “盡管常常都是夜深人靜時才疲憊地回到家里,天還不亮就往實驗室趕,但我覺得有一股無形的力量在支撐著自己這樣做?!弊鳛檎n題主持人,張鶴曉既是一位指揮官又是一位盡心盡職的后勤部長:指導實驗、寫報告、向局領導匯報進展情況,千頭萬緒的工作使他每天要列出一份長長的清單……至今,燈火通明、連夜奮戰的一幕幕場景,仍在他眼前閃爍。

    終于,在歷時6個月刻苦攻關后的一天,從實驗室傳來一聲聲“成功了!成功了!”的歡呼聲:課題組根據國內外報道的高致病性禽流感病毒血凝素基因保守區序列, 合成熒光RT-PCR的引物和探針,經引物、探針濃度及最佳配比比例篩選,離子濃度、循環參數優化等過程建立了檢測高致病性禽流感病毒的熒光RT-PCR方法。

    由于該方法是利用分子生物學手段檢測高致病性禽流感病毒核酸,因此,無須做雞胚病毒分離培養。這也就將檢測時間從原來最短需要21天的時間(國際獸疫局確定的雞胚病毒分離法)縮短為4個小時。

    大家互相擁抱,熱淚盈眶,無以言表對這份來之不易的成功的喜悅。魏傳忠局長和北京局黨組也因為這個消息興奮得一夜不能成眠———禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR快速檢測技術終于成功建立了。

    高致病性禽流感檢測時間最短也需要21天的歷史結束了,取而代之為4個小時;從此,我們就能滿足對高致病性禽流感疑似病例快速確診的需要,我國的禽肉出口再也不會高風險運行了。

    180多個日日夜夜里,從查閱高致病性禽流感病毒的最新數據和資料,到對高致病性禽流感病毒的各個基因序列進行多重比對;從通用型高致病性禽流感病毒熒光RT-PCR快速檢測技術優化,到高致病性禽流感病毒H9亞型熒光RT-PCR快速檢測技術優化;從優化后的高致病性禽流感單管熒光RT-PCR檢測方法應用研究,到臨床驗證實驗;從課題查新,到技術交流與人員培訓……課題組人員傾注了多少心血,耗用了多少腦汁,真是難以盡述?! ?

    2002年1月8日,該檢測方法通過了專家鑒定。來自科技部、國家質檢總局和農業部的專家,對該檢測方法交口稱贊,一致認為,該項研究成果不僅在國內屬于首例,在國際上也屬于先進水平。

    翻開新的一頁

    常言道,家有梧桐樹,自招鳳凰來。當北京檢驗檢疫局選擇夙興夜寐、刻苦攻關時,歷史也將機遇給了它。

    課題組的忘我拼搏、知難而上,終于使禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR快速檢測試劑盒以國內首創的雄姿走向歷史舞臺,為我國高致病性禽流感的防治和促進外貿出口畫上了光彩的一筆。

    然而,禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR快速檢測技術的問世,并沒有使北京局和深圳匹基生物工程有限公司的攻關停止不前,他們將目光瞄準技術優化與應用研究。

    2001年底,針對出口禽肉中高致病性禽流感病毒快速檢驗檢疫問題,課題組向來中國檢查的日本專家和韓國獸醫專家介紹了該項快速檢測技術,兩國專家對此非常感興趣:“我們將考慮應用此項快速檢測技術。”

    2002年5月,在科技部、國家質檢總局領導和有關部門的支持下,“高致病性禽流感病毒(AIV)熒光RT-PCR快速檢測技術研究”被正式立項,并于同年10月列入“十五”國家重大科技專項“食品安全關鍵技術”課題。這標志著該項研究又翻開了新的一頁。

    “科技部農社司領導和有關項目官員密切關注項目的進展,幫助我們解決各種困難,協調我們與有關部門的溝通和配合;國家質檢總局科技管理部門更是給予我們極大的幫助?!北本┚挚萍继幪庨L周琦負責課題組與科技部農社司和國家質檢總局科技司的協調工作,對各部門的關心自然感受深刻,每每說起這些,感激之情自然流露出來。

    很快,歷史給了禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR快速檢測技術一個充分展示自己的機會。

    2004年初,我國暴發高致病性禽流感疫情,各地獸醫防疫部門呼喚快速、準確的高致病性禽流感病毒診斷技術。當時,正值該技術的推廣應用期,盡管臨危受命,卻是不辱使命。

    從廣西到湖南,從江蘇到安徽……禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR快速檢測技術被科技部列為向全國首批推薦的22項高致病性禽流感防治技術之一,得到了中央領導和有關部門的高度重視,科技部、國家質檢總局、國家認監委和北京市委市政府的領導親臨視察指導,對其在高致病性禽流感防治工作中的作用給與了充分肯定。

