1) 通過發(fā)酵這一過程,提高了植物蛋白的消化吸收率,從而提高了植物蛋白資源的利用率;
2) 通過發(fā)酵,增加了一定的蛋白含量(一般可增加4-5個百分點(diǎn));
3) 發(fā)酵產(chǎn)品中增加了酵母菌含量,對提高畜禽、水產(chǎn)動物的免疫力有很好的作用;
4) 由于發(fā)酵過程會產(chǎn)生一定的酸性,對乳仔豬更有幫助。
正因?yàn)橛幸陨瞎πВ芏囡暳蠌S已將這類產(chǎn)品作為一重要的原料列入配方,養(yǎng)殖場尤其是規(guī)模養(yǎng)豬場更是青睞這類產(chǎn)品。但是,目前飼料廠與規(guī)模豬場遇到的一個最現(xiàn)實(shí)的問題是:市場上這類產(chǎn)品參差不齊,魚目混雜,不知該相信誰?國家至今還沒有出臺統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。為此,筆者根據(jù)多年的研究工作經(jīng)驗(yàn),結(jié)合市場研究,認(rèn)為應(yīng)通過以下指標(biāo)來判定這類產(chǎn)品的優(yōu)劣,供同行參考,以期起到拋磚引玉的作用。
指標(biāo)1:蛋白質(zhì)含量 蛋白質(zhì)含量高低是衡量以蛋白為主要原料的產(chǎn)品質(zhì)量的重要指標(biāo),盡管這一指標(biāo)容易被不法分子鉆空子。但它仍然是一個最基本的指標(biāo)。如果這一指標(biāo)都不合格,其它就不用談了。 蛋白質(zhì)含量測定通常采用凱氏定氮法。該方法的測定結(jié)果包括了產(chǎn)品中所有含氮化合物。最終產(chǎn)品的蛋白含量不應(yīng)低于原料的蛋白含量。購買者可以先向供應(yīng)商詢問他的產(chǎn)品是用什么為原料生產(chǎn)的。目前,市場上發(fā)酵蛋白類產(chǎn)品的原料主要有:豆粕,菜粕、棉粕等雜粕,玉米蛋白、豌豆蛋白等食品工廠副產(chǎn)品。由于這一指標(biāo)存在著的很大的缺陷,因此最好采用測定真蛋白的方法。
指標(biāo)2:總細(xì)胞數(shù)與活細(xì)胞數(shù) 酵母細(xì)胞總數(shù)與活細(xì)胞數(shù)是衡量發(fā)酵類產(chǎn)品的重要指標(biāo)。現(xiàn)在有些不誠實(shí)的企業(yè),明明沒有發(fā)酵條件,也自稱是發(fā)酵產(chǎn)品。其實(shí)是用食品發(fā)酵工廠的渣類混合而成。這類產(chǎn)品往往蛋白含量很高,而價(jià)格卻不高。他們經(jīng)常用低價(jià)格去攻擊競爭對手。但這類產(chǎn)品是經(jīng)不住這一指標(biāo)的檢測的。用戶只要提出要求測這一指標(biāo),他們就不會信心十足了。
指標(biāo)3:感官指標(biāo) 這類指標(biāo)包括氣味、顏色與水溶性。發(fā)酵類產(chǎn)品有一種酵母特有的清香味,但這要靠經(jīng)驗(yàn)才能判斷。如果能聞到一種刺鼻的味道,那肯定是不對的。如果有很濃的香味,也要注意。可能是有些企業(yè)為了欺騙客戶而加了香精。關(guān)于顏色,這類產(chǎn)品以淡黃色至淺棕色為主。不應(yīng)該是黑色或偏暗的顏色。當(dāng)然,如有少量的黑點(diǎn)有可以理解的。關(guān)于水溶性:發(fā)酵產(chǎn)品因?yàn)榘l(fā)酵后會產(chǎn)氣,溶于水中后,不會很澄清的,甚至可能會有少量浮起來。如果水溶液很清澈,則可能不是發(fā)酵產(chǎn)品。
