摘 要 試驗(yàn)采用3×2試驗(yàn)設(shè)計(jì)。將7日齡360只AA肉仔雞按稱重均勻分成6組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ),每組60只雞,每5只雞一籠,飼養(yǎng)在不銹鋼籠中。A處理為日糧蛋氨酸添加水平0% (A1)、0.2% (A2)、0.8%(A3),B處理為孢子化柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)卵囊(B1——接種3×104個(gè)孢子化柔嫩艾美耳球蟲卵囊,B0——未接種)。其中Ⅰ、Ⅱ組飼喂試糧1(A1),Ⅲ、Ⅳ組飼喂試糧2(A2),Ⅴ、Ⅵ飼喂試糧3(A3)。14日齡時(shí),Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ組雞,每只分別接種3×104個(gè)孢子化柔嫩艾美耳球蟲卵囊,22日齡試驗(yàn)結(jié)束。結(jié)果表明:①日糧中添加蛋氨酸與未添加蛋氨酸比,可以顯著提高日增重(P<0.05),且日糧中添加0.8%的蛋氨酸與0.2%的相比,對試驗(yàn)期間肉仔雞的生產(chǎn)性能的影響差異不顯著 (P>0.05);②日糧蛋氨酸水平對肉仔雞血糖影響不大;③日糧蛋氨酸水平可以顯著影響感染球蟲的肉仔雞的病變記分(P<0.05),即日糧中添加0.8%的蛋氨酸,顯著優(yōu)于0.2%組、0%組(P<0.05)。因此,在球蟲感染的情況下,高營養(yǎng)水平對其是有效的。
S816.32
日糧成分可影響寄生蟲的發(fā)育與致病性。在養(yǎng)禽業(yè)中通過在日糧中添加某些營養(yǎng)物質(zhì)或改變?nèi)占Z組分來提高雞體的免疫力,達(dá)到減輕或控制球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失,從而減少因添加預(yù)防藥物帶來的抗藥性問題及藥物殘留問題。
疾病和免疫機(jī)能抑制會(huì)影響動(dòng)物生長和飼料轉(zhuǎn)化率,消除這種不利影響通常可以改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能。國內(nèi)外新近的科學(xué)研究表明,氨基酸營養(yǎng)對提高動(dòng)物的免疫機(jī)能具有積極作用,特定氨基酸可以抵抗或消除疾病和免疫機(jī)能抑制的產(chǎn)生[4]。蛋氨酸是雞的第一限制性氨基酸,它在動(dòng)物體內(nèi)能合成機(jī)體蛋白,并能很快轉(zhuǎn)換為胱氨酸,滿足動(dòng)物需要,為機(jī)體提供活性甲基。Swick等(1990)報(bào)道了在熱應(yīng)激情況下,蛋氨酸的添加可提高家禽的生產(chǎn)性能。美國佐治亞州大學(xué)(1992)研究表明,蛋氨酸添加對家禽有防病保健的作用[5]。Hall(1986)研究發(fā)現(xiàn),主要免疫細(xì)胞——淋巴細(xì)胞內(nèi)蛋氨酸代謝與骨骼肌不同,當(dāng)?shù)鞍彼嵩诹馨图?xì)胞轉(zhuǎn)甲基過程中消耗后,淋巴細(xì)胞就不能再合成蛋氨酸,需由飼料補(bǔ)充。Tsiagbe(1987)報(bào)道,喂蛋氨酸不足的日糧,會(huì)降低雛雞對綿羊紅細(xì)胞的反應(yīng),并延緩它對植物凝血素的過敏反應(yīng)[6]。據(jù)資料報(bào)道,日糧中含硫氨基酸的含量和堆型艾美耳球蟲的寄生,對雞的生長和飼料轉(zhuǎn)化指數(shù)有著相互影響。當(dāng)日糧中的含硫氨基酸的量為滿足最佳生長的50%時(shí),會(huì)顯著提高感染球蟲后試驗(yàn)雞的日增重。賴氨酸和胱氨酸也有此現(xiàn)象。缺乏含硫氨基酸(蛋氨酸+胱氨酸,含量為0.24%)的日糧可以減少感染E. acervulina發(fā)病率和死亡率(Willis等,1981)。而日糧蛋氨酸水平與雞感染柔嫩艾美耳球蟲(E. tenella)的研究非常少。本試驗(yàn)通過改變?nèi)占Z蛋氨酸水平,來研究蛋氨酸水平對感染柔嫩艾美耳球蟲(E. tenella)的肉仔雞的影響。
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,用日糧營養(yǎng)水平控制雞球蟲病的方法,除蛋白質(zhì)外,幾乎都是采用高于飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的方法。Tsiagbe(1987)報(bào)道,最佳免疫反應(yīng)所需的日糧蛋氨酸水平遠(yuǎn)高于最大生產(chǎn)性能時(shí)所需的蛋氨酸水平。日糧中添加過多的蛋氨酸水平對肉仔雞生長帶來的影響有一個(gè)范圍。Harte和Baker(1978)、Han和Bker(1993)報(bào)道,日糧中蛋氨酸過量添加到1.0%時(shí)對體增重和飼料轉(zhuǎn)化率沒有不良影響,大于1.0%體增重受到抑制[7]。因此,根據(jù)NRC(1994)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)合我國養(yǎng)雞業(yè)的實(shí)際,本試驗(yàn)特采用在日糧中添加0%、0.2%、0.8% 3個(gè)蛋氨酸水平來研究人工感染柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)對肉仔雞的影響。
1 材料和方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
試驗(yàn)雞為1日齡商品AA肉仔雞,購自上海大江食品股份公司。
1.1.2 柔嫩艾美耳球蟲(E. tenella)蟲種
由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海家畜寄生蟲病研究所第二研究室提供。
1.1.3 試驗(yàn)日糧組成
