摘要：本試驗使用不同濃度的飼用纖維素復(fù)合酶在不同的時間處理小麥，研究酶解率的變化。研究表明:小麥酶解率隨著飼用纖維素復(fù)合酶的添加量增大,有不同程度的提高；小麥酶解率隨著酶解時間的延長，酶解率有所提高；飼用纖維素復(fù)合酶處理小麥的理想濃度為0.12‰。

　　關(guān)鍵詞：飼用纖維素復(fù)合酶 小麥 酶解率

　　中圖分類號： 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： D

　　The effcted on wheat grain degration ration with different

　　concentration complex fibre enzymes

　　Zhangbaocheng

　　( Agriculture and Husbandry college of Qinghai University,Xinning 810003)

　　Abstract: This paper studied on the different concentration complex fibre enzymes effected on wheat grain.The result showed with the concentration complex fibre enzymes improved and time prolonging wheat grain degration had improved to some degree. 0.12‰ complex fibre enzymes effect was perfect on wheat grain degration.

　　Key words: complex fibre enzymes wheat grain degration ration

　　小麥?zhǔn)乔嗖馗咴倚蟮漠?dāng)?shù)刂饕芰匡暳现弧５切←溨泻休^多的NSP（非淀粉多糖），如阿拉伯木聚糖和β?葡聚糖，因而影響畜禽的消化利用。飼用纖維素復(fù)合酶的成分是纖維素酶、β?葡聚糖酶和木聚糖酶，可以分解小麥中的NSP（非淀粉多糖），改善小麥的品質(zhì)。因此，該試驗研究不同濃度的飼用纖維素復(fù)合酶對小麥酶解率的影響，為飼用纖維素復(fù)合酶的應(yīng)用和推廣提供科學(xué)依據(jù)。

　　1 試驗材料與方法

　　1.1 試驗材料

　　1.1.1春小麥 春小麥來源于牧院飼料教研室，風(fēng)干過40目篩，放干燥處儲存?zhèn)溆谩?p>　　1.1.2酶制劑 飼用纖維素復(fù)合酶的成分是纖維素酶、β?葡聚糖酶和木聚糖酶,由西寧城北青牧復(fù)合預(yù)混料廠提供。

　　1.2處理方法 準(zhǔn)確稱取一定質(zhì)量的小麥為底物,酶制劑的添加按重量比為0.12‰、0.16‰、0.2‰, 加入pH 5.0的醋酸-醋酸鈉緩沖液。溫度40℃,分別保溫處理6h、12h、24h、36h、48h。每個處理重復(fù)3次。

　　1.3 試劑的配置

　　1.3.1緩沖溶液的配置 稱取7.40gCH3COONa.3H2O用蒸餾水溶解在1000ml燒杯中，并吸取2.65ml冰醋酸溶解在1000ml，用醋酸調(diào)節(jié)用CH3COONa溶液的pH。用精密pH計測定緩沖溶液的pH，配置成pH 5.0的緩沖液。

　　1.3.2 DNS試劑的配置 準(zhǔn)確稱取91.0g酒石酸鉀鈉溶解于500ml水中，依次加入3,5-二硝基水楊酸3.15g，氫氧化鈉20.0g不斷攪拌，并小心加熱，溶液最高溫度不超過45℃,再加入2.5g苯酚和2.5g亞硫酸鈉攪拌均勻,冷卻至室溫后定容至1000ml，貯于棕色瓶中于冰箱中保存兩周后備用。

　　1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制做

　　準(zhǔn)確稱取100毫克分析純的無水葡萄糖(預(yù)先在105℃干燥至恒重),用少量蒸餾水溶解后,定量轉(zhuǎn)移到100毫升容量瓶中,再定容到刻度、搖勻、濃度為1毫克/毫升。

　　取9支25毫升的刻度試管, 分別加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6ml的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液(1mg／m1)，然后加入1.5ml DNS，置沸水中浴熱5 min，取出后流水冷卻，再向每管加入蒸餾水定容到25 ml、搖勻，于520nm波長處測OD值。每管測定3次，取平均值。以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)作葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。

　　1.5 還原糖的測定及步驟

　　1.5.1還原糖的提取 準(zhǔn)確稱取1.00克小麥底物,放在100毫升錐形瓶然后加入60毫升pH 5.0的緩沖液,于40℃恒溫水浴6 h 、12 h 、24 h 、36 h 和48h,過濾,將濾液收集在100毫升容量瓶中,再定容至100毫升。

　　1.5.2 還原糖的測定 取7支25毫升的刻度試管,分別加入樣品液0ml、1ml；然后分別加入蒸餾水2 ml、1 ml，每管分別加入1.5 ml DNS試劑后，其余操作均與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線相同。測定后，取樣品的平均OD520值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的還原糖含量。

　　1.5.3酶解的率計算[2] 酶解率%=還原糖總量×100/底物的絕干重；

　　2結(jié)果與分析

　　表1不同濃度飼用纖維素復(fù)合酶對小麥酶解率的影響

　　處理

　　時間

　　小麥酶解率(酶濃度)

