摘 要 試驗(yàn)取144只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞，隨機(jī)分為2組，每組72只，組內(nèi)設(shè)2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)36只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組飼喂添加1%松針粉和1%麥飯石的基礎(chǔ)日糧，飼養(yǎng)42d。分別在第7、14、21、28、35、42日齡隨機(jī)取雞12只，每組6只，每個(gè)重復(fù)3只。頸靜脈放血致死，解剖取胸腺稱重，取材制作石蠟切片,光鏡觀察，顯微攝影。結(jié)果表明：試驗(yàn)組與對(duì)照組雞胸腺指數(shù)在7、35日齡差異極顯著（P<0.01）,14、42日齡差異顯著（P<0.05）；胸腺小葉皮質(zhì)顯著厚于對(duì)照組。本試驗(yàn)從組織學(xué)角度證明，在基礎(chǔ)日糧中添加松針粉和麥飯石可顯著促進(jìn)肉雞胸腺的早期發(fā)育，延緩?fù)嘶臅r(shí)間，增強(qiáng)免疫應(yīng)答能力，提高機(jī)體抗病力。
松針粉是一種高效的綠色飼料添加劑，含有畜禽生長所需要的多種營養(yǎng)成分[1], 并能提高機(jī)體的免疫力，國內(nèi)外有關(guān)這方面的報(bào)道很多。據(jù)報(bào)道，在雛雞日糧中添加3%的松針粉可明顯提高雛雞紅細(xì)胞中血紅蛋白的含量、白細(xì)胞數(shù)量和ND（新城疫）抗體水平，全面提高雛雞的免疫功能[2]。麥飯石是一種高效無毒天然藥物礦石，富含畜禽生長所必需的微量元素鐵、硒、鈷等十幾種元素[3]。大量的研究表明：用麥飯石可溶出多種微量元素，促進(jìn)機(jī)體的生長發(fā)育、新陳代謝以及增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。麥飯石可使動(dòng)物血中的γ-球蛋白增加，T淋巴細(xì)胞數(shù)目增多，從而使機(jī)體的免疫能力增強(qiáng)[3]。目前的研究大都是把松針粉和麥飯石作為飼料添加劑分別添加，而把它們作為復(fù)合飼料添加劑則很少有報(bào)道，從兩者對(duì)肉雞免疫器官發(fā)育影響的角度來研究更為少見。我國有豐富的松針粉和麥飯石資源，本試驗(yàn)著重研究日糧中添加松針粉和麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺生長發(fā)育的影響，從組織學(xué)的角度研究這種復(fù)合添加劑提高肉雞免疫力、抗病力的作用機(jī)理，為合理開發(fā)和利用豐富的松針粉和麥飯石自然資源提供科學(xué)依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)地點(diǎn)
選用144只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞，在安徽技術(shù)師范學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試驗(yàn)。
1.1.2 試驗(yàn)添加劑
松針粉在安徽省定遠(yuǎn)縣岱山采集制備，微量元素含量（mg/kg）：硒0.58， 銅2.77，鐵144.85，鋅106.82，錳91.87，鉻0.66。麥飯石由安徽省定遠(yuǎn)縣麥飯石廠提供，微量元素含量（mg/kg）：硒0.74，銅3.32，鐵1 924.27，鋅141.00，錳411.79，鉻16.10。
1.2 試驗(yàn)分組與處理
將144只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞隨機(jī)分為2組，每組72只，組內(nèi)設(shè)2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)36只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組添加1%松針粉和1%麥飯石的復(fù)合添加劑，飼養(yǎng)42d。采用地面平養(yǎng)，自由采食、飲水，常規(guī)管理、免疫。基礎(chǔ)日糧配方參照NRC（1994）AA肉雞營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)制訂，日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。