試驗(yàn)日糧根據(jù)NRC(1994)肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合我國養(yǎng)雞實(shí)際自行配制(見表1)。3組試驗(yàn)日糧(試糧1、試糧2、試糧3)中分別添加0%、0.2%、0.8%的蛋氨酸。飼料中不含任何抗球蟲藥物和抗菌藥。

1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案
設(shè)計(jì)方案如表2所示。

1.2.2 試驗(yàn)期
預(yù)試期7d,試驗(yàn)期14d,肉仔雞22日齡結(jié)束試驗(yàn)。
1.2.3 飼養(yǎng)管理
雞舍在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海家畜寄生蟲病研究所SPF試驗(yàn)動(dòng)物房內(nèi)。在第一周,試驗(yàn)肉仔雞即開始籠養(yǎng),每籠10只。7日齡時(shí),將試驗(yàn)雞個(gè)體稱重,并戴腳號。按合適的體重分為6組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ),每組60只雞,每5只雞一籠,飼養(yǎng)在不銹鋼籠中。14日齡時(shí),Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ 3組的雞,每只接種3×104個(gè)孢子化的柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)卵囊。試驗(yàn)期間,雞舍溫度由37℃逐漸降至27℃。雞舍采取持續(xù)光照,雞自由采食和飲水。其余飼養(yǎng)管理按AA肉仔雞的管理方法執(zhí)行。
1.3 檢測項(xiàng)目
1.3.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)測定
1.3.1.1 體重
每次稱重前,晚8:00停食,第二天早上8:00逐只空腹稱重。
1.3.1.2 采食量
與稱重同時(shí)進(jìn)行,以每個(gè)重復(fù)為一個(gè)計(jì)量單位記錄采食量。
1.3.1.3 平均日增重、平均日采食量、飼料轉(zhuǎn)化率
平均日增重[g/(只·d)]=(末重-始重)/稱重間隔天數(shù)
平均日采食量[g/(只·d)]=階段耗料量/(稱重間隔天數(shù)×雞數(shù))
飼料轉(zhuǎn)化率=平均日采食量/同期平均日增重
1.3.2 血糖
用快速測定法。每次測定血糖前,禁食12h。用羅氏公司的樂康全2血糖檢測儀(GLUCOTRENDR2)測定血糖值。
1.3.3 病變記分、血便記分、糞便卵囊計(jì)數(shù)
接種后第5d血便記分,采第8d糞便,用麥克馬斯特法作克糞便卵囊記數(shù)(OPG)。22日齡將試驗(yàn)雞稱重后,全部剖殺。用Johnsont和Reid(1970)方法作盲腸病變記分[8]。
1.4 資料分析
本試驗(yàn)數(shù)據(jù),按兩因素有重復(fù)觀察值的交叉分組資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。差異顯著性用q檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較。
2 結(jié)果與討論
2.1 不同處理對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響
雞的生產(chǎn)性能包括日采食(g/只)、日增重(g/只)、飼料轉(zhuǎn)化率和存活率(%),各項(xiàng)指標(biāo)如表3所示。

由表3,經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,各處理組間的日采食量均無顯著性差異(P>0.05),即蛋氨酸水平和E.tenella對雞的日采食無顯著性影響。但未感染E.tenella的雞日采食量均略高于感染E.tenella時(shí)的采食量,日糧蛋氨酸水平為0.2%的日采食量分別比蛋氨酸水平為0%和0.8%略高4.84%和3.14%;感染E.tenella時(shí),日糧蛋氨酸水平為0.2%的試驗(yàn)雞日采食量分別比蛋氨酸水平為0%和0.8%的低2.87%和3.60%;日糧蛋氨酸水平為 0%、0.2%和0.8%時(shí),感染E.tenella的雞的日采食量依次比未感染的雞低2.56%、9.72%和3.41%。由此可知,感染E.tenella的雞采食高于或低于NRC推薦的蛋氨酸添加水平的日糧,對肉仔雞的日采食量略有影響,但差異不顯著(P>0.05)。
各處理組間的日增重經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析差異顯著(P<0.05)。蛋氨酸水平和E.tenella對雞的日增重的影響差異顯著(P<0.05)。蛋氨酸水平為0.2%和0.8%的試雞的日增重與蛋氨酸水平為0%的試雞之間差異顯著(P<0.05),而0.2%與0.8%之間差異不顯著(P>0.05)。人工感染與未感染E.tenella對雞的日增重有顯著差異(P<0.05)。說明日糧中添加蛋氨酸(0.8%、0.2%)與未添加蛋氨酸(0%)相比較,無論感染或未感染球蟲都可顯著提高肉仔雞的日增重,但日糧中高于NRC(1994)蛋氨酸推薦值(日糧中添加0.8%蛋氨酸)與NRC(1994)蛋氨酸推薦值相同(日糧中添加0.2%蛋氨酸)相比,對肉仔雞日增重的影響無顯著差異。E.tenella感染顯著降低了肉仔雞的日增重。