　　0‰

　　0.12‰

　　0.16‰

　　0.2‰

　　6h

　　3.68±0.03aA

　　4.72±0.029bB

　　5.03±0.05cC

　　5.36±0.12cC

　　12h

　　4.06±0.14 aA

　　5.06±0.02 bB

　　5.23±0.03 bB

　　5.46±0.12 bB

　　24h

　　5.91±0.12aA

　　6.93±0.14bA

　　7.28±0.16 cC

　　8.01±0.92 cC

　　36h

　　6.56±0.05aA

　　7.08±0.23bB

　　7.56±0.07cC

　　8.12±0.01dD

　　48h

　　7.08±0.18aA

　　11.02±0.27 bB

　　11.09±0.19bB

　　11.32±0.16 bB

　　注：表中同行數(shù)字肩注有相同小寫字母表示差異不顯著(P>0.05)，有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)；相鄰大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。

　　從表1可知,不同濃度飼用纖維素復(fù)合酶在6h處理時，飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.12‰時酶解率為4.72%, 比對照組提高了1.04個百分點,差異極顯著 (P<0.01); 飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.16‰時，酶解率為5.03%, 比對照組提高了1.35個百分點,差異極顯著 (P<0.01)。

　　在12h處理組中：飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.12‰時, 酶解率為5.06%, 比對照組提高了1.00個百分點,差異極顯著(P<0.01)。

　　在24h處理組中：飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.12‰時, 酶解率為6.93%, 比對照組提高了1.02個百分點,差異顯著(P<0.05)；飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.16‰組, 酶解率為7.28%, 比對照組提高了1.37個百分點,差異極顯著(P<0.01)。

　　在36h處理組中：飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.12‰時, 酶解率為7.08%, 比對照組提高了0.52個百分點,差異極顯著(P<0.01); 飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.16‰時, 酶解率為7.56%, 比對照組提高了1個百分點,差異極顯著(P<0.01);飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0. 2‰時, 酶解率為8.12%, 比對照組提高了1.56個百分點,差異極顯著(P<0.01)。

　　在48h處理組中：飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.12‰時, 酶解率為11.02%, 比對照組提高了3.94個百分點,差異極顯著(P<0.01)。

　　3 結(jié)論

　　（1）小麥酶解率隨著飼用纖維素復(fù)合酶的添加劑量的增大,酶解率有不同程度的提高。宋桂經(jīng)等[3]認(rèn)為，酶化處理秸稈飼料后可溶性還原糖比對照組提高1.8-2.0倍,纖維素降低7%-8%。這充分說明，酶解率的提高主要是飼用纖維素復(fù)合酶分解了小麥中含有較多的阿拉伯木聚糖和β?葡聚糖等所產(chǎn)生的還原糖所致。

　　（2）小麥酶解率隨著酶解時間的延長，酶解率有所提高。

　　（3）小麥酶解率在48 h處理組中，不同水平的飼用纖維素復(fù)合酶添加量差異不顯著(P>0.05)；添加飼用纖維素復(fù)合酶后，酶解率比較接近。本試驗使用的酶是飼用纖維素復(fù)合酶，酶制劑最大限度的降解了小麥中的木聚糖、β-葡聚糖和粗纖維素成分。在48h處理時不同濃度的酶酶解率比較接近。因此，在使用飼用纖維素復(fù)合酶處理小麥48h時，比較合理的飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.12‰。

　　4討論

　　由試驗可知，濃度為0.12‰、0.16‰、0.2‰的酶處理小麥6h、12h時，差異不顯著，有可能是添加酶濃度為0.16‰、0.2‰時，酶彼此相互競爭底物小麥中的阿拉伯木聚糖、β?葡聚糖和粗纖維素成分，影響了小麥酶解率。因此高劑量的酶作用效果未表現(xiàn)出來。酶處理24h、36h后，溶液中溶質(zhì)的濃度較大，酶彼此相互競爭底物之間的干擾較弱。因此，高劑量的酶作用效果表現(xiàn)出來。

　　由試驗可知，濃度為0.12‰、0.16‰、0.2‰的酶處理小麥48h后，酶解率比較接近，差異不顯著。由于此試驗的飼用纖維素復(fù)合酶的成分是纖維素酶、β?葡聚糖酶和木聚糖酶，酶只能夠降解小麥中的阿拉伯木聚糖、β?葡聚糖和粗纖維素成分。這說明飼用纖維素復(fù)合酶完全降解了小麥中的阿拉伯木聚糖、β?葡聚糖和粗纖維成分。因此，在試驗中并不是飼用纖維素復(fù)合酶的濃度越高，作用效果越好。降解春小麥的理想飼用纖維素復(fù)合酶濃度為0.12‰。

　　從上可知，在飼用纖維素復(fù)合酶處理飼料時，由于原料組成上的差異高劑量的酶作用效果未必就好。