    同時,為防止攜帶高致病性禽流感病毒的禽肉進入北京市場,課題組對北京動物防疫部門送檢的禽肉進行檢測,在北京防控高致病性禽流感疫情方面發揮了重要作用。由于該技術,北京局高致病性禽流感實驗室被北京市列為高致病性禽流感確認實驗室。

    為了使北京檢驗檢疫局開發的禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR試劑盒盡快實現科技成果產業化,2004年3月,課題組的同志們在張鶴曉和周琦的帶領下,帶著兩臺實驗儀器和實驗試劑盒,到哈爾濱獸醫研究所進行臨床實驗。責任的力量,使大家在這場攻堅戰中全力以赴,由于怕影響哈爾濱獸醫研究所的正常工作,他們將實驗場地選在不易受污染的樓梯的角落里。3月的哈爾濱,春寒料峭,風挾著寒冷直往樓里闖。高志強博士等不顧凍得生疼的手和臉,分成二班連軸轉,僅用了5天時間,就完成了1440多個實驗檢測。  

    現在,課題組建立的高致病性禽流感病毒快速檢測技術———高致病性禽流感病毒熒光RT-PCR檢測技術,被科技部食品安全總體專家組確定為“標志性成果”。全國政協委員、科技部食品安全總體專家組組長、中國疾病預防控制中心陳君石在今年“兩會”期間曾談道:高致病性禽流感檢測經過重大專項科學家的研究,已經出來了一種新方法,4個小時出結果;這個方法已經過專家論證,正在推廣應用。

    不是結束的結尾

    禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR試劑盒的問世,是人類與病毒之戰的又一場真正的勝利。它的成功表明,由科技管理、質檢部門、科研機構和技術企業組成的聯合體,將科研成果直接轉化為現實生產力,在科技成果產業化上取得突破,對國家科研經費的投向具有指導意義。

    3年多以前,是禽肉出口的封關危機喚起了北京局挑戰高致病性禽流感病毒的斗志。倘若說在那時,禽流感熒光RT-PCR快速檢測還只是魏傳忠局長和局黨組的想法和希望,可是現在它像個明星,在寬廣的科技舞臺博得了一陣又一陣喝彩。賞識它的人越來越多,發揮的作用也越來越大。

    早在開發前期,經過10個直屬檢驗檢疫局近3000份樣品試點,到目前已在山東鳳祥集團、內蒙古草原興發股份有限公司、河南華英農業股份有限公司、北京華都肉雞公司等20多家企業應用。2003年以來,該試劑盒已經在全國16個出入境檢驗檢疫局、24個出口大型養殖企業及7個省、地級獸醫站得到應用,累計已超過檢測20萬份,支持出口創匯3億美元以上。

    “在應用本試劑盒對出口禽類產品進行檢測一年多以來,我國出口的禽產品從未被進口國檢出高致病性禽流感病毒,為養殖企業和廣大養殖戶創造了良好的經濟效益。山東諸城外貿集團公司等企業應用本方法檢驗,2003年下半年出口禽肉均超過9000噸?!泵慨斘簜髦揖珠L說起這些,欣慰之情溢于言表,國門衛士的自豪油然而生。

    作為北京檢驗檢疫局局長和課題帶頭人,他有理由欣慰和自豪。

    以技術執法,以科技強檢,以科技服務外貿企業,是北京檢驗檢疫局在開展科技工作中堅持的一貫作風,正是這樣的作風,使北京局從2001年至今短短幾年時間,就主持、參與了“863”、“973”、“十五科技攻關”等國家級科研課題20項,主持省部級科研項目33項,并創造了多個全國第一,樹立了科研力量與企業合作的成功典范。

    對北京檢驗檢疫局來說,禽流感病毒H5亞型熒光RT-PCR試劑盒的問世,不是高致病性禽流感病毒熒光RT-PCR快速檢測技術優化與應用研究的結束,而是又一個新的開始。

    在北京局與深圳匹基公司聯手對高致病性禽流感病毒的攻堅戰中,我們看到的是一個人們不斷磨礪自己意志的過程,是一份科研工作者勇攀科學高峰的壯志與勇氣,是一種國門衛士嚴把國門的莊嚴使命?! ?

    這些,對北京檢驗檢疫局來說,都是繼承和延續。

 
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