關鍵詞:天蠶素抗菌肽斷奶仔豬 生長性能
天蠶素抗菌肽是生物防御系統(tǒng)產(chǎn)生的一類對抗外源性病原體的肽類物質(zhì),具有抗細菌、真菌、霉菌、病毒、原蟲、癌細胞等多種活性,且不易產(chǎn)生耐藥性,具有廣闊的應用前景[1]。李國棟等[2],經(jīng)過試驗證明部分含有核心標準螺旋結構的序列,對革蘭氏陽性菌和陰性菌的最小抑菌濃度僅是原有cecropin A1抗菌肽的1/100左右.該類抗菌肽有希望進一步開發(fā)為新的抗感染藥物。萬遂如等[3],在獸醫(yī)臨床實踐中證明,抗菌肽對動物疾病有良好的防治效果。并在豬病防治中起到良好的效果。天蠶素抗菌肽最早由瑞典科學家Boman[5]等于1980年用陰溝通桿菌及大腸桿菌誘導惜古比天蠶蛹后發(fā)現(xiàn)的該物質(zhì),研究發(fā)現(xiàn),其不但具有光譜抗菌效果,而且對病毒、真菌、腫瘤等都具有一定的殺傷作用。天蠶素抗菌肽也是迄今研究最徹底,效果最明顯的一類抗菌肽。
本公司經(jīng)過專家學者的潛心研究,肽生素(主要成分天蠶素抗菌肽)是人工設計合成并在枯草芽孢桿菌中成功表達的基因工程產(chǎn)物[4]。體外試驗已證明它能有效的抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙氏菌等有害菌。并且,肽生素制劑無毒副作用,畜禽體內(nèi)無有害殘留,符合綠色環(huán)保食品的發(fā)展方向,迎合國內(nèi)外市場的需要,是發(fā)展綠色飼料添加劑的理想途徑。因此,它成為抗生素替代物的絕佳選擇之一。
2 材料與方法
2.1試驗動物和材料
試驗選用240頭初始體重11.64±2.30 kg的杜×大×長(Duroc × Landrace × Yorkshire)健康斷奶仔豬進行試驗。
2.2試驗地點及試驗時間
試驗地點:湖南長沙某大型一條龍企業(yè)
試驗時間:2010年5月20日至2010年6月17日
2.3試驗設計與日糧
試驗選用的豬按體重相近、遺傳基礎相似的原則,完全隨機分為4個處理,每處理6重復,每重復(圈)10頭豬(公、母各半),實驗設計為:對照組,即抗生素組(基礎日糧 + 200 mg/kg 10%的硫酸抗敵素 + 1000 mg/kg 10%的桿菌肽鋅);試驗一組(基礎日糧 + 250 mg/kg的肽生素);試驗二組(基礎日糧 + 500 mg/kg的肽生素);試驗三組(基礎日糧 + 750 mg/kg的肽生素)。由專人管理與記錄,其它日常管理按正常進行。試驗采用玉米-豆粕型基礎日糧,參照NRC(1998)豬營養(yǎng)需要量標準配制豬試驗基礎日糧及預混料。試驗基礎日糧配方及營養(yǎng)水平如表1所示,各試驗組日糧的4%預混料配方見表2,肽生素由北京中農(nóng)穎泰生物技術有限公司提供。
表1 基礎日糧配方及營養(yǎng)水平
原料(%) |
含 量 |
營養(yǎng)水平 |
含 量 |
玉米 |
33.5 |
CP,% |
19.71 |
膨化玉米 |
26 |
DE,Mcal/kg |
3.39 |
去皮豆粕 |
12 |
Lys, % |
1.37 |
膨化全脂大豆 |
12 |
Met, % |
0.43 |
乳清粉 |
5 |
Thr, % |
0.91 |
大豆?jié)饪s蛋白 |
2.5 |
Trp, % |
0.25 |
魚粉 |
5 |
Ca, % |
0.8 |
4%Premix |
4 |
P, % |
0.6 |
共計 |
100 |
表2、4%預混料配方
仔豬 4%預混料 |
對照組 (g/kg ) |
試驗一組 (g/kg ) |
試驗二組 (g/kg ) |
試驗三組 (g/kg ) |
五水硫酸銅 |
25 |
25 |
25 |
25 |
一水硫酸鋅 |
9.85 |
9.85 |
9.85 |
9.85 |
一水硫酸亞鐵 |
10.80 |
10.80 |
10.80 |
10.80 |
一水硫酸錳 |
2.6 |
2.6 |
