摘 要 按中獸醫組方原則配制加工成中草藥飼料添加劑A和B,分別按0.5%、1%、2%3個濃度添加,設抗生素和空白對照組,對28日齡土雜雞隨機分組進行飼養試驗,分別于42、56、70日齡測定IgG含量。結果顯示:中草藥添加劑能顯著增加土雜雞IgG水平,而且隨著日齡的增加有增高的趨勢。
近年來應用免疫學理論和方法研究中草藥的免疫增強作用受到廣泛重視,多數補益中草藥具有免疫增強作用,其主要活性物質如多糖、甙類、生物堿、有機酸、揮發性成分等對許多動物機體免疫系統的刺激作用而呈現較為典型的非特異性免疫和特異性免疫的促進作用,部分補益藥還顯示雙向調節作用[1]。由于中草藥對雞特別是土雜雞的IgG的研究較少,本文就此將研究結果予以報道。
1 材料與方法
1.1 中草藥配方
1.1.1 中草藥復方添加劑A 由黃荊、大黃、黃連、白術等藥物飲片(所有藥物經檢驗符合生藥質量標準并制成相應的飲片)按適當比例混合,置于超十能真空提取儀煮提罐內,加五倍量的冷水浸泡15h,98℃回流提取3次(每次1.5h),8層紗布過濾,合并3次濾液濃縮,測定生藥量,加適當載體干燥稀釋至每千克相當于1kg生藥量的藥粉,備用。
1.1.2 中草藥復方添加劑B 由黃荊、大黃、黃連、白術等藥物飲片經80目粉碎后按適當比例配制而成。
1.2 試驗動物及分組
將昆明華曦牧業有限公司提供的28日齡廣西土雜雞360只,隨機分為8個組,每組設3個重復,每個重復15只,共45只雞。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別以0.5%、1%、2%3個濃度的中草藥復方添加劑A替代飼料中的抗生素;Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組同法添加中草藥復方添加劑B替代飼料中的抗生素;Ⅶ組投喂含50mg/kg泰樂菌素的土雜雞全價配合飼料;Ⅷ組為空白對照。所有全價飼料的營養標準符合中華人民共和國專業標準ZB B 40335—86的要求。
1.3 飼養管理
飼養全期采用按組分欄網上平養,自然溫度18~28℃,自由采食,自由飲水,飼養期42d。
1.4 樣品采集
試驗各組及對照組均于相應日齡每個重復隨機采5份樣品(翅下靜脈采血),按相關試驗要求處理后備用。
1.5 免疫球蛋白IgG測定
選用IgG標準試劑盒,應用F-33半自動生化分析儀,比濁法測定IgG值。
1.6 數據處理
試驗數據采用統計學軟件SAS8.2進行處理分析,各組數據以平均值±標準差(SD)表示,顯著性差異檢驗采用方差分析。
2 試驗結果
土雜雞不同日齡補體IgG值測定結果見表1。
42日齡IgG檢測結果顯示,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組含量為1 587.97mg/l、1 890.83mg/l、1 902.60mg/l,Ⅱ、Ⅲ組比Ⅰ組高19.07%、19.81%,差異顯著(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ組比抗生素組Ⅶ高32.73%、33.56%,比空白對照組高45.46%、46.37%,差異顯著(P<0.05);Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組含量為1 502.83mg/l、1 849.4mg/l、1 658.97mg/l,Ⅴ組比Ⅳ組高23.06%,差異顯著(P<0.05),Ⅴ、Ⅵ組比抗生素組Ⅶ高29.82%、16.45%,比空白對照組高42.27%、27.62%,差異顯著(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ組顯著高于Ⅰ、Ⅳ組(P<0.05);而抗生素組與空白對照組差異不顯著。
56日齡IgG檢測結果顯示,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組含量為2 287.57mg/l、2 602.38mg/l、2 604.57mg/l,Ⅱ、Ⅲ組之間差異不顯著,Ⅱ、Ⅲ組分別比Ⅰ組高13.76%和13.86%,比抗生素組Ⅶ分別高26.10%和26.21%,比空白對照組高29.22%和29.33%,差異顯著(P<0.05);Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組含量為2 268.67mg/l、2 509.17mg/l、2 493.46mg/l,Ⅴ組比Ⅳ組高10.60%,差異顯著(P<0.05),Ⅴ組比空白對照組高24.59%,差異顯著(P<0.05),Ⅴ組比抗生素組Ⅶ高21.59%,差異顯著(P<0.05);中草藥復方添加劑Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ組顯著高于Ⅰ、Ⅳ組(P<0.05);抗生素組與空白對照組差異不顯著。
70日齡IgG檢測結果顯示,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組含量為2 666.50mg/l、2 964.43mg/l、3 039.03mg/l,Ⅲ組比Ⅰ組、 抗生素組Ⅶ、 空白對照組高13.97%、 7.27%、 24.00%,差異顯著(P<0.05),Ⅱ組比空白對照組高20.96%, 差異顯著(P<0.05); Ⅳ、 Ⅴ、 Ⅵ組含量為 2 665.33mg/l、2 900.03mg/l、3 038.57mg/l,Ⅵ組比Ⅳ組高14.00%,差異顯著(P<0.05),Ⅵ組比抗生素組Ⅶ分別高17.25%, Ⅴ、 Ⅵ組比空白對照組高18.33%、 23.98%,差異顯著(P<0.05),中草藥復方添加劑Ⅲ、Ⅵ組差異高于Ⅰ、Ⅵ組(P<0.05);抗生素組與空白對照組差異不顯著。
3 討論
許多中草藥可提高機體的抗體水平及機體的免疫力。淫羊藿可提高羊紅細胞免疫小鼠血清溶血素水平,提高脾臟抗體水平,增加抗體生產細胞數量及對抗環磷酰胺抑制抗體生成的作用。黃芪多糖能明顯促進機體抗體的生成,可使試驗小鼠血清IgA、IgM、IgG的水平提高。研究表明,隨著日齡的增加土雜雞血清IgG水平也隨之增高,而中草藥添加劑在不同日齡階段的IgG水平顯著高于抗生素組和空白對照組,這種作用在中草藥添加劑A的Ⅱ、Ⅲ組和中草藥添加劑B的Ⅴ、Ⅵ組表現更加明顯,說明中草藥添加劑在添加量達到1%和2%時對抗體水平的提高作用更加明顯;而抗生素組和空白對照組比較不同日齡階段的IgG水平無明顯差異,證實了中草藥添加劑在提高機體非特異性免疫方面更具優勢。
本試驗對土雜雞42、56、70日齡補體IgG檢測結果變化如下圖: