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影響β-胡蘿卜素-15,15’-加雙氧酶活性的因素

  作者: 來源: 日期:2003-01-01  

  

   (南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,南京210095)

   摘要:類胡蘿卜素具有抗氧化、提高動物繁殖機(jī)能、提高免疫應(yīng)答、防癌、抗腫瘤、沉積于畜禽體內(nèi)改善畜產(chǎn)品品質(zhì)等作用。影響類胡蘿卜素在體內(nèi)轉(zhuǎn)化的因素有很多,它們或者影響類胡蘿卜素的吸收,進(jìn)而影響類胡蘿卜素的轉(zhuǎn)化,或者直接影響和胡蘿卜素-15,15’-加雙氧酶(β-Carotene

   dioxygenase,βCDIOX)的活性。關(guān)于對類胡蘿卜素吸收的影響,前人已做過很多研究,而對影響類胡蘿卜素轉(zhuǎn)化的研究較少,所以作者主要對影響β-胡蘿卜素的轉(zhuǎn)化的因素進(jìn)行綜述。

   關(guān)鍵詞:β-胡蘿卜素;吸收;β-胡蘿卜素-15,15’-加雙氧酶

   中圖分類號:Q493.6文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:16717236(2003)03-0017-03

   隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,人們對動物產(chǎn)品的要求越來越高,不僅要提高產(chǎn)品數(shù)量,而且要提高產(chǎn)品質(zhì)量,要求無污染、安全、保健等,這就需要把治療性的藥品改為保健性,減少藥品在動物產(chǎn)品內(nèi)的殘留,從而提高產(chǎn)品質(zhì)量。研究結(jié)果表明,β-胡蘿卜素就是這樣一種微營養(yǎng)素(Micronutrient)。

   1 β-胡蘿卜素-15,15’-加雙氧酶

   自然界中的類胡蘿卜素主要以其蛋白復(fù)合物即胡蘿卜素蛋白的形式存在。日糧中類胡蘿卜素在動物胃腸道中消化酶的作用下,從其蛋白復(fù)合物中分離出來,在十二指腸與其它脂類物質(zhì)一起經(jīng)膽汁乳化后形成乳糜微粒,由小腸粘膜上皮細(xì)胞吸收。被吸收的β-胡蘿卜素在小腸內(nèi)一部分經(jīng)加雙氧酶轉(zhuǎn)化為VA,滿足機(jī)體的需要,剩下的部分和乳糜微粒一起轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟,然后再到各個組織。

   1.1 β-CDIOX的存在部位 Christelle

   (1996)首次報道,β-胡蘿卜素-15,15’-加雙氧酶的活性主要存在于大鼠小腸成熟的功能上皮細(xì)胞。酶活性在本分化的腸絨毛細(xì)胞中不存在,中段腸絨毛細(xì)胞中含量很低,在分化的腸絨毛細(xì)胞中含量達(dá)最高水平(陳波,1999)。在小腸深層粘膜沒有發(fā)現(xiàn)β-胡蘿卜素活性,說明β-胡蘿卜素到

   VA的轉(zhuǎn)化活性只局限于上皮細(xì)胞。

   βCDIOX是一種脂溶性的粘膜酶,廣泛分布于腸粘膜、肝臟、腎臟、黃體等,已在脊椎動物,如雞、兔、豬、犬鼠等的小腸粘膜中發(fā)現(xiàn),魚、龜?shù)哪c道中也含有此酶,但肉食性的豬和貂缺乏。該酶已從大鼠、豬和兔的小腸粘膜得到部分的提純,由于它在純化過程中不穩(wěn)定,所以尚未得到純品。各種動物產(chǎn)CDIOX的催化活性不同,這可能與底物β-胡蘿卜素βC的β紫羅酮環(huán)及多烯鏈所處的腸道內(nèi)環(huán)境不同有關(guān)。

   1.2 βCDIOX的性質(zhì) βCDIOX的最適pH是7.5~8.5,Km值為 2~10μm。 Goodman(1996)

   報道,來自大鼠腸粘膜和肝臟的溶解性酶制品,可使井胡蘿卜素分解斷裂為VA。肝內(nèi)這種酶活性較低,以器官計(jì),腸為肝的2倍,以重量計(jì)則為4~7倍。許多研究結(jié)果表明,分裂反應(yīng)經(jīng)由雙加氧酶作用機(jī)及產(chǎn)生,分子氧與βC中央雙鍵的2個碳作用,發(fā)生斷裂而生成兩分子視黃醛。βCDIOX的活性除需要底物βC和氧外,還需要適宜的Mg2+、Fe2+、含有巰基物質(zhì)如谷脫甘肽、硫酸(DTT)等,、非特異性的表面活性劑,如膽鹽和卵磷脂,以及VE、煙酸膠、NAD等,都能促進(jìn)該酶的活性。加雙氧酶可被巰基結(jié)合的試劑和亞鐵離子阻斷。小腸酶的最大活性是能產(chǎn)生足夠的VA滿足動物對VA的營養(yǎng)需要,但不會產(chǎn)生VA過多癥。

   在體外添加合適的去污劑能有效地促進(jìn)β-胡蘿卜素到視黃醛的轉(zhuǎn)化。如果缺少膽酸鹽或合成的去污劑,則該酶無活性,添加合適的去污劑化合物和脂類如磷脂或非磷脂能獲得最大活性,促進(jìn)作用與添加化合物的電核無關(guān)。

   1. 3

   βCDIOX的作用方式β-胡蘿卜素的斷裂方式有2種:中央斷裂和非中央斷裂。中央斷裂是一分子β胡蘿卜素和一分子的氧在β胡蘿卜素-15,15’-加雙氧酶的作用下,從-15,15’-雙鍵處斷裂,形成兩分子的視黃醛,視黃醛再被還原成視黃醇活氧化成視黃酸。動物肝和腎中也有少量的加雙氧酶。非中央斷裂生成一分子長鏈和一分子短鏈的β-阿樸胡蘿卜素醛。

   非中央斷裂發(fā)生在植物、微小的有機(jī)體中,也可能發(fā)生在哺乳動物體內(nèi)。其實(shí)非中央斷裂產(chǎn)生的卜阿撲胡蘿卜素醛最終會很少,因?yàn)槠浔恢行臄嗔衙皋D(zhuǎn)化為VA。而且已有報道說,非中央斷裂產(chǎn)生的β-阿樸胡蘿卜素其實(shí)也是βC轉(zhuǎn)化為VA的另一個途徑。

   2 影響βCDIOX的因素

   2.1脂肪和脂肪酸日糧中脂肪的含量會影響β胡蘿卜素的吸收,主要是因?yàn)棣潞}卜素是脂溶性的,脂肪對β胡蘿卜素起運(yùn)輸作用。食物中的脂肪經(jīng)胰酶和膽鹽作用形成膠粒,β胡蘿卜素溶于其中而被一同吸收。

   脂肪可刺激膽汁分泌乳化脂肪促進(jìn)類胡蘿卜素的吸收。腸道內(nèi)脂肪酸促進(jìn)β胡蘿卜素吸收,其中單不飽和長鏈脂肪酸的作用最大,典型的代表是油酸。周光宏(1994)報道,牛體脂肪中油酸與β-胡蘿卜素的含量間存在正相關(guān)。雖然多不飽和脂肪酸對β-胡蘿卜素的吸收也有促進(jìn)作用,但比油酸弱,因?yàn)樵谀c粘膜細(xì)胞內(nèi)存在一種脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP),是脂肪酸和β-胡蘿卜素由細(xì)胞膜通過細(xì)胞內(nèi)水環(huán)境轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞器的工具,而不飽和脂肪酸比β-胡蘿卜素更易與脂肪酸結(jié)合蛋白結(jié)合,這種競爭性降低β-胡蘿卜素的吸收。

   2.2膽酸鹽膽汁乳化脂肪,使脂肪變成小的膠粒,易于在小腸的液態(tài)環(huán)境中吸收,從而促進(jìn)溶解在脂肪中的類胡蘿卜素的吸收。Olson(1964)報道,當(dāng)β-胡蘿卜素溶于膠體溶液,在無膽汁存在時,β-胡蘿卜素既不能吸收也不能發(fā)生斷裂生成酯,說明膽汁不僅起

 
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