1.3 樣品采集與處理
分別在第7、14、21、28、35、42日齡隨機(jī)取雞12只，每組6只，每個(gè)重復(fù)3只。頸靜脈放血致死，解剖取胸腺，電子分析天平（MP200B，精確到0.001g）稱重，Bouin液常溫固定24h，乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片5～7μm，HE染色，中性樹膠封片，光學(xué)顯微攝影系統(tǒng)觀察并攝影。
1.4 數(shù)據(jù)處理
全部數(shù)據(jù)均采用SPSS（10.0）統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“X±SD”表示。
2 結(jié)果
2.1 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺指數(shù)的影響
松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺指數(shù)（胸腺重量與活重的比值）的影響見表2。
由表2可見：試驗(yàn)組與對(duì)照組相比較，胸腺指數(shù) 在7、35日齡時(shí)差異極顯著（P<0.01），14、42日齡時(shí)差異顯著（P<0.05）。
2.2 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺組織結(jié)構(gòu)的影響
在7、14日齡時(shí)，對(duì)照組肉雞的胸腺小葉體積小，皮質(zhì)薄，淋巴細(xì)胞排列疏松，髓質(zhì)內(nèi)含有少量的胸腺小體。對(duì)照組7日齡胸腺情況見圖1。隨著日齡增長，第21、28、35日齡時(shí)，胸腺小葉體積逐漸增大，皮質(zhì)不同程度的增厚，淋巴細(xì)胞排列由疏松至密集，胸腺小體增多；第42日齡時(shí)，皮質(zhì)出現(xiàn)變薄現(xiàn)象，淋巴細(xì)胞排列較為疏松，但髓質(zhì)內(nèi)胸腺小體數(shù)量較多（見圖2）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組7、14日齡時(shí)胸腺小葉體積較大，皮質(zhì)明顯較厚，淋巴細(xì)胞排列緊密，胸腺小體數(shù)量較多。試驗(yàn)組7日齡胸腺情況見圖3；第42日齡時(shí)，皮質(zhì)仍明顯厚于對(duì)照組，淋巴細(xì)胞排列緊密，髓質(zhì)內(nèi)胸腺小體的數(shù)量較多（見圖4）。
3 討論
3.1 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑能促進(jìn)肉雞胸腺的發(fā)育
營養(yǎng)物質(zhì)是免疫器官發(fā)育的物質(zhì)基礎(chǔ)。松針粉中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素以及微量元素鐵、硒、鋅等；麥飯石含有豐富的微量元素鐵、銅、硒、鉻等。這些營養(yǎng)物質(zhì)對(duì)免疫器官的發(fā)育和免疫細(xì)胞的增殖有一定的促進(jìn)作用，把兩者作為復(fù)合添加劑，則可以營養(yǎng)互補(bǔ)，營養(yǎng)元素更加全面、豐富，更有利于免疫細(xì)胞的增殖和免疫器官的發(fā)育。所以本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組肉雞胸腺發(fā)育較快，退化較晚。因此在7、35日齡，胸腺指數(shù)與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）,14、42日齡差異顯著（P<0.05）。
3.2 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑促進(jìn)了肉雞中樞免疫器官的早期發(fā)育
