摘要：在飼料中添加不同形式的脲酶抑制劑氫醌，通過對貯存過程中維生素A含量和氫醌的熒光強度測定和分析，試驗結(jié)果表明：氫醌在飼料中氧化變質(zhì)加快，并且添加氫醌將提高飼料中的維生素A的損失（P<0.05），采用糊化淀粉包被氫醌有利于減少氫醌對維生素A的破壞作用（P<0.05），同時包被還有利于減少氫醌自身在貯存時的氧化變質(zhì)。
關(guān)鍵詞：氫醌；維生素A；損失率
脲酶抑制劑氫醌在土壤肥料學(xué)研究與應(yīng)用中屢見報道，是長效尿素產(chǎn)品的一種成分，用來抑制土壤中微生物產(chǎn)生的脲酶，減少尿素以氨的形式損失（Frank，1989；Norden，1986；宋勇春，1997；趙曉燕，1989）。在飼養(yǎng)動物中有報道用其來處理動物舍內(nèi)的糞尿，而直接飼喂給反芻動物的研究目前也有報道（張永根，2000，2001；白云峰，2001）。但HQ由于自身化學(xué)性質(zhì)比較活潑，作為脲酶抑制劑添加到飼料當(dāng)中可能被飼料成分氧化失活，而其自身對其它營養(yǎng)成分也會產(chǎn)生影響。
本試驗主要研究氫醌和糊化淀粉包被的氫醌顆粒在飼料中對維生素A的影響，以及氫醌自身在飼料中的貯存損失情況。
1 材料與方法
1.1 試驗設(shè)計
試驗一對維生素A在飼料貯存過程中的損失進(jìn)行研究，選擇兩種氫醌形式（純氫醌和淀粉包被氫醌顆粒）混合在飼料中以及0水平氫醌組為對照，在恒溫25℃的條件下，連續(xù)貯存2.5個月。
試驗二對氫醌在飼料中的貯存情況進(jìn)行研究，選擇兩種氫醌形式（純氫醌和淀粉包被氫醌顆粒）混合在飼料中，并以0水平氫醌組為對照，在恒溫25℃的條件下，連續(xù)貯存10周。
1.2 試驗飼料
采取人工的混合方法配制飼料，按照所選用的精料配方，在0水平組的基礎(chǔ)上，脲酶抑制劑組和脲酶抑制劑顆粒組分別添加脲酶抑制劑和脲酶抑制劑顆粒。混合后的各組精料分別裝在布袋中，放置于恒溫箱中貯存。
各組的配方見表1：
表1 試驗用精料配方
Table1.The composition of the concentrated feeding stuff in trail

注：所用多維和微量元素是由黑龍江省哈爾濱市乾元飼料廠提供
1.3 測定指標(biāo)
⑴　每隔15天測定一次維生素A的含量，維生素A的損失率=（首次測定的含量值－測定的含量值）/首次測定的含量值×100%。
⑵　每隔兩周測定一次氫醌的含量，氫醌的損失率=（首次測定的熒光強度值－測定的熒光強度值）/首次測定的熒光強度值×100%。
1.4 測定方法
維生素A的測定選用紫外分光光度法，使用紫外分光光度儀（UV-2401PC，日本島津公司生產(chǎn)附1cm石英杯）和自動回流消化儀。測定步驟如下：
1）皂化：稱取5g 左右（精確至0.001克）樣品于250ml 碘量瓶中，加入0.5g 的Vc與之混合，再加入30ml 脫醛無水乙醇和10ml 1:1氫氧化鉀溶液，于自動回流消化儀上回流30分鐘；
2）提取：碘量瓶中混合物冷卻后用75%的脫醛乙醇定容到100ml 棕色容量瓶中，取上清液10ml 于125ml 分液漏斗中，分別用20ml、10ml、10ml去氧乙醚萃取三次，合并乙醚萃取液；
3）堿洗和水洗：棄取分液漏斗中的水層后用15ml 1:1氫氧化鉀溶液洗，靜止分層后棄去下層堿液，再用蒸餾水洗至水層與酚酞指示劑反應(yīng)呈無色為止，靜止分層后棄取水層；
4）濃縮：將醚層液經(jīng)過干燥后的無水硫酸鈉，用乙醚定容到50ml 的棕色容量瓶中，之后取10ml 乙醚液于小三角瓶中在40℃水浴中蒸發(fā)至干，加入10ml 異丙醇使維生素A在適宜濃度范圍內(nèi)（9~15IU/ml）；
5）測定：以1cm 石英比色杯在310nm、325nm及334nm 三個波長處測定異丙醇溶液吸光度。
樣品含量計算公式：
樣品含量IU/g =1830×A325校正×500÷M÷100
A325校正=6.815A325?4.260A334?2.555A310
公式中：A為吸光度，1830為維生素A在異丙醇中的消光系數(shù)，M為樣品質(zhì)量，500為樣品稀釋體積ml。
氫醌的測定選用熒光比色法，選用的儀器為RF-510熒光分析儀（日本導(dǎo)津公司）。測定步驟如下：
準(zhǔn)確稱量精料樣品5克左右（精確至0.001克），置于玻璃研缽中，用少量無水乙醇潤濕后，研磨5分鐘；用無水乙醇洗滌固體，洗滌液定量轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，用無水乙醇定容至刻度；另取脲酶抑制劑標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成5mg/L的標(biāo)準(zhǔn)乙醇溶液，用其調(diào)整儀器的標(biāo)準(zhǔn)值；調(diào)整后，測定樣品溶液的熒光強度。
1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析在SAS統(tǒng)計軟件包上進(jìn)行。
2 結(jié)果與分析
2.1 氫醌對飼料中維生素A的影響
表2 維生素A在貯存過程中的損失率
Table2. The percentage loss of vitamin A in the storage