經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,蛋氨酸水平對肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率無顯著性影響(P>0.05),E.tenella感染顯著影響肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率(P<0.05)。不同蛋氨酸水平對肉雞的飼料轉(zhuǎn)化率的影響差異不顯著(P>0.05);感染與未感染E.tenella肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率間存在顯著性差異(P<0.05)。由此可以看出,E.tenella感染顯著地降低了肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率(P<0.05)。未感染E.tenella肉仔雞的飼料系數(shù)以日糧中添加0.2%蛋氨酸者最低;感染E.tenella肉仔雞的飼料系數(shù),以日糧中添加0.8%蛋氨酸者最低。表明在肉雞正常生產(chǎn)時(shí),NRC(1994)蛋氨酸推薦值(日糧中添加0.2%蛋氨酸)不僅滿足雞的生產(chǎn)需要,而且可獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益;而當(dāng)其感染了E.tenella時(shí),日糧中添加0.8%蛋氨酸,即高于NRC(1994)蛋氨酸推薦值,在一定程度上可提高肉雞的飼料轉(zhuǎn)化率。
各處理組間的存活率經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,感染E.tenella肉仔雞的存活率顯著地低于未感染(P<0.05);不同蛋氨酸水平對未感染E.tenella肉仔雞的存活影響差異不顯著(P>0.05),而對感染E.tenella肉仔雞的存活率的影響差異顯著(P<0.05)。在感染的情況下,蛋氨酸水平為0%、0.8%與0.2%之間差異均顯著(P<0.05),而0.8%與0%之間差異不顯著(P>0.05)。說明在E.tenella感染的情況下,日糧中高于(0.8%)或低于(0%)NRC(1994)的蛋氨酸推薦值,都可使肉仔雞的存活率有所提高。
當(dāng)前,在有關(guān)蛋氨酸的研究中,很多學(xué)者把蛋氨酸當(dāng)作生長抑制劑。日糧中添加過多的蛋氨酸對肉仔雞生長帶來的影響有一個(gè)范圍。Harte和Baker(1978)報(bào)道,雞飼喂1%~2%的蛋氨酸比飼喂0%~1%的組織損壞、生長抑制更大[9]。Katz和Baker(1975)報(bào)道,過多的蛋氨酸限制了孵出后8~14日齡公雞的體增重,攝取過多的蛋氨酸可能限制蘇氨酸的利用[10]。Ueda等(1981)報(bào)道,給雞采食一種粗蛋白質(zhì)為10%、蛋氨酸水平為1.5%的日糧,雞的飼料消耗與增重都嚴(yán)重地受到抑制,同時(shí)出現(xiàn)了弱腿[11]。Edmonds和Baker(1987)在含有23%粗蛋白的日糧中加入4%的蛋氨酸飼喂8~16日齡的雞,這個(gè)水平比蛋氨酸的需要量高8倍,體增重嚴(yán)重減少(減少了90%)[12]。Han和Baker(1993)報(bào)道,日糧中蛋氨酸過量添加1.0%時(shí)對體增重和飼料轉(zhuǎn)化率沒有不良影響;大于1.0%時(shí)體增重受到抑制[13]。本試驗(yàn)添加不同水平(0%、0.2%、0.8%)的蛋氨酸,未發(fā)現(xiàn)抑制肉仔雞的生長。添加蛋氨酸(0.2%、0.8%)均比未添加日增重顯著提高,且0.2%與0.8%組之間差異不顯著。
2.2 不同處理對肉仔雞血糖的影響
肉仔雞在14日齡時(shí),給每只雞人工感染3×104個(gè)E.tenella,19日齡肉仔雞排血便。由圖1、圖2可以看出,在14~19日齡期間,E.tenella肉仔雞血糖值高于未感染; 19~22日齡,感染和未感染肉仔雞的血糖值都降低。
接種后,不同蛋氨酸水平的雞血糖值曲線,都是先升高后降低的趨勢,在19日齡(接種后第5d),各組血糖達(dá)最大值。添加蛋氨酸,雞血糖值高于未添加的,0.2%、0.8%血糖值高于0%。感染后,雞血糖曲線始終呈下降趨勢,添加0.2%的蛋氨酸血糖值高于0.8%和0%。

血液中所含有的糖,除有微量果糖、半乳糖及其磷酸酯外,幾乎全部是葡萄糖及少量葡萄糖的磷酸酯。因此,血糖主要是指血液中所含的葡萄糖。血糖的主要來源是腸道吸收和肝糖原的分解,去路則是進(jìn)入各組織細(xì)胞后利用,包括在肝中合成肝糖原[14]。有關(guān)雞感染E.tenella球蟲病期間血糖研究的報(bào)道,結(jié)果很不一致,有的報(bào)道感染雞的血糖沒有變化,而體重卻下降,說明了血糖水平的維持是雞損失了大量的體重后獲得的;有的卻報(bào)道感染E.tenella雞的血糖含量明顯下降;而有的學(xué)者發(fā)現(xiàn),在E.tenella感染期間,雞的血糖含量明顯升高。本試驗(yàn)檢測雞血糖值,感染組均高于未感染組。Witlock等(1981;1982)發(fā)現(xiàn),在E.tenella及毒害艾美耳球蟲感染后,存活雞的血糖含量下降。本試驗(yàn)檢測雞血糖值,感染組死亡雞血糖卻高于存活雞,與Witlock等(1981;1982)觀察到的結(jié)果一致。在19日齡(接種后第5d),各組血糖達(dá)最大值,而Witlock則認(rèn)為,血糖的損失可能與感染雞的嚴(yán)重失血有關(guān)。
2.3 不同處理對肉仔雞病理上的影響(見表4)

由表4,經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,可以看出,感染柔嫩艾美耳球蟲的雞,血便記分、卵囊排出量及不同蛋氨酸水平之間差異不顯著(P>0.05),但病變記分差異顯著(P<0.05)。血便記分0.2%比0%高12.4%、比0.8%高21.6%。病變記分0.8%組顯著低于0%、0.2%(P<0.05),0%與0.2%之間差異不顯著(P>0.05)。由此可見,日糧中添加高于NRC(1994)推薦的蛋氨酸(0.8%)可以降低感染柔嫩艾美耳球蟲肉仔雞的血便記分、病變記分,但對卵囊排出量影響不大;日糧蛋氨酸水平低于NRC(1994)推薦水平(0%組,未添加蛋氨酸),不能降低感染E.tenella肉仔雞的病變程度、卵囊排出量。
