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冷凍胚胎克隆牛生命從零下196攝氏度開始

  作者: 來源: 日期:2010-02-21  
     它們的生命從零下196攝氏度開始——

    暖暖的陽光爬進鐵制的柵欄,落在它們黑白相間的毛皮上顯得相當耀眼,但誰能想到,記者眼前這兩頭分別叫“輝輝”和“煌煌”的小奶牛,其生命初態曾經歷過零下196攝氏度的低溫。

    “它們都是克隆牛的后代。”錦繡大地胚胎中心的技術主管王剛興奮的向記者介紹說,從2002年我國首批自主完成的成年體細胞克隆牛成功問世至今,克隆牛的技術已經相對完善并取得一定的成績。但如何更好的保留優良基因,培育高品質的奶牛、肉牛一直是這個領域內學者們關心的話題。就在這種氛圍下,被稱為“胚胎冷凍法”的手段出現了。

    不到3秒種的時間,胚胎就成為了像玻璃一般的冰晶

    去年10月開始,為保存高品質奶牛的優良基因,包括王剛在內的研究小組琢磨一種方法,通過保存克隆好的胚胎來提高優質品種的使用率。王剛向記者介紹說:“起初,我們從牛的耳朵末梢上取下一塊組織,然后通過一段時間的培養,讓其成長為成纖維細胞。接著取其細胞核,注入去核的卵子細胞中,胚胎就算完成了。”但這只是第一步,接下來的時間里,實驗室的工作人員開始對如何有效保存胚胎進行研究。最終,他們選擇了液氮作為冷凍保存胚胎的載體。

    在實驗室里,王剛向記者演示了這種繁瑣但緊湊的實驗過程。首先要通過一些技術手段來為胚胎脫水,如果不脫水的話,在冷凍過程中細胞內形成的冰晶會使細胞壁破損。接著,用口吸管的末端細管將胚胎吸起,然后輕輕吹入小型試管,注入冷凍防護液,最后將小水滴一般的胚胎放入液氮中,不到3秒種的時間,胚胎就成為了像玻璃一般的冰晶,這就是“胚胎冷凍法”。“輝輝”和“煌煌”就是用這種方法培育出來的成果,整個實驗過程前后歷時整整一年。

    當需要用胚胎進行繁殖時,就得進行解凍

    實驗成功的背后也有不為人知的危險,記者在實驗室看到了冒著冷氣的液氮。據說,液氮的溫度在零下196攝氏度,實驗人員在實驗過程中要很小心,如果用手觸碰液氮極有可能產生嚴重的后果。“手上要是粘有水或者汗液,一旦觸碰到低溫的液氮,水或者汗液會立刻結冰,從而凍傷甚至凍死手掌細胞。正是這種危險性時刻讓我們保持警醒,操作的時候講究一定的技巧,熟練后就好辦多了。”王剛告訴記者。

    為何要選用液氮作為冷凍細胞的載體呢?胚胎中心主任吳亦芳為記者揭開了這一謎團:“冷凍胚胎的難處在于要在極短的時間內將其溫度降到零下10攝氏度以下,不然胚胎就會受損。而零下196攝氏度的液氮能夠在不到3秒的時間輕松完成這一使命。”

    王剛還告訴記者:“只要保證胚胎安全的冷凍在液氮里面,運輸到各地都是很方便的。”當需要用胚胎進行繁殖時,就得進行解凍,這個過程很關鍵。解凍最合適的溫度為35攝氏度,先得將凍于液氮中的試管取出進行“空氣浴”,接著置于水中持續“水浴”。“如果直接進行水浴的話,試管會因為冷暖差異引起脹裂。”王剛說。

    通過這種冷凍方法能保存胚胎存活的概率在50%以上

    據實驗室工作人員介紹,胚胎微滴玻璃化冷凍法的成功是經歷了多種反復實驗后得到的最佳冷凍方法。目前,通過這種冷凍方法能保存胚胎存活的概率在50%以上,不要小看這50%,這已經是克隆技術領域的一個新突破。吳亦芳告訴記者:“這種冷凍方法是目前來說存活概率最高的,因為解凍后,要保持胚胎的復蘇率在95%以上,而且在移植進母牛體內的受胎率也穩定在一個較高的水平上。”并且該技術的應用領域也會逐步擴大,可將大量生產的奶牛克隆胚胎冷凍保存,隨時進行胚胎移植,擴繁高產奶牛,能大力促進克隆技術的產業化,對于品種改良和增產牛奶都有實際的功效。既然可以冷凍牛的胚胎,那是否可以將人的胚胎也冷凍起來呢?對于記者的這種設想,吳亦芳認為:“理論上是可行的,但由于物種之間的差異性,技術手段上需要改進和變化的地方很多。比如說用這種冷凍方法我們還在羊身上做過實驗,跟用牛做實驗相比差別就很大。如果用于人類身上,也會遇到同樣的問題,但科技是不斷發展的,沒有想象就不會有進步。”

 
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