胸腺是機(jī)體的中樞免疫器官，在淋巴細(xì)胞的形成誘導(dǎo)分化過程中起著重要的作用[4]。胸腺是培育T淋巴細(xì)胞的場(chǎng)所，可產(chǎn)生胸腺激素[5]。大量的研究證實(shí)，日糧中缺乏營養(yǎng)物質(zhì)會(huì)影響免疫器官的發(fā)育和全身的免疫水平。與畜禽免疫有關(guān)的營養(yǎng)素有蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、微量元素等[6]。Aschkenasy等（1975）在蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良大鼠模型中發(fā)現(xiàn)，每種必需氨基酸的缺乏均會(huì)影響淋巴細(xì)胞的生長恢復(fù)，其中支鏈氨基酸，特別是纈氨酸的缺乏，顯著影響胸腺淋巴細(xì)胞的生長恢復(fù)。維生素是許多酶的輔酶或輔基，間接參與免疫細(xì)胞的增殖、分化和DNA、RNA抗體的合成等。據(jù)報(bào)道，維生素E可增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫[7]。大量的試驗(yàn)表明：雞缺乏維生素A時(shí)，抗體反應(yīng)減弱，胸腺和腔上囊重量減輕。維生素C是維持胸腺網(wǎng)狀細(xì)胞功能所必需的。缺乏維生素B能夠引起胸腺發(fā)育受阻，淋巴細(xì)胞數(shù)目減少，免疫力下降[8]。微量元素是參與動(dòng)物機(jī)體免疫過程的重要物質(zhì)[8]。研究表明：如果同時(shí)缺乏硒和維生素E會(huì)阻礙胸腺的發(fā)育，導(dǎo)致以上皮細(xì)胞逐漸退化和淋巴細(xì)胞耗竭為特征的胸腺輕度的組織病理學(xué)變化[9]。Chandra等認(rèn)為，缺鋅使胸腺激素的分泌減少，由此而影響T淋巴細(xì)胞成熟，使機(jī)體的免疫功能出現(xiàn)缺陷。動(dòng)物試驗(yàn)證明，缺鋅早期胸腺明顯減輕，萎縮非常明顯，主要是因?yàn)樾叵倨べ|(zhì)的細(xì)胞數(shù)減少。缺鋅胸腺萎縮的原因可能是鋅缺乏時(shí)腎上腺皮質(zhì)酮分泌增加，對(duì)皮質(zhì)酮感受增高的胸腺發(fā)生繼發(fā)性萎縮而引起的[10]。
經(jīng)檢測(cè)本試驗(yàn)所采用的松針粉中含有豐富的維生素A、維生素E、氨基酸、微量元素等；麥飯石中鋅、鐵、硒等含量也豐富。這些營養(yǎng)元素對(duì)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫具有重要的作用，能夠促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖和分化。故在本試驗(yàn)中，在同一日齡，胸腺小葉體積較大，皮質(zhì)明顯較厚，淋巴細(xì)胞排列緊密，胸腺小體數(shù)量較多。這些結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均為免疫應(yīng)答較強(qiáng)的表現(xiàn)。本試驗(yàn)的另一研究證明在肉雞的日糧中加入松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑，營養(yǎng)元素更加全面豐富，明顯促進(jìn)了肉雞中樞免疫器官的早期發(fā)育。中樞免疫器官早期良好發(fā)育，更有利于外周免疫器官的發(fā)育及其行使免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體的整體免疫效能。
參考文獻(xiàn)
松針粉是一種高效的綠色飼料添加劑，含有畜禽生長所需要的多種營養(yǎng)成分[1], 并能提高機(jī)體的免疫力，國內(nèi)外有關(guān)這方面的報(bào)道很多。據(jù)報(bào)道，在雛雞日糧中添加3%的松針粉可明顯提高雛雞紅細(xì)胞中血紅蛋白的含量、白細(xì)胞數(shù)量和ND（新城疫）抗體水平，全面提高雛雞的免疫功能[2]。麥飯石是一種高效無毒天然藥物礦石，富含畜禽生長所必需的微量元素鐵、硒、鈷等十幾種元素[3]。大量的研究表明：用麥飯石可溶出多種微量元素，促進(jìn)機(jī)體的生長發(fā)育、新陳代謝以及增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。麥飯石可使動(dòng)物血中的γ-球蛋白增加，T淋巴細(xì)胞數(shù)目增多，從而使機(jī)體的免疫能力增強(qiáng)[3]。目前的研究大都是把松針粉和麥飯石作為飼料添加劑分別添加，而把它們作為復(fù)合飼料添加劑則很少有報(bào)道，從兩者對(duì)肉雞免疫器官發(fā)育影響的角度來研究更為少見。我國有豐富的松針粉和麥飯石資源，本試驗(yàn)著重研究日糧中添加松針粉和麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺生長發(fā)育的影響，從組織學(xué)的角度研究這種復(fù)合添加劑提高肉雞免疫力、抗病力的作用機(jī)理，為合理開發(fā)和利用豐富的松針粉和麥飯石自然資源提供科學(xué)依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)地點(diǎn)
