隨著人類對抗生素作用認識的不斷深入,對于抗生素可能導致的動物體耐藥性的產生及藥物殘留越來越引起人們的關注。因此,許多國家相繼頒布法令,限制抗生素在飼料中的使用。而綠色微生態添加劑逐漸成為熱點。大量研究表明,甘露寡糖在動物體內促進腸道有益菌的增殖,減少腸道病原菌,提高腸道黏膜的完整性,調節動物免疫反應從而提高動物的生產性能。本實驗旨在研究甘露寡糖對斷奶仔豬腸道菌群的影響,為甘露寡糖在仔豬飼料中的科學應用提供理論依據。
1 材料與方法
1.1 實驗動物與分組
選取健康的28日齡斷奶三元[杜×(大×長)] 雜交仔豬96頭,按體重相近,公母各半的原則分為4個處理組,每個處理組3個重復,每個重復8頭仔豬。各組初始體重無明顯差異,平均體重為(7.46±0.38)kg。
1.2 實驗飼糧及實驗設計
實驗用的酵母甘露寡糖由北京奧特奇生物有限公司提供。實驗用的基礎日糧參照NRC(1998)10-20Kg體重仔豬的營養標準配制,由沈陽眾友飼料有限公司提供。
實驗按照單因素4處理3重復隨機設計實驗,實驗從28日齡斷奶開始,為期28 d(4周);實驗分4組進行:即各組基礎日糧相同,第1組為對照組,不添加甘露寡糖。第2組至第4組在斷奶仔豬的基礎日糧中分別添加0.1%、0.2%和0.4%的甘露寡糖。
1.3 飼養管理
本實驗在沈陽農業大學科研豬場進行。實驗仔豬飼養于封閉、半漏縫地板式豬舍,每個重復仔豬飼養于一欄,自由采食、飲水。按照常規飼養和免疫程序進行飼養管理,實驗期間腹瀉仔豬不用藥物治療。
1.4 測定指標及方法
實驗最后一天,每個重復隨機抽取1頭體重適中的健康仔豬進行屠宰,立即剖腹,取結腸、盲腸和直腸一段,檢測各腸段 內容物中大腸桿菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌的濃度。
1.5 統計分析
用SAS(6.12版本)統計軟件對全部數據進行處理和統計分析。菌落取Log10對數后進行統計分析。
2 結果與分析
由表1可知,不同甘露寡糖添加量都極其顯著抑制結腸、盲腸和直腸中大腸桿菌的增殖,0.2%的甘露寡糖添加量效果最好。第3組、第4組的結腸、盲腸和直腸中雙歧桿菌濃度顯著高于對照組。第2組的結腸中雙歧桿菌增殖顯著,但盲腸和直腸中雙歧桿菌的增殖效果與對照組相比差異不顯著。第2組直腸中乳酸桿菌濃度顯著高于對照組,第3組盲腸中乳酸桿菌濃度顯著高于對照組,而各個實驗組在結腸中乳酸桿菌濃度與對照組相比差異不顯著。
表1 不同濃度甘露寡糖對斷奶仔豬腸道菌群的影響
第1組(對照組) 第2組(0.1%甘露寡糖) 第3組(0.2%甘露寡糖) 第4組(0.4%甘露寡糖)
大腸桿菌Escherichia.coli
結腸 7.02±0.03A 6.81±0.02B 6.04±0.01B 6.15±0.06B
盲腸 7.10±0.21A 6.43±0.06B 6.11±0.04B 6.20±0.10B
直腸 7.08±0.04A 6.64±0.08B 6.23±0.11B 6.32±0.17B
雙歧桿菌Bifidobacterium
結腸 8.71±0.04a 9.04±0.06b 9.24±0.09b 8.92±0.08b
盲腸 8.24±0.11a 8.20±0.05a 9.05±0.08b 8.48±0.03b
直腸 8.64±0.03a 8.79±0.12a 9.44±0.10b 8.81±0.05b
乳酸桿菌Lactic bacteria
結腸 8.31±0.22 8.27±0.09 8.38±0.04 8.44±0.12
盲腸 8.04±0.05a 8.21±0.03a 8.87±0.11b 8.11±0.07a
直腸 8.46±0.03a 9.12±0.06b 8.67±0.21a 8.34±0.12a
1、 Log10efn/g:每克腸內容物含菌落數的對數值。
2、 同行數據肩標完全不同表示差異顯著。大寫字母不同者為差異極顯著(P<0.01). 小寫字母不同者為差異顯著(P<0.05).
3 討論
目前直接研究甘露寡糖調節動物腸道微生態系統的文獻不是很多。Sisak(1994)報道雞飼料中添加0.1%的甘露寡糖可減少盲腸、肝、脾中沙門氏菌。Schoeni和 Wong(1994)也指出,用甘露寡糖飼喂肉仔雞降低了金黃色葡萄球菌在其腸道中的定植。體外實驗還表明:粘連在上皮細胞上的大腸桿菌碰到甘露寡糖后可在30 min內脫落下來,或者由于病原菌與甘露寡糖結合后無法利用其提供的營養而饑餓死亡。Fernadez等研究發現,在母雞日糧中添加甘露寡糖能提高母雞盲腸內容物中雙歧桿菌數。本次實驗結果表明,添加甘露寡糖能顯著降低仔豬各腸段的大腸桿菌的濃度。而且在同樣的條件下培養大腸桿菌時,對照組的培養基上還生長了其它一些有害菌,實驗組沒有出現這種情況,這可以進一步說明甘露寡糖具有抑制有害菌的作用。添加0.2%和0.4%的甘露寡糖能顯著增強仔豬各腸道的雙歧桿菌的濃度,而添加0.15%的甘露寡糖只能顯著增強仔豬結腸中的雙歧桿菌的濃度。本實驗中甘露寡糖對乳酸桿菌的增殖作用在不同腸段表現存在差異。具體原因還不是十分清楚。這也提示我們應更加深入地研究其反應機理,以期更好地利用甘露寡糖這一新型綠色微生態添加劑。