摘 要：試驗選用28頭體重11.74 ±
關鍵詞：發(fā)酵飼料，大腸桿菌，生長性能，腸道菌群，血液生化參數(shù)，仔豬
前言
大腸桿菌K88是引起仔豬腹瀉的重要因素之一，本試驗旨在探討發(fā)酵料對人工感染大腸桿菌斷奶仔豬的保護力，探討對生長性能、腹瀉和糞便中微生物菌群及生理健康狀況的影響。
1、材料與方法
1.1、試驗動物及分組
選用28頭體重11.74±
1.2、試驗日糧
采用玉米-豆粕型基礎日糧，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗組為發(fā)酵飼料添加組，對照組為抗生素添加組。仔豬發(fā)酵料為北京晟亞育達生物科技有限公司（前身為北京肉多多生物科技有限公司）研制；0.5%預混料1不含抗生素，0.5%預混料2含有抗生素，兩種預混料由北京德寶群興科貿(mào)有限公司提供。
表1 日糧組成及營養(yǎng)水平
|
原料 |
對照組，% |
試驗組，% |
|
膨化玉米 |
20 |
15 |
|
玉米 |
34 |
33 |
|
去皮豆粕 |
10 |
9.4 |
|
膨化大豆 |
5 |
8 |
|
發(fā)酵豆粕 |
5 |
0 |
|
進口魚粉 |
5 |
5 |
|
郁氏代乳粉 |
10 |
10 |
|
仔豬發(fā)酵料 |
0 |
10 |
|
豆油 |
1.4 |
2 |
|
葡萄糖 |
5 |
3 |
|
磷酸氫鈣2水 |
1.3 |
1.3 |
|
石粉 |
0.8 |
0.8 |
|
食鹽 |
0.3 |
0.3 |
|
蛋氨酸（98%） |
0.27 |
0.27 |
|
賴氨酸（98%） |
0.6 |
0.5 |
|
蘇氨酸（98%） |
0.2 |
0.2 |
|
酸化劑 |
0.3 |
0.3 |
|
甜味劑 |
0.03 |
0.03 |
|
抗氧化劑 |
0.03 |
0.03 |
|
防霉劑 |
0.03 |
0.03 |
|
氧化鋅 |
0.26 |
0.26 |
|
氯化膽堿 |
0.08 |
0.08 |
|
0.5%預混料1 |
0.5 |
0.5 |
|
0.5%預混料2 |
0.5 |
|
|
|
|
|
|
營養(yǎng)水平 |
|
|
|
粗蛋白質(zhì) |
20.7 |
21 |
|
消化能，Mcal/kg |
3.36 |
3.34 |
|
|
1.46 |
1.47 |
|
Met |
0.58 |
0.54 |
|
Thr |
0.85 |
0.77 |
|
Trp |
0.19 |
0.17 |
|
Ca |
0.8 |
0.8 |
|
P |
0.6 |
0.6 |
注：每kg 0.5%預混料1提供維生素A，4400000 IU；維生素D3，1500000 IU；維生素E，16000 IU；維生素K3，800 mg；維生素B1，700 mg；維生素B2，2400 mg；維生素B6，1200 mg；維生素B12，8.4 mg；煙酸，145000 mg；泛酸，5800 mg；葉酸，400 mg；生物素，70 mg；氯化膽堿，
每kg 0.5%預混料2除了上述同樣成分外，還含有牛至油
1.3、試驗記錄
試驗豬只在試驗開始、結(jié)束時記錄其空腹體重；記錄每欄豬飼料采食量。觀察豬群采食情況、糞便形狀和健康狀況，記錄仔豬腹瀉情況。
1.4、試驗設計
試驗采用2 ´ 2因子設計，見表2。
表2 試驗分組設計
|
項目 |
對照組 |
|
發(fā)酵料組 | ||
|
處理1 |
處理2 |
|
處理3 |
處理4 | |
|
口服20 mL大腸桿菌K88（109） |
不攻毒 |
攻毒 |
|
不攻毒 |
攻毒 |
試驗開始后，于試驗第7 d，用20 mL大腸桿菌K88培養(yǎng)液對處理2和處理4的豬進行口服攻毒一次，攻毒后第7 d，從豬前腔靜脈采血，隨后屠宰。
1.5、測定指標
1）、生產(chǎn)性能指標：于試驗第1、14 d稱取仔豬個體重，試驗結(jié)束時結(jié)算飼料。根據(jù)體重、試驗日期、飼料消耗量等參數(shù)計算平均日增重、平均日采食量和料肉比。