選用144只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞，在安徽技術(shù)師范學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試驗(yàn)。
1.1.2 試驗(yàn)添加劑
松針粉在安徽省定遠(yuǎn)縣岱山采集制備，微量元素含量（mg/kg）：硒0.58， 銅2.77，鐵144.85，鋅106.82，錳91.87，鉻0.66。麥飯石由安徽省定遠(yuǎn)縣麥飯石廠提供，微量元素含量（mg/kg）：硒0.74，銅3.32，鐵1 924.27，鋅141.00，錳411.79，鉻16.10。
1.2 試驗(yàn)分組與處理
將144只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞隨機(jī)分為2組，每組72只，組內(nèi)設(shè)2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)36只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組添加1%松針粉和1%麥飯石的復(fù)合添加劑，飼養(yǎng)42d。采用地面平養(yǎng)，自由采食、飲水，常規(guī)管理、免疫。基礎(chǔ)日糧配方參照NRC（1994）AA肉雞營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)制訂，日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。
1.3 樣品采集與處理
分別在第7、14、21、28、35、42日齡隨機(jī)取雞12只，每組6只，每個(gè)重復(fù)3只。頸靜脈放血致死，解剖取胸腺，電子分析天平（MP200B，精確到0.001g）稱重，Bouin液常溫固定24h，乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片5～7μm，HE染色，中性樹膠封片，光學(xué)顯微攝影系統(tǒng)觀察并攝影。
1.4 數(shù)據(jù)處理
全部數(shù)據(jù)均采用SPSS（10.0）統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“X±SD”表示。
2 結(jié)果
2.1 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺指數(shù)的影響
松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺指數(shù)（胸腺重量與活重的比值）的影響見表2。
由表2可見：試驗(yàn)組與對(duì)照組相比較，胸腺指數(shù) 在7、35日齡時(shí)差異極顯著（P<0.01），14、42日齡時(shí)差異顯著（P<0.05）。
2.2 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑對(duì)肉雞胸腺組織結(jié)構(gòu)的影響
在7、14日齡時(shí)，對(duì)照組肉雞的胸腺小葉體積小，皮質(zhì)薄，淋巴細(xì)胞排列疏松，髓質(zhì)內(nèi)含有少量的胸腺小體。對(duì)照組7日齡胸腺情況見圖1。隨著日齡增長，第21、28、35日齡時(shí)，胸腺小葉體積逐漸增大，皮質(zhì)不同程度的增厚，淋巴細(xì)胞排列由疏松至密集，胸腺小體增多；第42日齡時(shí)，皮質(zhì)出現(xiàn)變薄現(xiàn)象，淋巴細(xì)胞排列較為疏松，但髓質(zhì)內(nèi)胸腺小體數(shù)量較多（見圖2）。與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組7、14日齡時(shí)胸腺小葉體積較大，皮質(zhì)明顯較厚，淋巴細(xì)胞排列緊密，胸腺小體數(shù)量較多。試驗(yàn)組7日齡胸腺情況見圖3；第42日齡時(shí)，皮質(zhì)仍明顯厚于對(duì)照組，淋巴細(xì)胞排列緊密，髓質(zhì)內(nèi)胸腺小體的數(shù)量較多（見圖4）。
3 討論
3.1 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑能促進(jìn)肉雞胸腺的發(fā)育