球蟲感染期間,不同蛋氨酸水平對雞血便記分沒有顯著影響,但0.8%組比0.2%組、0%組分別低17.8%、7.6%;不同蛋氨酸水平組雞的病變記分差異顯著,0.8%組顯著低于0%和0.2%組,分別降低了26.3%、30%。說明在球蟲感染的情況下,高營養(yǎng)水平對其是有效的。而卵囊排出量,3組之間差異不顯著,但0%組卻比0.2%組高71.4%,比0.8%組高20%。添加蛋氨酸組,卵囊排出量均低于未添加組,說明添加蛋氨酸與未添加組比,可降低卵囊排出量。
Harms等(1967)報(bào)道提高日糧中的養(yǎng)分濃度,可以緩解球蟲病造成的生長不良[15]。在本試驗(yàn)中,日糧中添加0.8%的蛋氨酸,與0.2%組相比,可以顯著提高感染球蟲肉仔雞的存活率,降低病變值,提高血清抗體;與0%組相比,可以顯著提高日增重。這可能是因?yàn)椋瑖?yán)重感染時(shí)骨骼肌釋放氨基酸增多,肝臟和其它臟器對氨基酸的攝取也增高,這是嚴(yán)重感染時(shí)的特征性的反應(yīng)。而所釋放的氨基酸,一方面供糖異生或氧化供應(yīng)能量;另一方面合成一些非常重要的蛋白質(zhì)和多肽,用以維持正常的免疫反應(yīng)和重要臟器的生理機(jī)能(石麟義等,1993)。日糧中添加高于推薦值的蛋氨酸水平,可以滿足病理情況下肉仔雞對氨基酸的需要量。提高了肉仔雞對蛋氨酸的表觀消化率。因?yàn)殡u在應(yīng)激狀態(tài)下,由于急需蛋白質(zhì)的合成(與組織傷害和感染防護(hù)機(jī)制有關(guān)),含硫氨基酸的需要量增加(Grilnblei,1997)。日糧中添加0.2%蛋氨酸[符合NRC(1994)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)]的雞日采食量比添加0.8%蛋氨酸的降低了3.60%,日增重、存活率差異顯著。這是因?yàn)榍蛳x感染期間,機(jī)體發(fā)生了免疫反應(yīng),肉雞的代謝朝著加強(qiáng)免疫功能、抵御球蟲入侵方向改變,這便會(huì)影響動(dòng)物的采食量和生產(chǎn)性能,顯然,此時(shí)正常的營養(yǎng)水平和飼養(yǎng)方案不能適應(yīng)處于免疫應(yīng)激期的動(dòng)物(咼于明[16],1997)。
3 結(jié)論
3.1 日糧中添加0.8%的蛋氨酸與0.2%相比,肉仔雞的生產(chǎn)性能的影響差異不顯著(P>0.05)。日糧中添加蛋氨酸與未添加蛋氨酸相比,可以顯著提高日增重(P<0.05)。
3.2 日糧蛋氨酸水平對肉仔雞血糖影響不大,球蟲(E.tenella)感染可顯著影響肉仔雞血糖值。
3.3 日糧蛋氨酸水平可以顯著影響感染球蟲(E.tenella)的肉仔雞的病變記分(P<0.05),日糧中添加0.8%的蛋氨酸,顯著優(yōu)于0.2%組、0%組(P<0.05)。在球蟲感染的情況下,高營養(yǎng)水平對降低病變是有效的。
參考文獻(xiàn)
1 Allen P.C. Effects of daily oral doses of L-Arginine on coccidiosis infections in chickens.Poultry Sci.,1999,78:1 506~1 509
2 李振等. 蛋白質(zhì)營養(yǎng)與家禽免疫[J].中國飼料,2002(18):22~23
3 金嶺梅,孟新宇,等. 日糧蛋氨酸和蘇氨酸水平對感染球蟲肉仔雞的影響[J].中國飼料,2003,(10):12~14
4 馮杰,胡倡華.氨基酸與免疫系統(tǒng)的相互作用[J]. 飼料工業(yè),2001,22(2):10~12
5 王冉. 動(dòng)物蛋氨酸營養(yǎng)研究進(jìn)展[J].糧食與飼料工業(yè),1999(4):28
6 周明. 畜禽營養(yǎng)狀況對免疫機(jī)能的影響[J].中國畜禽傳染病,1996(1):57~58
7 Acar N, Barbato G F, Patterson P H. The effects of feeding excess methionine on live performance ,carcass traits,and ascitic mortality. Poultry Sci., 2001,80:1 585~1 589
8 角田清主編. 雞球蟲病[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,1986
9 Willis G M,Baker D H. Interaction between dietary protein amino acid level and parasitic infection:morbidity in amino acid deficient or adequate chicks inoculated with E.acervnlina. J. Nutr., 1981,111:1 157~1 163
10 Colnago G L, L.S.Jensen, P.L.Long. Effect of natural feedstuffs added to a semi-purified diet on Eimeria tenella infection. Poultry Sci., 1984,63:2 145~2 152
11 Mathis G F, N.M.Dale, A.L.Fuller. Effect of dietary raw soybeans on coccidiosis in chickens. Poultry Sci., 1995,74:800~804
12 Allen.P.C.,and H.D.Danforth. Effects of dietary supplementation with n-3 fatty acid ethyl esters on coccidiosis in chickens. P. Sci,1998,77:1 631~1 635
