近年來，對蛋白質(zhì)在消化過程中水解生成肽的作用有許多研究，業(yè)已證實蛋白質(zhì)胃腸道消化釋放產(chǎn)生的肽片段，不僅能作為氨基酸的供體，而且也是一類生理調(diào)節(jié)物，可直接作為神經(jīng)遞質(zhì)或間接刺激腸道受體激素或酶的分泌而發(fā)揮作用。在肽的活性作用研究中，對乳蛋白源生物活性肽的研究最為深入。
長期以來，乳蛋白只被認為是幼年哺乳動物氨基酸的主要來源。除了營養(yǎng)作用外，乳蛋白的生理活性，一直未受到足夠的關注，直到1979年人們發(fā)現(xiàn)動物體內(nèi)存在內(nèi)啡肽之后，才開始了外源活性肽這一領域的研究，并迅速成為動物營養(yǎng)學和生理學界新的研究熱點。目前已從乳蛋白酶解產(chǎn)物中檢測到了具有阿片活性、免疫調(diào)節(jié)活性、抗高血壓活性、金屬離子生物轉(zhuǎn)化活性、抗凝血和舒血管活性及抗細菌活性等多種生物活性肽。本文對此作一綜述。
1 阿片肽類
研究最多最早的酪蛋白生物活性肽，是具有阿片活性的阿片肽。一系列命名為β-酪蛋白阿片肽的活性肽，已被分離出來，它們是牛乳β-酪蛋白60～70氨基酸殘基，其中活性最強的是五肽Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly。Ramabadran和Bansinath(1989)總結(jié)了β-酪蛋白阿片肽的藥理學特性，在β-酪蛋白的鎮(zhèn)痛活性和它們μ-受體的結(jié)合力之間，存在著良好的相關性，耐受性、獨立性、鎮(zhèn)靜、睡眠誘導、呼吸抑制、心動過緩及低血壓等癥狀都是阿片肽樣物質(zhì)作用的結(jié)果。
2 免疫刺激肽
免疫刺激肽是從人酪蛋白的胰蛋白酶-糜蛋白酶降解產(chǎn)物中分離得到的(Jollès等，1981，1982;Parker等，1984)，是激活巨噬細胞吞噬功能的肽。從人酪蛋白酶解物中分離得到兩種活性肽，即六肽Val-Gln-Pro-Iso-Pro-Tyr(人β-酪蛋白54～59片段)和三肽Gly-Leu-Phe。這兩種肽在很低的濃度條件下(0.1μM)，就能激活鼠腹膜巨噬細胞對綿羊紅細胞的吞噬作用(Berthou等,1987;Parker等,1984)。靜脈注射這兩種活性肽可保護小鼠免受肺炎菌感染；六肽在0.5 mg/Kg的低濃度下，就有顯著的活性，而三肽在靜脈或皮下注射時，濃度達1 mg/kg時才有活性。
從牛酪蛋白中易分離得到兩種免疫刺激肽，即三肽Leu-Leu-Tyr(牛β-酪蛋白191～193片段)和六肽Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Try(αs1-酪蛋白C-端片段)。
另一個刺激免疫系統(tǒng)的酪蛋白肽，是血管緊張素I轉(zhuǎn)換酶(ACE)的抑制劑。此酶催化血管緊張素II的活性，而鈍化緩激肽。緩激肽能刺激巨噬細胞，以增強淋巴細胞的轉(zhuǎn)移和淋巴因子的釋放(Paegelow和Werner，1986)。ACE的抑制劑對緩激肽有利，因此作為免疫刺激物。
另一種由綿羊初乳的乳清中，分離出的富含脯氨酸的多肽(Prp)，也具有刺激或抑制免疫反應的調(diào)控作用。最近1個九肽片段Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro從Prp的胰凝乳酶解物中分離出來。對應其組分合成的肽和其C-末端的五肽及六肽，顯示出與Prp相似的免疫調(diào)控活性(Janusz等，1987)。
3 酪蛋白磷酸肽