營養(yǎng)物質(zhì)是免疫器官發(fā)育的物質(zhì)基礎(chǔ)。松針粉中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素以及微量元素鐵、硒、鋅等；麥飯石含有豐富的微量元素鐵、銅、硒、鉻等。這些營養(yǎng)物質(zhì)對(duì)免疫器官的發(fā)育和免疫細(xì)胞的增殖有一定的促進(jìn)作用，把兩者作為復(fù)合添加劑，則可以營養(yǎng)互補(bǔ)，營養(yǎng)元素更加全面、豐富，更有利于免疫細(xì)胞的增殖和免疫器官的發(fā)育。所以本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組肉雞胸腺發(fā)育較快，退化較晚。因此在7、35日齡，胸腺指數(shù)與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01）,14、42日齡差異顯著（P<0.05）。
3.2 松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑促進(jìn)了肉雞中樞免疫器官的早期發(fā)育
胸腺是機(jī)體的中樞免疫器官，在淋巴細(xì)胞的形成誘導(dǎo)分化過程中起著重要的作用[4]。胸腺是培育T淋巴細(xì)胞的場(chǎng)所，可產(chǎn)生胸腺激素[5]。大量的研究證實(shí)，日糧中缺乏營養(yǎng)物質(zhì)會(huì)影響免疫器官的發(fā)育和全身的免疫水平。與畜禽免疫有關(guān)的營養(yǎng)素有蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、微量元素等[6]。Aschkenasy等（1975）在蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良大鼠模型中發(fā)現(xiàn)，每種必需氨基酸的缺乏均會(huì)影響淋巴細(xì)胞的生長恢復(fù)，其中支鏈氨基酸，特別是纈氨酸的缺乏，顯著影響胸腺淋巴細(xì)胞的生長恢復(fù)。維生素是許多酶的輔酶或輔基，間接參與免疫細(xì)胞的增殖、分化和DNA、RNA抗體的合成等。據(jù)報(bào)道，維生素E可增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫[7]。大量的試驗(yàn)表明：雞缺乏維生素A時(shí)，抗體反應(yīng)減弱，胸腺和腔上囊重量減輕。維生素C是維持胸腺網(wǎng)狀細(xì)胞功能所必需的。缺乏維生素B能夠引起胸腺發(fā)育受阻，淋巴細(xì)胞數(shù)目減少，免疫力下降[8]。微量元素是參與動(dòng)物機(jī)體免疫過程的重要物質(zhì)[8]。研究表明：如果同時(shí)缺乏硒和維生素E會(huì)阻礙胸腺的發(fā)育，導(dǎo)致以上皮細(xì)胞逐漸退化和淋巴細(xì)胞耗竭為特征的胸腺輕度的組織病理學(xué)變化[9]。Chandra等認(rèn)為，缺鋅使胸腺激素的分泌減少，由此而影響T淋巴細(xì)胞成熟，使機(jī)體的免疫功能出現(xiàn)缺陷。動(dòng)物試驗(yàn)證明，缺鋅早期胸腺明顯減輕，萎縮非常明顯，主要是因?yàn)樾叵倨べ|(zhì)的細(xì)胞數(shù)減少。缺鋅胸腺萎縮的原因可能是鋅缺乏時(shí)腎上腺皮質(zhì)酮分泌增加，對(duì)皮質(zhì)酮感受增高的胸腺發(fā)生繼發(fā)性萎縮而引起的[10]。
經(jīng)檢測(cè)本試驗(yàn)所采用的松針粉中含有豐富的維生素A、維生素E、氨基酸、微量元素等；麥飯石中鋅、鐵、硒等含量也豐富。這些營養(yǎng)元素對(duì)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫具有重要的作用，能夠促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖和分化。故在本試驗(yàn)中，在同一日齡，胸腺小葉體積較大，皮質(zhì)明顯較厚，淋巴細(xì)胞排列緊密，胸腺小體數(shù)量較多。這些結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均為免疫應(yīng)答較強(qiáng)的表現(xiàn)。本試驗(yàn)的另一研究證明在肉雞的日糧中加入松針粉-麥飯石復(fù)合添加劑，營養(yǎng)元素更加全面豐富，明顯促進(jìn)了肉雞中樞免疫器官的早期發(fā)育。中樞免疫器官早期良好發(fā)育，更有利于外周免疫器官的發(fā)育及其行使免疫功能，增強(qiáng)機(jī)體的整體免疫效能。
參考文獻(xiàn)