13 Allen P C, H.D.Danforth, P.C.Augustine. Dietary modulation of avian coccidiosis.Int.J.Parasitol, 1994,28:1 131~1 140
14 齊順章主編. 動(dòng)物生物化學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1980
15 香港大方西藥公司. 防治雞球蟲病的新措施[J].禽業(yè)科技, 1995,11(1):15~16
16 咼于明主編.家禽營養(yǎng)與飼料[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué),1997
S816.32
日糧成分可影響寄生蟲的發(fā)育與致病性。在養(yǎng)禽業(yè)中通過在日糧中添加某些營養(yǎng)物質(zhì)或改變?nèi)占Z組分來提高雞體的免疫力,達(dá)到減輕或控制球蟲病造成的經(jīng)濟(jì)損失,從而減少因添加預(yù)防藥物帶來的抗藥性問題及藥物殘留問題。
疾病和免疫機(jī)能抑制會(huì)影響動(dòng)物生長和飼料轉(zhuǎn)化率,消除這種不利影響通常可以改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能。國內(nèi)外新近的科學(xué)研究表明,氨基酸營養(yǎng)對提高動(dòng)物的免疫機(jī)能具有積極作用,特定氨基酸可以抵抗或消除疾病和免疫機(jī)能抑制的產(chǎn)生[4]。蛋氨酸是雞的第一限制性氨基酸,它在動(dòng)物體內(nèi)能合成機(jī)體蛋白,并能很快轉(zhuǎn)換為胱氨酸,滿足動(dòng)物需要,為機(jī)體提供活性甲基。Swick等(1990)報(bào)道了在熱應(yīng)激情況下,蛋氨酸的添加可提高家禽的生產(chǎn)性能。美國佐治亞州大學(xué)(1992)研究表明,蛋氨酸添加對家禽有防病保健的作用[5]。Hall(1986)研究發(fā)現(xiàn),主要免疫細(xì)胞——淋巴細(xì)胞內(nèi)蛋氨酸代謝與骨骼肌不同,當(dāng)?shù)鞍彼嵩诹馨图?xì)胞轉(zhuǎn)甲基過程中消耗后,淋巴細(xì)胞就不能再合成蛋氨酸,需由飼料補(bǔ)充。Tsiagbe(1987)報(bào)道,喂蛋氨酸不足的日糧,會(huì)降低雛雞對綿羊紅細(xì)胞的反應(yīng),并延緩它對植物凝血素的過敏反應(yīng)[6]。據(jù)資料報(bào)道,日糧中含硫氨基酸的含量和堆型艾美耳球蟲的寄生,對雞的生長和飼料轉(zhuǎn)化指數(shù)有著相互影響。當(dāng)日糧中的含硫氨基酸的量為滿足最佳生長的50%時(shí),會(huì)顯著提高感染球蟲后試驗(yàn)雞的日增重。賴氨酸和胱氨酸也有此現(xiàn)象。缺乏含硫氨基酸(蛋氨酸+胱氨酸,含量為0.24%)的日糧可以減少感染E. acervulina發(fā)病率和死亡率(Willis等,1981)。而日糧蛋氨酸水平與雞感染柔嫩艾美耳球蟲(E. tenella)的研究非常少。本試驗(yàn)通過改變?nèi)占Z蛋氨酸水平,來研究蛋氨酸水平對感染柔嫩艾美耳球蟲(E. tenella)的肉仔雞的影響。
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,用日糧營養(yǎng)水平控制雞球蟲病的方法,除蛋白質(zhì)外,幾乎都是采用高于飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的方法。Tsiagbe(1987)報(bào)道,最佳免疫反應(yīng)所需的日糧蛋氨酸水平遠(yuǎn)高于最大生產(chǎn)性能時(shí)所需的蛋氨酸水平。日糧中添加過多的蛋氨酸水平對肉仔雞生長帶來的影響有一個(gè)范圍。Harte和Baker(1978)、Han和Bker(1993)報(bào)道,日糧中蛋氨酸過量添加到1.0%時(shí)對體增重和飼料轉(zhuǎn)化率沒有不良影響,大于1.0%體增重受到抑制[7]。因此,根據(jù)NRC(1994)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)合我國養(yǎng)雞業(yè)的實(shí)際,本試驗(yàn)特采用在日糧中添加0%、0.2%、0.8% 3個(gè)蛋氨酸水平來研究人工感染柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)對肉仔雞的影響。
1 材料和方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
試驗(yàn)雞為1日齡商品AA肉仔雞,購自上海大江食品股份公司。
1.1.2 柔嫩艾美耳球蟲(E. tenella)蟲種
由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海家畜寄生蟲病研究所第二研究室提供。
1.1.3 試驗(yàn)日糧組成
試驗(yàn)日糧根據(jù)NRC(1994)肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合我國養(yǎng)雞實(shí)際自行配制(見表1)。3組試驗(yàn)日糧(試糧1、試糧2、試糧3)中分別添加0%、0.2%、0.8%的蛋氨酸。飼料中不含任何抗球蟲藥物和抗菌藥。

1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案
設(shè)計(jì)方案如表2所示。

1.2.2 試驗(yàn)期
預(yù)試期7d,試驗(yàn)期14d,肉仔雞22日齡結(jié)束試驗(yàn)。
1.2.3 飼養(yǎng)管理