酪蛋白磷酸肽(CPPs)分布于牛乳蛋白的不同區(qū)域，其活性中心是磷酸絲氨酸和谷氨酸簇。經(jīng)酶解所產(chǎn)生CPPs的功能區(qū)結(jié)構(gòu)主要有：αs1-(43～58)2P、αs1-(59～79)5P、αs2-(46～70)4P、β(1～25)4P、β(1～28)4P及β(33～48)1P(Manson等，1979，Berrocal等，1989；Kitts等，1992)。由于CPPs在中性和堿性pH時，通過磷酸絲氨酸與鈣、鋅、鐵等離子結(jié)合，由小腸腸壁細胞吸收后再釋放出來，從而有效地避免了鈣在小腸中性和偏堿性環(huán)境中被沉淀，促進了鈣的吸收。Sato用含有CPPs的食物飼喂大鼠，并在食物中加入同位素標記的鈣，發(fā)現(xiàn)其大腿骨骼中的標記鈣明顯高于對照組。此后通過對大鼠、小鼠、雞、豬的試驗，都證明CPPs具有促進鈣、鐵、鋅吸收的功能(Hanson等，1997；Ashida等，1996)。最近Nagai等(1996a,b)和Mori等(1996)通過體外試驗，進一步證實了CPPs還可以明顯地促進精子進入卵細胞和體外精卵細胞融合。
4 抗血凝肽
Jollès等(1978)發(fā)現(xiàn)牛k-酪蛋白與人纖維蛋白原γ-鏈具有結(jié)構(gòu)的同源性。纖維蛋白原具有雙重功能，它既參與血小板的凝集，又參與纖維蛋白的形成。在血小板凝集過程中，已證實纖維蛋白原分子中有兩個結(jié)合位點：一個是纖維蛋白原γ-鏈C-端片段(His-His-Leu- Gly-Gly-Ala-
Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val)，另1(或2)個是四肽片段［Arg-Gly-Asp-Ser(或-Phe)，纖維蛋白原α-鏈的572～575或95～98片段］。這兩種肽都抑制血小板凝集和纖維蛋白原結(jié)合到ADP活性血小板上(Andrieux等，1989)。四肽(Lys-Arg-Asp-Ser)抑制纖維蛋白原的結(jié)合和血小板的凝集，它是通過一個獨立于蛋白磷酸化的機制，抑制血清緊張素的釋放，并通過另一個機制，抑制纖維蛋白原的結(jié)合，從而進一步抑制血小板凝集。
5 抗高血壓肽
體內(nèi)血壓受腎素-血管緊張素系統(tǒng)調(diào)節(jié)。腎素作用于血管緊張素原，釋放出大量無活性的血管緊張素I，后者在血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的作用下，轉(zhuǎn)變成有活性的血管緊張素II。Maruyama等(1987a,b)發(fā)現(xiàn)4種活性肽具有ACE酶抑制活性和可能提高緩激肽活性的作用。它們分別是牛αs1-酪蛋白23～24、23～27、194～199片段和牛β-酪蛋白177～183片段。體外試驗表明，有抑制活性的肽，位于人β-酪蛋白39～52氨基酸片段和人k-酪蛋白63～65片段，其中，人β-酪蛋白43～52片段(Ser-Phe-Gln-Pro-Gln-Pro-Leu-Iso-Try-Pro)在體內(nèi)活性最強。
6 其他生物活性肽
k-Caseinoylycopeptide幾乎是消化開始第1 h內(nèi)產(chǎn)生唯一的肽。Stan和Chernik(1982)報道其具有抑制大鼠胃酸分泌及胃泌素釋放的功能，還能減弱蛋白水解活性，因為它同時抑制消化道的流動性。
Lahav(1967)報道，1種酪蛋白水解物具有抗菌特性，牛αs1-酪蛋白的1～23片段就有此功能。
Fiat(1989)證明，para-k-酪蛋白的C-末端片段，是胰凝乳蛋白酶的抑制劑。Azuma等(1989)發(fā)現(xiàn)一些人β-酪蛋白特殊片段(1～18位片段，Arg-Glu-Thr- Iso-Glu-Ser-Leu- Ser-Ser-Ser-
Gln-Gln-Ser-Iso-Pro-Gln-Tyr-Lys和105～117片段Gln-Pro-Thr-Iso-Pro- Phe-Phe-Asp-Pro-