指標(biāo)4:小肽含量 生物化學(xué)中對于肽與蛋白質(zhì)的定義是這樣的:蛋白質(zhì)是由一條或者多條具有確定的氨基酸序列的多肽鏈構(gòu)成的大分子。最小的肽是二肽,它由二個氨基酸組成。相應(yīng)的,含12個以內(nèi)的氨基酸構(gòu)成的肽就稱為幾肽,統(tǒng)稱小肽。12-20個氨基酸構(gòu)成的肽稱為寡肽(oligopeptide),20個氨基酸以上構(gòu)成的肽稱為多肽(polypeptide)。現(xiàn)代動物營養(yǎng)學(xué)研究成果表明,蛋白質(zhì)在動物消化酶作用下的水解終產(chǎn)物大部分是由2個或3個氨基酸殘基組成的小肽,它們以完整的形式被吸收進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)而被組織利用。這種以肽形式被動物吸收的蛋白質(zhì)占蛋白吸收總量的70%以上,分子量小于1000Dalton的肽的吸收率更高達(dá)90%以上。因此,小肽含量的檢測既可以判定產(chǎn)品中蛋白質(zhì)的消化吸收水平的高低,又可以間接判定產(chǎn)品的質(zhì)量高低。因?yàn)椋绠a(chǎn)品發(fā)酵程度低,則其中的酶活性必然低,蛋白質(zhì)的水解程度必然也低。因此,小肽含量的測定應(yīng)作為發(fā)酵蛋白類產(chǎn)品的一項(xiàng)重要檢測項(xiàng)目。
影響小肽吸收的因素有:(1) 肽鏈的長度:目前的研究認(rèn)為,二肽和三肽能被完整的吸收,但三肽以上的小肽是否能完整吸收還有爭議。Grimble 等報(bào)道,腸道對大于三肽的小肽或寡肽吸收慢于三肽以內(nèi)的小肽。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)水解產(chǎn)物中的寡肽和游離氨基酸(FAA)所占比例較高時(shí),寡肽能誘導(dǎo)腸肽酶的分泌,在腸肽酶的進(jìn)一步作用下水解釋放出FAA,使FAA的濃度提高,從而加劇 FAA吸收的競爭抑制,進(jìn)一步減慢肽的吸收速率。但是,反芻動物瘤胃細(xì)菌對大分子肽的攝取速度比小分子肽和氨基酸攝取速度快,且利用效率更高,雖然細(xì)菌對低分子量的蛋白質(zhì)降解產(chǎn)物(小分子量的肽和氨基酸)發(fā)酵較快,但大分子肽更容易轉(zhuǎn)化為菌體蛋白質(zhì)。(2)肽的氨基酸殘基組成:肽的氨基酸殘基組成是影響肽吸收的另一個重要因素。當(dāng)賴氨酸(Lys)與甘氨酸(Gly)形成二肽時(shí),Lys處于N端比處于C端吸收得更快;而Lys與谷氨酸(Glu)形成二肽時(shí),Lys處于C端時(shí)吸收更為迅速。L型小肽比D型小肽更易被動物吸收,中性小肽比酸、堿性小肽更易被動物吸收。當(dāng)肽是由疏水性且體積較大的底物如Met和Phe構(gòu)成時(shí),載體對肽就有較高的親合力,因而轉(zhuǎn)運(yùn)速度較快;而親水性且?guī)щ姾傻男‰模d體對其親合力較小,所以轉(zhuǎn)運(yùn)速度較慢。樂國偉等研究發(fā)現(xiàn),含疏水性的苯丙氨酸的肽類對肽載體的親和力高,以肽形式吸收可能是苯丙氨酸吸收本身的需要。