2）、腹瀉指數(shù)：每天記錄攻毒后仔豬腹瀉時間、頭數(shù)，計算腹瀉指數(shù)。腹瀉指數(shù)依據(jù)腹瀉頭次乘以相應腹瀉得分計算，腹瀉得分則根據(jù)表3腹瀉評分標準查得
表3 腹瀉評分標準
|
程 度 |
外 觀 |
糞便中初水含量 Moisture |
評 分 |
|
正 常 |
條形或粒狀 |
< 70 |
0 |
|
輕 度 |
軟糞，能成形 |
70～75 |
1 |
|
中 度 |
稠狀，不成形，糞水無分離現(xiàn)象 |
75～80 |
2 |
|
嚴 重 |
液狀，不成形，糞水無分離現(xiàn)象 |
> 80 |
3 |
3）血液指標：在屠宰前1 h進行前腔靜脈采血，測定血漿中葡萄糖、總膽固醇、尿素氮、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、高密度脂蛋白膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇含量。
4）腸道微生物指標：屠宰后分別采集回腸和盲腸食糜樣品，用于測定其中大腸桿菌、總厭氧菌、耗氧菌和乳酸菌數(shù)量。
1.6、數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計
所有數(shù)據(jù)以重復為單位，采用SAS軟件ANOVA程序中的2×2因子進行統(tǒng)計。
2、結(jié)果與討論
試驗結(jié)果，見表4，5，6和7。
從表4可見，發(fā)酵料對仔豬平均日增重影響不顯著，但平均日增重呈上升趨勢；發(fā)酵料組平均日采食量沒有顯著增加，在攻毒后對照組采食量顯著高于其它幾個組（P < 0.05）；第三處理組料肉比顯著低于其它三個處理，而第一、二、四處理組間料肉比差異不顯著。試驗動物平均日增重呈上升趨勢，原因可能是發(fā)酵飼料消化吸收率改善引起，若試驗時間加長，日增重有可能有較大提高。
表4 發(fā)酵料對大腸桿菌攻毒后仔豬生長性能的影響
|
項目 |
常規(guī)料 |
發(fā)酵料 |
P值 | |||
|
處理1（不攻毒） |
處理2（攻毒） |
處理3（不攻毒） |
處理4（攻毒） |
| ||
|
初重，kg |
12.03 |
12.1 |
11.7 |
11.7 |
0.89 | |
|
末重，kg |
19.9 |
20.3 |
20.5 |
18.4 |
0.40 | |
|
平均日增重，g |
561 |
586 |
629 |
477 |
0.27 | |
|
平均日采食量，g |
833b |
|
873b |
801b |
0.04 | |
|
料肉比 |
|
|
1.42b |
|
0.09 | |
注：同行肩注不同字母表示差異顯著（P < 0.1）。
由表5數(shù)據(jù)可見，常規(guī)飼料組攻毒引起仔豬腹瀉，其指數(shù)為4.7，而發(fā)酵飼料組攻毒時仔豬腹瀉指數(shù)為2.6，與不攻毒相比，攻毒引起豬只明顯腹瀉，但發(fā)酵料明顯減少攻毒時仔豬腹。這表明，發(fā)酵飼料中含有的大量有益乳酸菌對仔豬消化道健康有很好的正向調(diào)節(jié)作用，它可以使大腸桿菌引起的腹瀉大大下降。
表5 發(fā)酵料對大腸桿菌感染仔豬的腹瀉的影響
|
項目 |
常規(guī)料 |
發(fā)酵料 | |||
|
不攻毒 |
攻 毒 |
不攻毒 |
攻 毒 | ||
|
腹瀉指數(shù) |
0 |
4.7 |
0 |
2.6 | |
由表6可見，采食發(fā)酵飼料的仔豬在大腸桿菌K88（109cell）攻毒后7 d其血漿低密度脂蛋白膽固醇含量極顯著提高（P < 0.01）；發(fā)酵料和攻毒存在互作，兩者顯著地降低了血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性（P < 0.05）；但發(fā)酵和攻毒對其他血液生化指標沒有顯著影響。