雞舍在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海家畜寄生蟲病研究所SPF試驗(yàn)動(dòng)物房內(nèi)。在第一周,試驗(yàn)肉仔雞即開始籠養(yǎng),每籠10只。7日齡時(shí),將試驗(yàn)雞個(gè)體稱重,并戴腳號。按合適的體重分為6組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ),每組60只雞,每5只雞一籠,飼養(yǎng)在不銹鋼籠中。14日齡時(shí),Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ 3組的雞,每只接種3×104個(gè)孢子化的柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)卵囊。試驗(yàn)期間,雞舍溫度由37℃逐漸降至27℃。雞舍采取持續(xù)光照,雞自由采食和飲水。其余飼養(yǎng)管理按AA肉仔雞的管理方法執(zhí)行。
1.3 檢測項(xiàng)目
1.3.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)測定
1.3.1.1 體重
每次稱重前,晚8:00停食,第二天早上8:00逐只空腹稱重。
1.3.1.2 采食量
與稱重同時(shí)進(jìn)行,以每個(gè)重復(fù)為一個(gè)計(jì)量單位記錄采食量。
1.3.1.3 平均日增重、平均日采食量、飼料轉(zhuǎn)化率
平均日增重[g/(只·d)]=(末重-始重)/稱重間隔天數(shù)
平均日采食量[g/(只·d)]=階段耗料量/(稱重間隔天數(shù)×雞數(shù))
飼料轉(zhuǎn)化率=平均日采食量/同期平均日增重
1.3.2 血糖
用快速測定法。每次測定血糖前,禁食12h。用羅氏公司的樂康全2血糖檢測儀(GLUCOTRENDR2)測定血糖值。
1.3.3 病變記分、血便記分、糞便卵囊計(jì)數(shù)
接種后第5d血便記分,采第8d糞便,用麥克馬斯特法作克糞便卵囊記數(shù)(OPG)。22日齡將試驗(yàn)雞稱重后,全部剖殺。用Johnsont和Reid(1970)方法作盲腸病變記分[8]。
1.4 資料分析
本試驗(yàn)數(shù)據(jù),按兩因素有重復(fù)觀察值的交叉分組資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。差異顯著性用q檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較。
2 結(jié)果與討論
2.1 不同處理對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響
雞的生產(chǎn)性能包括日采食(g/只)、日增重(g/只)、飼料轉(zhuǎn)化率和存活率(%),各項(xiàng)指標(biāo)如表3所示。

由表3,經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,各處理組間的日采食量均無顯著性差異(P>0.05),即蛋氨酸水平和E.tenella對雞的日采食無顯著性影響。但未感染E.tenella的雞日采食量均略高于感染E.tenella時(shí)的采食量,日糧蛋氨酸水平為0.2%的日采食量分別比蛋氨酸水平為0%和0.8%略高4.84%和3.14%;感染E.tenella時(shí),日糧蛋氨酸水平為0.2%的試驗(yàn)雞日采食量分別比蛋氨酸水平為0%和0.8%的低2.87%和3.60%;日糧蛋氨酸水平為 0%、0.2%和0.8%時(shí),感染E.tenella的雞的日采食量依次比未感染的雞低2.56%、9.72%和3.41%。由此可知,感染E.tenella的雞采食高于或低于NRC推薦的蛋氨酸添加水平的日糧,對肉仔雞的日采食量略有影響,但差異不顯著(P>0.05)。
各處理組間的日增重經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析差異顯著(P<0.05)。蛋氨酸水平和E.tenella對雞的日增重的影響差異顯著(P<0.05)。蛋氨酸水平為0.2%和0.8%的試雞的日增重與蛋氨酸水平為0%的試雞之間差異顯著(P<0.05),而0.2%與0.8%之間差異不顯著(P>0.05)。人工感染與未感染E.tenella對雞的日增重有顯著差異(P<0.05)。說明日糧中添加蛋氨酸(0.8%、0.2%)與未添加蛋氨酸(0%)相比較,無論感染或未感染球蟲都可顯著提高肉仔雞的日增重,但日糧中高于NRC(1994)蛋氨酸推薦值(日糧中添加0.8%蛋氨酸)與NRC(1994)蛋氨酸推薦值相同(日糧中添加0.2%蛋氨酸)相比,對肉仔雞日增重的影響無顯著差異。E.tenella感染顯著降低了肉仔雞的日增重。
經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,蛋氨酸水平對肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率無顯著性影響(P>0.05),E.tenella感染顯著影響肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率(P<0.05)。不同蛋氨酸水平對肉雞的飼料轉(zhuǎn)化率的影響差異不顯著(P>0.05);感染與未感染E.tenella肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率間存在顯著性差異(P<0.05)。由此可以看出,E.tenella感染顯著地降低了肉仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率(P<0.05)。未感染E.tenella肉仔雞的飼料系數(shù)以日糧中添加0.2%蛋氨酸者最低;感染E.tenella肉仔雞的飼料系數(shù),以日糧中添加0.8%蛋氨酸者最低。表明在肉雞正常生產(chǎn)時(shí),NRC(1994)蛋氨酸推薦值(日糧中添加0.2%蛋氨酸)不僅滿足雞的生產(chǎn)需要,而且可獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益;而當(dāng)其感染了E.tenella時(shí),日糧中添加0.8%蛋氨酸,即高于NRC(1994)蛋氨酸推薦值,在一定程度上可提高肉雞的飼料轉(zhuǎn)化率。