Broderick等研究了混合瘤胃微生物對中性肽的代謝,發(fā)現(xiàn)含有3個丙氨酸殘基的肽代謝最快,其次是Leu(Gly)2、Gly(Ala)2,然后是其它中性三肽。二肽代謝速度相似,但Gly-Pro較慢,Ala-Ala代謝較Gly-Pro快;在由丙氨酸殘基構(gòu)成的肽中,三肽代謝速度大于四肽,然后是五肽,二肽最慢。由此可見,肽鏈的氨基酸序列對肽的利用率也有影響。通過研究Lys-Pro肽、Lys-Ala肽、Met-Ala肽的效應(yīng)發(fā)現(xiàn),前兩種肽的代謝速度比后一種肽慢4倍。(3)肽的來源:程茂基等通過體外培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),反芻動物對瘤胃液肽的攝取量和攝取率顯著高于大豆肽(P<0.05)和玉米肽(P<0.05),表明肽來源不同能影響其吸收和利用。
小肽的特殊功能:(1)小肽能促進(jìn)微量元素的吸收。以小肽為主要配體的微量元素螯合物,利用小肽的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制和特點(diǎn),可能以整體的形式被轉(zhuǎn)運(yùn),因而能夠促進(jìn)微量元素的吸收,更有利于微量元素生物學(xué)效價(jià)的提高。大量的研究表明,小肽絡(luò)合物形式的礦物離子更易被機(jī)體吸收,而且小肽螯合物的穩(wěn)定性較氨基酸螯合鹽(AAC)更高。(2)小肽能促進(jìn)動物對其它營養(yǎng)物質(zhì)的消化率。(3)小肽能提高動物的生產(chǎn)性能。王恬等試驗(yàn)表明,添加小肽營養(yǎng)素后,無論是乳蛋白還是乳脂率,試驗(yàn)組均比對照組有所提高,且隨著小肽營養(yǎng)素添加濃度的增加有提高的趨勢,小肽營養(yǎng)素對乳品質(zhì)的提高具有一定的促進(jìn)作用。不同小肽在這些生理功能中的貢獻(xiàn)是不一樣的,因此某些特定種類的小肽的含量決定了小肽飼料的特定功能。
小肽的測定方法:可以采用高效液相色譜法(HPLC),但其運(yùn)行和維持費(fèi)用高,不適合經(jīng)常檢測。本人建議采用三氯乙酸法測定小肽含量。三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白質(zhì)在TCA溶液中沉淀,除去酸不溶蛋白質(zhì),然后用國家標(biāo)準(zhǔn)(GB14771-1993)的方法測定酸溶蛋白含量。用GB/T14965食物中氨基酸的測定方法測出游離氨基酸含量。酸溶蛋白質(zhì)含量減游離氨基酸含量即為大豆肽含量。
指標(biāo)5:酸溶蛋白含量 小肽含量的檢測很重要,但它的檢測耗時(shí)耗力成本高,在不必要時(shí)可以用酸溶蛋白含量(TCA法)的方法代替,這種方法基本可以反映出發(fā)酵蛋白類產(chǎn)品肽的分子量分布。 大豆蛋白質(zhì)在pH4.5附近是等電點(diǎn),會形成沉淀,但小肽保持溶解狀態(tài),分子量越小,溶解性越好。酸溶蛋白的檢測是用三氯乙酸(縮寫為TCA)溶解小肽,混合振蕩,離心,然后取清液,再按凱氏定氮法(GB14771-1993)測定蛋白含量。
指標(biāo)6:必需氨基酸與游離氨基酸含量 這個指標(biāo)現(xiàn)在測定比較方便,各地氨基酸分析儀已相當(dāng)普及。
指標(biāo)7:衛(wèi)生指標(biāo) 所有飼料產(chǎn)品的衛(wèi)生指標(biāo)均屬強(qiáng)制性項(xiàng)目,發(fā)酵蛋白類產(chǎn)品更加不能在衛(wèi)生指標(biāo)上放松。衛(wèi)生檢測項(xiàng)目包括細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌和致病菌。發(fā)酵類產(chǎn)品的過程控制很重要,建議細(xì)菌總數(shù)≤5000個/g;大腸桿菌數(shù)不大于100個/g,沙門氏菌不得檢出。
章亭洲 董艷奎 文章來源:浙江科峰生物