摘要　試驗選用兩窩14日齡杜×(大×長)三元雜交商品豬，每窩10頭，每窩仔豬按體重平均分為斷奶處理組和哺乳對照組，每組兩個重復(fù)(欄)，每欄5頭豬。分別于斷奶后第0(14日齡)、2、4、6、9天從每欄內(nèi)隨機(jī)抽取一頭豬，屠宰后取胰腺和空腸內(nèi)容物樣品，測定胰蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶活性。試驗結(jié)果表明，斷奶應(yīng)激不同程度地降低了仔豬胰腺和空腸內(nèi)容物中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。隨著斷奶后時間的推移和采食量的增加，斷奶仔豬空腸內(nèi)容物中胰蛋白酶、脂肪酶以及胰腺中淀粉酶活性得以恢復(fù)并呈上升趨勢。
    關(guān)鍵詞：超早期斷奶應(yīng)激　仔豬　胰蛋白酶　淀粉酶　脂肪酶

       為減少仔豬對疾病的感染率，提高母豬生產(chǎn)力、豬的出欄率和欄舍利用率，14日齡超早期斷奶技術(shù)已在國外得到應(yīng)用。仔豬斷奶后從吮食母乳轉(zhuǎn)向采食理化性狀、氣味味道及營養(yǎng)價值不同的干飼料，由于其消化道酶系統(tǒng)未發(fā)育完全，不能適應(yīng)這種食物的劇變產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，引起胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等消化酶活性的降低(Lindemann,1986;Owsley,1986;Cera,1990;Jensen,1997)，導(dǎo)致消化功能紊亂并出現(xiàn)腹瀉。本試驗旨在研究14日齡超早期斷奶應(yīng)激對仔豬幾種消化酶活性的影響，為超早期斷奶仔豬飼料的配制提供理論依據(jù)。

    1　材料與方法
    1.1　試驗動物與分組　試驗選用兩窩14日齡杜×(大×長)三元雜交商品豬，每窩10頭，并將每窩仔豬按體重平均分為哺乳對照組和斷奶處理組，每組兩個重復(fù)(欄)，每欄5頭豬。
    1.2　試驗飼糧　試駢飼糧配制參考國外研究報道及NRC(1988)營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，飼糧組成為：玉米34.68%、豆粕27.93%、乳清粉15%、葡萄糖10%、魚粉5%、植物油4.43%、磷酸氫鈣1.04%、石粉0.47%、賴氨酸0.27%、蛋氨酸0.18%、添加劑1.00%。飼糧營養(yǎng)指標(biāo)為：消化能15MJ/kg、粗蛋白質(zhì)20%、賴氨酸1.40%、蛋氨酸0.48%、蘇氨酸0.89%、色氨酸0.28%、鈣0.85%、有效磷0.50%。
    1.3　譯驗方法
    1.3.1　材料制備：分別于斷奶后第0(14日齡)、2、4、6、9天早8：00從每欄內(nèi)隨機(jī)抽取一頭豬，集中屠宰后立即結(jié)扎幽門瓣、回盲瓣、胰腺管，摘取胰臟，剝除脂肪組織和結(jié)締組織；取空腸全段，收雂內(nèi)容物并用玻璃棒攪拌均勻。全部樣品置于-80℃冷凍保存。測定時稱取解凍待測樣品于研缽內(nèi)，加10倍體積0.001mol/L鹽酸及少許石英砂，研磨吊置4℃冰箱1小時提取酶液，再用beckman AvantiTM30高速離心機(jī)于4℃條件下離心30分鐘，離心力為18400r/min，取上清液用來測定胰蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶活性。
    1.3.2　消化酶活性測定：胰蛋白酶活性測定依據(jù)施韋爾特-竹中(Schwert & Takenaka)法，使用儀器為日本島津UV-2201分光光度計。淀粉酶及脂肪酶的測定使用美國Johnson & Jonhson公司提供的Vitro 700干化學(xué)全自動分析儀，測定方法為干片法。

    2　結(jié)果與討論
    2.1　胰蛋白酶活性
    2.1.1　胰腺中胰蛋白酶活性(見圖1)：與哺乳仔豬相比，在斷奶后9天內(nèi)斷奶仔豬胰腺中胰蛋白酶活性降低，其中在斷奶后第2及第9天分別降低79%(P<0.01)和39%(P<0.05)，分別相當(dāng)于斷奶前本身(14日齡)的21%和61%，可見斷奶應(yīng)激對胰酶的合成有一定的影響，胰腺中胰蛋白酶活性在斷奶后9天內(nèi)不能完全恢復(fù)。此結(jié)果與其它學(xué)者有關(guān)斷奶應(yīng)激使胰腺中胰蛋白酶活性降低的報道相一致(Corring,1978;Lindemann,1986;Owsley,1986;Jensen,1997)。據(jù)Hartman(1961)報道，斷奶仔豬需14天才能恢復(fù)與哺乳仔豬相同水平的酶活。推測可能是斷奶應(yīng)激對胰腺組織內(nèi)胰蛋白酶合成的影響大于對其分泌的影響。由此可見，胰腺中胰蛋白酶活性與斷奶應(yīng)激密切相關(guān)。