各處理組間的存活率經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,感染E.tenella肉仔雞的存活率顯著地低于未感染(P<0.05);不同蛋氨酸水平對未感染E.tenella肉仔雞的存活影響差異不顯著(P>0.05),而對感染E.tenella肉仔雞的存活率的影響差異顯著(P<0.05)。在感染的情況下,蛋氨酸水平為0%、0.8%與0.2%之間差異均顯著(P<0.05),而0.8%與0%之間差異不顯著(P>0.05)。說明在E.tenella感染的情況下,日糧中高于(0.8%)或低于(0%)NRC(1994)的蛋氨酸推薦值,都可使肉仔雞的存活率有所提高。
當(dāng)前,在有關(guān)蛋氨酸的研究中,很多學(xué)者把蛋氨酸當(dāng)作生長抑制劑。日糧中添加過多的蛋氨酸對肉仔雞生長帶來的影響有一個(gè)范圍。Harte和Baker(1978)報(bào)道,雞飼喂1%~2%的蛋氨酸比飼喂0%~1%的組織損壞、生長抑制更大[9]。Katz和Baker(1975)報(bào)道,過多的蛋氨酸限制了孵出后8~14日齡公雞的體增重,攝取過多的蛋氨酸可能限制蘇氨酸的利用[10]。Ueda等(1981)報(bào)道,給雞采食一種粗蛋白質(zhì)為10%、蛋氨酸水平為1.5%的日糧,雞的飼料消耗與增重都嚴(yán)重地受到抑制,同時(shí)出現(xiàn)了弱腿[11]。Edmonds和Baker(1987)在含有23%粗蛋白的日糧中加入4%的蛋氨酸飼喂8~16日齡的雞,這個(gè)水平比蛋氨酸的需要量高8倍,體增重嚴(yán)重減少(減少了90%)[12]。Han和Baker(1993)報(bào)道,日糧中蛋氨酸過量添加1.0%時(shí)對體增重和飼料轉(zhuǎn)化率沒有不良影響;大于1.0%時(shí)體增重受到抑制[13]。本試驗(yàn)添加不同水平(0%、0.2%、0.8%)的蛋氨酸,未發(fā)現(xiàn)抑制肉仔雞的生長。添加蛋氨酸(0.2%、0.8%)均比未添加日增重顯著提高,且0.2%與0.8%組之間差異不顯著。
2.2 不同處理對肉仔雞血糖的影響
肉仔雞在14日齡時(shí),給每只雞人工感染3×104個(gè)E.tenella,19日齡肉仔雞排血便。由圖1、圖2可以看出,在14~19日齡期間,E.tenella肉仔雞血糖值高于未感染; 19~22日齡,感染和未感染肉仔雞的血糖值都降低。
接種后,不同蛋氨酸水平的雞血糖值曲線,都是先升高后降低的趨勢,在19日齡(接種后第5d),各組血糖達(dá)最大值。添加蛋氨酸,雞血糖值高于未添加的,0.2%、0.8%血糖值高于0%。感染后,雞血糖曲線始終呈下降趨勢,添加0.2%的蛋氨酸血糖值高于0.8%和0%。

血液中所含有的糖,除有微量果糖、半乳糖及其磷酸酯外,幾乎全部是葡萄糖及少量葡萄糖的磷酸酯。因此,血糖主要是指血液中所含的葡萄糖。血糖的主要來源是腸道吸收和肝糖原的分解,去路則是進(jìn)入各組織細(xì)胞后利用,包括在肝中合成肝糖原[14]。有關(guān)雞感染E.tenella球蟲病期間血糖研究的報(bào)道,結(jié)果很不一致,有的報(bào)道感染雞的血糖沒有變化,而體重卻下降,說明了血糖水平的維持是雞損失了大量的體重后獲得的;有的卻報(bào)道感染E.tenella雞的血糖含量明顯下降;而有的學(xué)者發(fā)現(xiàn),在E.tenella感染期間,雞的血糖含量明顯升高。本試驗(yàn)檢測雞血糖值,感染組均高于未感染組。Witlock等(1981;1982)發(fā)現(xiàn),在E.tenella及毒害艾美耳球蟲感染后,存活雞的血糖含量下降。本試驗(yàn)檢測雞血糖值,感染組死亡雞血糖卻高于存活雞,與Witlock等(1981;1982)觀察到的結(jié)果一致。在19日齡(接種后第5d),各組血糖達(dá)最大值,而Witlock則認(rèn)為,血糖的損失可能與感染雞的嚴(yán)重失血有關(guān)。
2.3 不同處理對肉仔雞病理上的影響(見表4)

由表4,經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,可以看出,感染柔嫩艾美耳球蟲的雞,血便記分、卵囊排出量及不同蛋氨酸水平之間差異不顯著(P>0.05),但病變記分差異顯著(P<0.05)。血便記分0.2%比0%高12.4%、比0.8%高21.6%。病變記分0.8%組顯著低于0%、0.2%(P<0.05),0%與0.2%之間差異不顯著(P>0.05)。由此可見,日糧中添加高于NRC(1994)推薦的蛋氨酸(0.8%)可以降低感染柔嫩艾美耳球蟲肉仔雞的血便記分、病變記分,但對卵囊排出量影響不大;日糧蛋氨酸水平低于NRC(1994)推薦水平(0%組,未添加蛋氨酸),不能降低感染E.tenella肉仔雞的病變程度、卵囊排出量。
球蟲感染期間,不同蛋氨酸水平對雞血便記分沒有顯著影響,但0.8%組比0.2%組、0%組分別低17.8%、7.6%;不同蛋氨酸水平組雞的病變記分差異顯著,0.8%組顯著低于0%和0.2%組,分別降低了26.3%、30%。說明在球蟲感染的情況下,高營養(yǎng)水平對其是有效的。而卵囊排出量,3組之間差異不顯著,但0%組卻比0.2%組高71.4%,比0.8%組高20%。添加蛋氨酸組,卵囊排出量均低于未添加組,說明添加蛋氨酸與未添加組比,可降低卵囊排出量。