注：列比較的肩標(biāo)為小寫字母，肩標(biāo)含有相同字母者為差異不顯著（P>0.05），所含字母不同者為差異顯著（P<0.05）；行間比較肩標(biāo)為大寫字母，肩標(biāo)含有相同字母為差異不顯著（P>0.05），字母不同者為差異顯著（P<0.05）（下同，不再注明）。
通過定期測定維生素A 含量的變化，得到維生素A在貯存過程中的損失情況見表2。從維生素A損失率的數(shù)據(jù)可以看出：1、隨貯存時間的延長，各組的維生素A損失率都呈現(xiàn)增加的趨勢，對照組的維生素A損失率由0.5個月時1.28%增到到2.5個月時的8.75%，加氫醌組和加氫醌顆粒組的維生素A損失率分別由0.5個月時損失率3.84%、1.67%增到2.5個月時的26.60%和20.80%，總體上維生素A損失率隨時間的延長而顯著增加（P<0.05）；2、對照組的維生素A的損失率變化趨勢是緩慢的，相鄰的不同時間上差異是不顯著的。而加入不同形式的氫醌都加速了維生素 A的損失，使相鄰的不同時間上維生素A損失率變化的差異變得顯著（P<0.05），而且隨著時間的延長，氫醌對維生素A的破壞作用加強，在15天時，氫醌使A損失增加2.56個百分點，在30、45、60雞5天時，氫醌使A的損失分別增加5.42、9.54、14.33、17.85個百分點；3、加氫醌組和加氫醌顆粒組在總體上還是有不同的趨勢，與添加氫醌組比較，在0.5、1.0、1.5、2.0及2.5個月時用湖化淀粉包被氫醌可以使維生素A損失率分別降低31.52%、31.52%、26.02%及21.80%，包被氫醌可以減少預(yù)混料中維生素A的損失。
精料中的水分含量要高，而且在精料中又含有礦質(zhì)元素，這都將促進(jìn)氫醌的氧化變質(zhì)。
2.2 氫醌在飼料中的貯存損失
通過貯存過程中定期測定飼料中脲酶抑制劑熒光強度的變化，得到貯存過程中的氫醌失率見表3。
表3 氫醌貯存過程中的損失率
Table 3. The percentage loss of hydroquinone in the storage

由氫醌在精料貯存過程中的損失率情況可以看出：氫醌的損失主要發(fā)生在頭2周，氫醌和氫醌顆粒損失率分別可達(dá)到47.06%和28.29%，占10周總損失率的50%以上，前6周的損失率隨時間變化顯著（P<0.05），氫醌和氫醌顆粒損失率分別可達(dá)到80.47%和53.07%，而在6周后損失率的變化情況不再明顯（P>0.05）；氫醌的不同形態(tài)，在精料貯存過程中氫醌的損失率表現(xiàn)為差異顯著（P<0.05），在頭2周包被的氫醌減少損失18.77%，對于以純氫醌形式加入到飼料中，6周后氫醌損失達(dá)到80.20%～86.51%，而以氫醌顆粒形式加入到飼料中的氫醌僅損失49.94%～53.07%，包被的氫醌減少損失30%。包被可以減少預(yù)混料中氫醌的損失。
3、 討論
氫醌的化學(xué)名稱為對苯二酚，在苯環(huán)上存在兩個對稱的羥基，其中的H+非常活潑，容易形成半醌自由基，氫醌本身可以作為抗氧化劑。該試驗證明，氫醌對飼料中VA有一定的破壞作用，而且隨著貯存時間的延長，這種破壞作用越嚴(yán)重，用湖化淀粉包被氫醌后，可顯著減輕氫醌對VA的破壞作用，使這種破壞作用降低21~31%。
試驗2的研究結(jié)果表明，在貯存過程中，飼料中氫醌非常容易失效，在兩周時就損失47.06%，6周后達(dá)到80%，而用湖化淀粉包被后可以減少氫醌損失約30%左右。精料中存在10~15%的水分，而且又含有礦質(zhì)元素，這些都將促進(jìn)氫醌氧化變質(zhì)的因素。