Gln-Iso-Pro-Lys)具有刺激BALB/C3T3鼠細胞DNA合成的功能。
作者單位：王崗（內(nèi)蒙古畜牧科學院）
盧德勛（內(nèi)蒙古畜牧科學院）
程茂基（安微農(nóng)業(yè)大學）
長期以來，乳蛋白只被認為是幼年哺乳動物氨基酸的主要來源。除了營養(yǎng)作用外，乳蛋白的生理活性，一直未受到足夠的關注，直到1979年人們發(fā)現(xiàn)動物體內(nèi)存在內(nèi)啡肽之后，才開始了外源活性肽這一領域的研究，并迅速成為動物營養(yǎng)學和生理學界新的研究熱點。目前已從乳蛋白酶解產(chǎn)物中檢測到了具有阿片活性、免疫調(diào)節(jié)活性、抗高血壓活性、金屬離子生物轉(zhuǎn)化活性、抗凝血和舒血管活性及抗細菌活性等多種生物活性肽。本文對此作一綜述。
1 阿片肽類
研究最多最早的酪蛋白生物活性肽，是具有阿片活性的阿片肽。一系列命名為β-酪蛋白阿片肽的活性肽，已被分離出來，它們是牛乳β-酪蛋白60～70氨基酸殘基，其中活性最強的是五肽Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly。Ramabadran和Bansinath(1989)總結(jié)了β-酪蛋白阿片肽的藥理學特性，在β-酪蛋白的鎮(zhèn)痛活性和它們μ-受體的結(jié)合力之間，存在著良好的相關性，耐受性、獨立性、鎮(zhèn)靜、睡眠誘導、呼吸抑制、心動過緩及低血壓等癥狀都是阿片肽樣物質(zhì)作用的結(jié)果。
2 免疫刺激肽
免疫刺激肽是從人酪蛋白的胰蛋白酶-糜蛋白酶降解產(chǎn)物中分離得到的(Jollès等，1981，1982;Parker等，1984)，是激活巨噬細胞吞噬功能的肽。從人酪蛋白酶解物中分離得到兩種活性肽，即六肽Val-Gln-Pro-Iso-Pro-Tyr(人β-酪蛋白54～59片段)和三肽Gly-Leu-Phe。這兩種肽在很低的濃度條件下(0.1μM)，就能激活鼠腹膜巨噬細胞對綿羊紅細胞的吞噬作用(Berthou等,1987;Parker等,1984)。靜脈注射這兩種活性肽可保護小鼠免受肺炎菌感染；六肽在0.5 mg/Kg的低濃度下，就有顯著的活性，而三肽在靜脈或皮下注射時，濃度達1 mg/kg時才有活性。
從牛酪蛋白中易分離得到兩種免疫刺激肽，即三肽Leu-Leu-Tyr(牛β-酪蛋白191～193片段)和六肽Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Try(αs1-酪蛋白C-端片段)。
另一個刺激免疫系統(tǒng)的酪蛋白肽，是血管緊張素I轉(zhuǎn)換酶(ACE)的抑制劑。此酶催化血管緊張素II的活性，而鈍化緩激肽。緩激肽能刺激巨噬細胞，以增強淋巴細胞的轉(zhuǎn)移和淋巴因子的釋放(Paegelow和Werner，1986)。ACE的抑制劑對緩激肽有利，因此作為免疫刺激物。
另一種由綿羊初乳的乳清中，分離出的富含脯氨酸的多肽(Prp)，也具有刺激或抑制免疫反應的調(diào)控作用。最近1個九肽片段Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro從Prp的胰凝乳酶解物中分離出來。對應其組分合成的肽和其C-末端的五肽及六肽，顯示出與Prp相似的免疫調(diào)控活性(Janusz等，1987)。
3 酪蛋白磷酸肽