2.6 |
2.6 |
碘酸鈣 |
5 |
5 |
5 |
5 |
亞硒酸鈉 |
5 |
5 |
5 |
5 |
50%氯化膽堿 |
15 |
15 |
15 |
15 |
10%硫酸抗敵素 |
5 |
0 |
0 |
0 |
10%桿菌肽鋅 |
25 |
0 |
0 |
0 |
天蠶素 |
0 |
6.25 |
12.5 |
18.75 |
抗氧化劑 |
7.5 |
7.5 |
7.5 |
7.5 |
復合維生素 |
6 |
6 |
6 |
6 |
乳香劑 |
10 |
10 |
10 |
10 |
甜味劑 |
10 |
10 |
10 |
10 |
氧化鋅 (前兩周) |
75 |
75 |
75 |
75 |
磷酸氫鈣17%p,21%Ca |
212.5 |
212.5 |
212.5 |
212.5 |
石粉 |
207.5 |
207.5 |
207.5 |
207.5 |
食鹽 |
75 |
75 |
75 |
75 |
L-LYS,98% |
50 |
50 |
50 |
50 |
DL-Met,98% |
15 |
15 |
15 |
15 |
L-Thr,98% |
37.5 |
37.5 |
37.5 |
37.5 |
麥飯石 |
190.75 |
214.5 |
208.25 |
202 |
共計 |
1000 |
1000 |
1000 |
1000 |
2.4飼養(yǎng)管理
試驗豬飼養(yǎng)在封閉式保育豬舍內(nèi),水泥地面、漏逢地板各半,通風良好。試驗期間每天上午和下午各加料一次,自由采食和飲水,按豬場常規(guī)程序進行消毒、驅(qū)蟲和免疫。
2.5 檢測指標和方法
生長性能指標: 分別于試驗開始和結束時早晨空腹逐只稱個體體重,以重復(圈)為單位記錄耗料量,計算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和飼料轉(zhuǎn)化率(FCR)。腹瀉率:每天觀察仔豬排糞情況,每天上午、傍晚逐頭檢查仔豬肛門,觀察有無糞便污染及紅腫并做好記錄。腹瀉頻率、腹瀉指數(shù)反映了腹瀉的嚴重程度。
2.6 日糧成分分析
試驗日糧水分、粗蛋白、粗纖維、鈣、磷等成分按照AOAC(1990)方法進行測定。
2.7 數(shù)據(jù)分析
實驗數(shù)據(jù)采用SAS統(tǒng)計,進行方差分析,差異顯著則進行Duncan’多重比較。
3 結果
試驗仔豬采食量、日增重和飼料轉(zhuǎn)化率如表3所示。試驗初始的各組體重差異不顯著(P = 0.99),試驗全期平均日增重試驗各組相對于抗生素組均有改善趨勢,但差異均不顯著(P > 0.05)。但從各指標的趨勢上看,添加肽生素的試驗組的表現(xiàn)優(yōu)于抗生素對照組。與抗生素對照組相比,飼料轉(zhuǎn)化率則有明顯的改善。試驗一組、試驗二組和試驗三組在飼料轉(zhuǎn)化率上比抗生素對照組分別降低了18.29%、7.93%和14.02%,均表現(xiàn)出顯著差異,其中尤以試驗一組的效果最好(P < 0.01)。各組之間日采食量之間差異不顯著(P = 0.291)。試驗一組、試驗二組和試驗三組的采食量均比抗生素對照組降低了14.29%、7.69% 和8.79%,數(shù)據(jù)統(tǒng)計無顯著差異。這證明試驗組的仔豬在不影響日增重的情況下減少了采食量,有效降低生產(chǎn)成本。
表3 肽生素肽對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響
處理 |
對照組組 |
試驗一組 |
試驗二組 |
試驗三組 |
SEM |
P-value |
始重IBW, kg |
11.6 |
11.74 |
11.61 |
11.6 |
0.37 |
0.999 |
末重BW, kg |
27.15 |
28.17 |
27.3 |
28.16 |
0.77 |
0.952 |
ADG, kg |
0.56 |
0.59 |