    2.1.2　空腸內(nèi)容物中胰蛋白酶活性(見圖1)：在斷奶后第2天，斷奶仔豬空腸內(nèi)容物胰蛋白酶活怣降低，由哺乳組的26.38U/mg蛋白下降為斷奶組的13.25U/mg蛋白，下降了50%(P<0.05)，相當(dāng)于斷奶前本身的65%。此后即回升，隨著采食量逐漸增加，至斷奶后第4天，斷奶仔豬空腸內(nèi)容物中胰蛋白酶活性即達(dá)到哺乳仔豬水平，也恢復(fù)到斷奶前本身的水平。此后則高于哺乳仔豬和斷奶前本身的水平，至斷奶后第9天，其活性則由哺乳組的18.68U/mg升高為斷奶組的59.48U/mg蛋白，升高了218%(P<0.05)，此時斷奶仔豬空腸內(nèi)容物胰蛋白酶活性也升至斷奶前本身的290%。斷奶仔豬空腸內(nèi)容物胰蛋白酶活性隨采食量的增加而逐漸達(dá)到并超過哺乳仔豬水平的現(xiàn)象表明，采食量的增加可刺激仔豬空腸內(nèi)容物胰蛋白酶的合成。
    2.2　淀粉酶活性(見圖2)：在斷奶后9天內(nèi)，斷奶仔豬胰腺和空腸內(nèi)容物淀粉酶活性均低于哺乳仔豬，這與Cera(1990)、Hartman(1961)、Owsley(1986)等報道的仔豬斷奶后淀粉酶活性降低的結(jié)果相同。隨斷奶后時間的推移，哺乳仔豬與斷奶仔豬胰腺淀粉酶活性呈遞增趨勢，但斷奶組低于哺乳組，其中，在斷奶后第6和第9天分別降低50.8%和33.8%。兩組仔豬空腸內(nèi)容物淀粉酶活性在斷奶后4天內(nèi)均快速上升，且較為接近，表明斷奶應(yīng)激對淀粉酶活性的影響不大，斷奶仔豬淀粉酶活性的增加可能是為了滿足消化飼糧中淀粉的需要(Jensen,1997)。但在斷奶后第6和第9天出現(xiàn)斷奶仔豬空腸內(nèi)容物淀粉酶活性大幅度下降現(xiàn)象，分別較哺乳仔豬下降71.8%(P<0.05)和68.5%(P<0.05)，可能是此時仔豬采食量增加，淀粉酶被增加的腸道內(nèi)容物稀釋所致。

    2.3　脂肪酶活性　本試驗中在斷奶后9天內(nèi)，斷奶仔豬胰腺和空腸內(nèi)容物脂肪酶活性均低于哺乳仔豬(圖3)，Lindemann(1986)、Cera(1990)也有斷奶應(yīng)激使脂肪酶活性降低的報道。本試驗中隨時間的推移，斷奶仔豬胰腺脂肪酶活性不斷下降，在斷奶后第4天和第9天，分別較哺乳仔豬降低61%和57%(P<0.05)。斷奶仔豬空腸內(nèi)容物脂肪酶活性變化平穩(wěn)，從第6天起開始升高，至第9天比斷奶前增長了44%；哺乳仔豬空腸內(nèi)容物脂肪酶活性一直在快速增長，至第9天比最初增長了20倍，兩組仔豬空腸內(nèi)容物脂肪酶活性差異在斷奶后第4和第6天達(dá)顯著水平，斷奶組較哺乳組分別降低86%和65%(P<0.05)。脂肪的消化主要依賴于胰腺脂肪酶(Borgstrom,1993)和胃腸道脂肪酶(Newport and Howarth,1985),而試驗中脂肪酶活性的降低，一方面是仔豬斷奶日糧中脂肪含量低于母乳中脂肪含量，即脂肪酶活性的降低可能是其底物濃度降低所致。另外，由于胰腺內(nèi)脂肪酶的分泌在斷奶前較慢，而在斷奶后很快增加(Pierzynowski et al.,1993)，這樣本試驗中脂肪酶活性的降低也可能是脂肪酶分泌速率大于合成速率，從而使脂肪酶耗竭所致(Efird et al.,1982)。