Harms等(1967)報(bào)道提高日糧中的養(yǎng)分濃度,可以緩解球蟲病造成的生長不良[15]。在本試驗(yàn)中,日糧中添加0.8%的蛋氨酸,與0.2%組相比,可以顯著提高感染球蟲肉仔雞的存活率,降低病變值,提高血清抗體;與0%組相比,可以顯著提高日增重。這可能是因?yàn)椋瑖?yán)重感染時(shí)骨骼肌釋放氨基酸增多,肝臟和其它臟器對氨基酸的攝取也增高,這是嚴(yán)重感染時(shí)的特征性的反應(yīng)。而所釋放的氨基酸,一方面供糖異生或氧化供應(yīng)能量;另一方面合成一些非常重要的蛋白質(zhì)和多肽,用以維持正常的免疫反應(yīng)和重要臟器的生理機(jī)能(石麟義等,1993)。日糧中添加高于推薦值的蛋氨酸水平,可以滿足病理情況下肉仔雞對氨基酸的需要量。提高了肉仔雞對蛋氨酸的表觀消化率。因?yàn)殡u在應(yīng)激狀態(tài)下,由于急需蛋白質(zhì)的合成(與組織傷害和感染防護(hù)機(jī)制有關(guān)),含硫氨基酸的需要量增加(Grilnblei,1997)。日糧中添加0.2%蛋氨酸[符合NRC(1994)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)]的雞日采食量比添加0.8%蛋氨酸的降低了3.60%,日增重、存活率差異顯著。這是因?yàn)榍蛳x感染期間,機(jī)體發(fā)生了免疫反應(yīng),肉雞的代謝朝著加強(qiáng)免疫功能、抵御球蟲入侵方向改變,這便會(huì)影響動(dòng)物的采食量和生產(chǎn)性能,顯然,此時(shí)正常的營養(yǎng)水平和飼養(yǎng)方案不能適應(yīng)處于免疫應(yīng)激期的動(dòng)物(咼于明[16],1997)。
3 結(jié)論
3.1 日糧中添加0.8%的蛋氨酸與0.2%相比,肉仔雞的生產(chǎn)性能的影響差異不顯著(P>0.05)。日糧中添加蛋氨酸與未添加蛋氨酸相比,可以顯著提高日增重(P<0.05)。
3.2 日糧蛋氨酸水平對肉仔雞血糖影響不大,球蟲(E.tenella)感染可顯著影響肉仔雞血糖值。
3.3 日糧蛋氨酸水平可以顯著影響感染球蟲(E.tenella)的肉仔雞的病變記分(P<0.05),日糧中添加0.8%的蛋氨酸,顯著優(yōu)于0.2%組、0%組(P<0.05)。在球蟲感染的情況下,高營養(yǎng)水平對降低病變是有效的。
參考文獻(xiàn)
1 Allen P.C. Effects of daily oral doses of L-Arginine on coccidiosis infections in chickens.Poultry Sci.,1999,78:1 506~1 509
2 李振等. 蛋白質(zhì)營養(yǎng)與家禽免疫[J].中國飼料,2002(18):22~23
3 金嶺梅,孟新宇,等. 日糧蛋氨酸和蘇氨酸水平對感染球蟲肉仔雞的影響[J].中國飼料,2003,(10):12~14
4 馮杰,胡倡華.氨基酸與免疫系統(tǒng)的相互作用[J]. 飼料工業(yè),2001,22(2):10~12
5 王冉. 動(dòng)物蛋氨酸營養(yǎng)研究進(jìn)展[J].糧食與飼料工業(yè),1999(4):28
6 周明. 畜禽營養(yǎng)狀況對免疫機(jī)能的影響[J].中國畜禽傳染病,1996(1):57~58
7 Acar N, Barbato G F, Patterson P H. The effects of feeding excess methionine on live performance ,carcass traits,and ascitic mortality. Poultry Sci., 2001,80:1 585~1 589
8 角田清主編. 雞球蟲病[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,1986
9 Willis G M,Baker D H. Interaction between dietary protein amino acid level and parasitic infection:morbidity in amino acid deficient or adequate chicks inoculated with E.acervnlina. J. Nutr., 1981,111:1 157~1 163
10 Colnago G L, L.S.Jensen, P.L.Long. Effect of natural feedstuffs added to a semi-purified diet on Eimeria tenella infection. Poultry Sci., 1984,63:2 145~2 152
11 Mathis G F, N.M.Dale, A.L.Fuller. Effect of dietary raw soybeans on coccidiosis in chickens. Poultry Sci., 1995,74:800~804
12 Allen.P.C.,and H.D.Danforth. Effects of dietary supplementation with n-3 fatty acid ethyl esters on coccidiosis in chickens. P. Sci,1998,77:1 631~1 635
13 Allen P C, H.D.Danforth, P.C.Augustine. Dietary modulation of avian coccidiosis.Int.J.Parasitol, 1994,28:1 131~1 140
14 齊順章主編. 動(dòng)物生物化學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1980
15 香港大方西藥公司. 防治雞球蟲病的新措施[J].禽業(yè)科技, 1995,11(1):15~16
16 咼于明主編.家禽營養(yǎng)與飼料[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué),1997