酪蛋白磷酸肽(CPPs)分布于牛乳蛋白的不同區(qū)域，其活性中心是磷酸絲氨酸和谷氨酸簇。經(jīng)酶解所產(chǎn)生CPPs的功能區(qū)結(jié)構(gòu)主要有：αs1-(43～58)2P、αs1-(59～79)5P、αs2-(46～70)4P、β(1～25)4P、β(1～28)4P及β(33～48)1P(Manson等，1979，Berrocal等，1989；Kitts等，1992)。由于CPPs在中性和堿性pH時，通過磷酸絲氨酸與鈣、鋅、鐵等離子結(jié)合，由小腸腸壁細胞吸收后再釋放出來，從而有效地避免了鈣在小腸中性和偏堿性環(huán)境中被沉淀，促進了鈣的吸收。Sato用含有CPPs的食物飼喂大鼠，并在食物中加入同位素標記的鈣，發(fā)現(xiàn)其大腿骨骼中的標記鈣明顯高于對照組。此后通過對大鼠、小鼠、雞、豬的試驗，都證明CPPs具有促進鈣、鐵、鋅吸收的功能(Hanson等，1997；Ashida等，1996)。最近Nagai等(1996a,b)和Mori等(1996)通過體外試驗，進一步證實了CPPs還可以明顯地促進精子進入卵細胞和體外精卵細胞融合。
4 抗血凝肽
Jollès等(1978)發(fā)現(xiàn)牛k-酪蛋白與人纖維蛋白原γ-鏈具有結(jié)構(gòu)的同源性。纖維蛋白原具有雙重功能，它既參與血小板的凝集，又參與纖維蛋白的形成。在血小板凝集過程中，已證實纖維蛋白原分子中有兩個結(jié)合位點：一個是纖維蛋白原γ-鏈C-端片段(His-His-Leu- Gly-Gly-Ala-
Lys-Gln-Ala-Gly-Asp-Val)，另1(或2)個是四肽片段［Arg-Gly-Asp-Ser(或-Phe)，纖維蛋白原α-鏈的572～575或95～98片段］。這兩種肽都抑制血小板凝集和纖維蛋白原結(jié)合到ADP活性血小板上(Andrieux等，1989)。四肽(Lys-Arg-Asp-Ser)抑制纖維蛋白原的結(jié)合和血小板的凝集，它是通過一個獨立于蛋白磷酸化的機制，抑制血清緊張素的釋放，并通過另一個機制，抑制纖維蛋白原的結(jié)合，從而進一步抑制血小板凝集。
5 抗高血壓肽
體內(nèi)血壓受腎素-血管緊張素系統(tǒng)調(diào)節(jié)。腎素作用于血管緊張素原，釋放出大量無活性的血管緊張素I，后者在血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的作用下，轉(zhuǎn)變成有活性的血管緊張素II。Maruyama等(1987a,b)發(fā)現(xiàn)4種活性肽具有ACE酶抑制活性和可能提高緩激肽活性的作用。它們分別是牛αs1-酪蛋白23～24、23～27、194～199片段和牛β-酪蛋白177～183片段。體外試驗表明，有抑制活性的肽，位于人β-酪蛋白39～52氨基酸片段和人k-酪蛋白63～65片段，其中，人β-酪蛋白43～52片段(Ser-Phe-Gln-Pro-Gln-Pro-Leu-Iso-Try-Pro)在體內(nèi)活性最強。
6 其他生物活性肽
k-Caseinoylycopeptide幾乎是消化開始第1 h內(nèi)產(chǎn)生唯一的肽。Stan和Chernik(1982)報道其具有抑制大鼠胃酸分泌及胃泌素釋放的功能，還能減弱蛋白水解活性，因為它同時抑制消化道的流動性。
Lahav(1967)報道，1種酪蛋白水解物具有抗菌特性，牛αs1-酪蛋白的1～23片段就有此功能。
Fiat(1989)證明，para-k-酪蛋白的C-末端片段，是胰凝乳蛋白酶的抑制劑。Azuma等(1989)發(fā)現(xiàn)一些人β-酪蛋白特殊片段(1～18位片段，Arg-Glu-Thr- Iso-Glu-Ser-Leu- Ser-Ser-Ser-
Gln-Gln-Ser-Iso-Pro-Gln-Tyr-Lys和105～117片段Gln-Pro-Thr-Iso-Pro- Phe-Phe-Asp-Pro-
Gln-Iso-Pro-Lys)具有刺激BALB/C3T3鼠細胞DNA合成的功能。
作者單位：王崗（內(nèi)蒙古畜牧科學院）
盧德勛（內(nèi)蒙古畜牧科學院）
程茂基（安微農(nóng)業(yè)大學）