表6 發(fā)酵料對大腸桿菌攻毒后仔豬血清指標的影響
|
項目 |
常規(guī)料 |
發(fā)酵料 |
P 值 | ||||
|
不攻毒 |
攻 毒 |
不攻毒 |
攻 毒 |
對照vs發(fā)酵 |
攻毒vs不攻毒 |
兩者互作 | |
|
葡萄糖（mg/dL） |
220.05 |
205.05 |
264.48 |
234.33 |
0.11 |
0.73 |
0.30 |
|
膽固醇（mg/dL） |
70.25 |
75.00 |
73.75 |
89.25 |
0.10 |
0.31 |
0.06 |
|
尿素氮（mg/dL） |
14.25 |
14.75 |
13.25 |
18.25 |
0.47 |
0.21 |
0.13 |
|
谷草（U/L） |
90.63 |
98.08 |
99.20 |
78.20 |
0.73 |
0.39 |
0.68 |
|
谷丙（U/L） |
62.70 |
51.05 |
56.18 |
34.53 |
0.09 |
0.44 |
0.02 |
|
高密（mg/dL） |
28.25 |
30.95 |
28.23 |
33.18 |
0.50 |
0.49 |
0.03 |
|
低密（mg/dL） |
43.43 |
48.15 |
71.98 |
72.32 |
< 0.01 |
0.67 |
0.71 |
從表7可見，發(fā)酵飼料可顯著提高仔豬小腸乳酸菌數(shù)量（P < 0.1）；但對其他菌群如厭氧菌、耗氧菌和大腸桿菌等影響不大。這表明，發(fā)酵飼料可明顯改善仔豬小腸微生物區(qū)系平衡，使有益微生物，尤其是乳酸菌迅速增加，即發(fā)酵飼料可以直接有效地補充腸道中有益乳酸菌數(shù)量。
表7 仔豬回腸和盲腸微生物菌群的變化（log CFU/g 濕重）
|
項目 |
常規(guī)料 |
發(fā)酵料 |
P 值 | ||||
|
不攻毒 |
攻毒 |
不攻毒 |
攻毒 |
對照vs發(fā)酵 |
攻毒vs不攻毒 |
兩者互作 | |
|
回 腸 |
|
|
|
|
|
|
|
|
乳酸菌 |
6.32 |
5.83 |
7.51 |
6.78 |
0.07 |
0.28 |
0.83 |
|
總厭氧菌 |
6.90 |
6.83 |
7.22 |
6.61 |
0.92 |
0.48 |
0.56 |
|
大腸桿菌 |
4.00 |
4.35 |
3.36 |
4.13 |
0.39 |
0.66 |
0.27 |
|
耗氧菌 |
7.86 |
7.66 |
8.88 |
7.85 |
0.58 |
0.56 |
0.81 |
|
盲 腸 |
|
|
|
|
|
|
|
|
乳酸菌 |
6.62 |
6.45 |
7.21 |
6.59 |
0.38 |
0.59 |
0.35 |
|
總厭氧菌 |
6.75 |
6.89 |
7.03 |
7.02 |
0.64 |
0.89 |
0.86 |
|
大腸桿菌 |
4.16 |
4.85 |
3.99 |
4.34 |
0.32 |
0.60 |
0.13 |
|
耗氧菌 |
8.00 |
7.74 |
7.87 |
7.22 |
0.50 |
0.36 |
0.69 |
3、小結(jié)
發(fā)酵飼料可使仔豬日增重有提高趨勢，可顯著改善仔豬料肉比，同時降低腹瀉發(fā)生率；發(fā)酵飼料可改善仔豬小腸的微生物區(qū)系平衡程度，顯著提高仔豬小腸乳酸菌數(shù)量。采食發(fā)酵飼料的仔豬在大腸桿菌K88（109cell）攻毒后7 d除血漿低密度脂蛋白膽固醇含量極顯著地升高（P < 0.01）外，其它生化指標：如葡萄糖、尿素氮、谷草轉(zhuǎn)氨酶、高密度脂蛋白膽固醇等變化不大，而血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性顯著降低。