0.56 |
0.59 |
0.02 |
0.807 |
ADFI, kg |
0.91 |
0.78 |
0.84 |
0.83 |
0.02 |
0.291 |
FCR |
1.64A |
1.34C |
1.51B |
1.41C |
0.03 |
<0.001* |
腹瀉率,% |
5.24a |
3.53b |
2.46b |
1.87c |
0.89 |
0.045 |
注:不同大寫字母表示差異極顯著(P < 0.01),不同小寫字母表示差異顯著(P < 0.05)
4討論
4.1 抗菌肽的優(yōu)勢
抗菌肽具有新的抗生素類所需要的很多特性。它可以作為單獨的抗菌劑使用,也可以與傳統(tǒng)的抗生素聯(lián)合作用,作為免疫調(diào)制劑或中和內(nèi)毒素,因此抗菌肽的臨床應用潛力很大。盡管抗菌肽在殺滅一些敏感病菌時效果不如特定的傳統(tǒng)抗生素好,但其優(yōu)勢之一就是能有效的作用于多重耐藥性菌,其殺菌作用十分迅速且具有復雜的細菌胞內(nèi)作用靶點。與傳統(tǒng)的抗生素相比,抗菌肽具有許多臨床應用的優(yōu)點[7]抗菌肽除了能殺滅細菌、真菌、寄生蟲和病毒以外,也對癌細胞有一定殺傷作用,此外抗菌肽在先天及獲得性免疫方面扮演者十分重要的角色:2)傳統(tǒng)抗生素對細胞的作用靶點通常是單一的個體或者族群,而抗菌肽的作用靶點并不如此特定,可能摻在多靶點;3)在耐藥性上,傳統(tǒng)抗生素的抗藥性菌產(chǎn)生頻率大約為10-7-10-10,或者僅僅在亞MIC濃度下幾代產(chǎn)生,而對于抗菌肽來說,耐藥性一般不能直接產(chǎn)生,需要在亞MIC下誘導許多代后才有耐藥性菌產(chǎn)生;4)抗菌肽可以相對獨立的發(fā)揮其抗菌作用,也可以與其他因子協(xié)同作用,顯示出更高的活性,抗菌肽之間,抗菌肽與傳統(tǒng)抗生素具有協(xié)同作用,也與乳鐵蛋白、溶菌酶等發(fā)生作用以提高活性[8]。通過本實驗的結果顯示,天蠶素抗菌肽對畜牧生產(chǎn),飼料加工的發(fā)展都有巨大的的推動作用。
4.2抗菌肽作為飼料添加劑應用的優(yōu)勢
抗菌肽能耐受飼料制粒時的高溫。規(guī)模化發(fā)酵生產(chǎn)抗菌肽時經(jīng)常高溫濃縮工序,可充分殺滅酵母菌體而不導致抗菌肽失活,產(chǎn)品在推廣應用后不會出現(xiàn)工程菌的擴散而導致環(huán)境生態(tài)問題。抗菌肽殺菌機理獨特,病原菌不易對抗菌肽產(chǎn)生耐藥性,以工程菌工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)抗菌肽,可大規(guī)模生產(chǎn),生產(chǎn)周期短,生產(chǎn)成本低且不受季節(jié)和氣候變化等外在環(huán)境的影響。再者,抗菌肽產(chǎn)品具有廣辟抗菌作用,對畜禽具促生長、保健和治療疾病的功能,屬無毒副作用、無殘留、無致細菌耐藥性的一類環(huán)保型制劑。總之抗菌肽具有獨特的而不同于抗生素的作用機理,它廣泛存在多種生物體內(nèi),是生物體對外界病原物侵染而產(chǎn)生的一系列免疫反映的產(chǎn)物,具有較強的光譜抗菌能力。尋找各種動物內(nèi)源性抗菌物質(zhì),以現(xiàn)代生物技術方法工業(yè)化生產(chǎn)這些在抗病原菌上具有動物 “種”專一性或特異性的系列產(chǎn)品,必將成為代替抗生素的新型飼料添加劑。
5.結論
本試驗證明,斷奶仔豬日糧中添加肽生素效果優(yōu)于添加抗生素(10%的硫酸抗敵素200 mg/kg和10%的桿菌肽鋅1000 mg/kg),表現(xiàn)在飼料轉(zhuǎn)化率、促生長和抗腹瀉等方面。其中,添加250 mg/kg的肽生素即可表現(xiàn)出極顯著的優(yōu)越性。同時,肽生素的無藥殘無污染,及其生產(chǎn)成本的實用低廉,在抗生素濫用的今天,無疑為斷奶仔豬的飼養(yǎng)帶來極大便利。