摘要：本研究采用Sibbald強(qiáng)飼快速法，應(yīng)用去盲腸手術(shù)公雞，測定并比較了不同纖維素水平下的內(nèi)源氨基酸排泄量。結(jié)果表明，隨著日糧中纖維素含量的增加，雞對(duì)纖維素的消化率下降；去盲腸后，低纖維素的消化率降低，而對(duì)高纖維日糧的纖維素消化率無影響，去盲腸對(duì)低纖維日糧中纖維素消化率影響較大。由此說明，內(nèi)源排泄量的多少取決于日糧纖維素水平，內(nèi)源排泄量的測定及校正應(yīng)采用一定水平的纖維素日糧。?
關(guān)鍵詞：纖維素；內(nèi)源氨基酸排泄量；去盲腸公雞
內(nèi)源分泌量的測定是氨基酸代謝率測定中爭論最多的問題，很多因素諸如：試驗(yàn)動(dòng)物、飼料類型、環(huán)境溫度盲腸微生物、排泄物收集時(shí)間等都會(huì)影響內(nèi)源氨基分泌量。最新的研究表明，其主要的因素是纖維和蛋白質(zhì)，即日糧組成對(duì)內(nèi)源排泄量有影響。為避免上述問題的發(fā)生，最好的辦法是使用標(biāo)準(zhǔn)化的測定技術(shù)，但目前尚為見到有關(guān)內(nèi)源排泄量測定方法的技術(shù)規(guī)范和明確標(biāo)準(zhǔn)。
1 材料與方法?
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物?
采用36周齡健康的星雜579公雞6羽，按體重分為兩組，每組3羽，于代謝籠中單個(gè)飼養(yǎng)，自由飲水，其中一組公雞在26周齡切除盲腸。術(shù)后試雞恢復(fù)4周，于試驗(yàn)前2周在肛門處縫合一個(gè)100ml塑料瓶蓋，以便試驗(yàn)期內(nèi)收集試雞的排泄物。?
1.2 去盲腸手術(shù)?
術(shù)前對(duì)試雞饑餓24h，仰臥保定，拔掉腹部龍骨至泄殖腔偏左處4×4cm?2左右范圍的雞毛，經(jīng)消毒后在龍骨下端切開皮膚約3cm，分離皮下脂肪組織和腹肌，暴露出肌胃和十二指腸，將兩條盲腸拉出腹腔，剪斷盲腸，荷包縫合，消毒后按50萬單位/羽注入青霉素和鏈霉素，同時(shí)飲喂ORS口服液和多維葡萄糖。?
1.3 試驗(yàn)方法?
試驗(yàn)采用改良的Sibbald“TME”法，將3羽雞去盲腸，并將6羽雞分為兩組，每次測定一個(gè)樣品，試驗(yàn)程序?yàn)椋航?8h→強(qiáng)飼30g被測飼料→收集 48h排泄物→喂基礎(chǔ)日糧4d→做下一次試驗(yàn)，把每羽雞收集的排泄物在65℃鼓風(fēng)烘箱中烘干，回潮24h后稱重，每羽雞的排泄物粉碎制成一個(gè)樣品供分析氨基酸等。?
1.4 試驗(yàn)日糧?
試驗(yàn)日糧分基礎(chǔ)日糧和纖維日糧（由豌豆淀粉和纖維素組成）兩種，按纖維素含量分為5種，即N、N1、N2、N3、N4，其纖維素含量分別為0、3%、5%、8%、11%。?
1.5 樣品分析?
氨基酸含量用日立835-50型高速氨基酸自動(dòng)分析儀分析。?
1.6 結(jié)果計(jì)算和統(tǒng)計(jì)分析方法?
各組內(nèi)源氨基酸排泄量用平均的標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2 結(jié)果與分析?
2.1 纖維素水平的影響?
不同纖維素水平下的內(nèi)源氨基酸排泄量結(jié)果見表1。?
表1不同纖維素水平內(nèi)源氨基酸排泄量（mg/48h）
| 成分 | N | N1 | N2 | N3 | N4 | |||||
| 正常 | 去盲腸 | 正常 | 去盲腸 | 正常 | 去盲腸 | 正常 | 去盲腸 | 正常 | 去盲腸 | |
| ASP | 66.40±13.27 | 60.17±15.27 | 53.20±3. 4 0 | 56.77±13.80 | 55.77±4.66 | 58.07±4.99 | 47.93±6.55 | 48.33±10.96 | 56.57±17.27 | 57.13±9.92 |
| THR | 43.17±10.17 | 48.43±9.31 | 32.30±4.60 | 40.50±10.24 | 36.77±9.70 | 44.13±2.93 | 32.83±2.35 | 35.47±7.25 | 35.50±8.85 | 43. 23±9.25 |
| SER | 35.30±8.92 | 35.73±7.73 | 26.60±3.60 | 33.53±9.00 | 35.53±10.28 | 35.00±2.25 | 24.73±4.15 | 28.77±5.40 | 30.67±6.64 | 35.23±5.97 |
| GLU | 86.83±14.23 | 74.10±15.60 | 73.70±4.40 | 78.47±19.01 | 78.47±19.81 | 79.50±3.90 | 64.93±9.55 | 66.63±11.88 | 79.57±21.39 | 76.60 ±9.90 |
| GLY | 129.40±7.86 | 152.93±35.34 | 135.50±7.20 | 203.30±86.23 | 1 04.87±34.53 | 148.30±85.28 | 96.93±27.28 | 126.23±47.68 | 150.53±10.71 | 126.07±28.15 |
| ALA | 42.23±5.42 | 37.37±8.60 | 39.60±3.70 | 38.87±10.26 | 39.63±10.30 | 39.00±2.14 | 31.73±5.40 | 32.23±6.25 | 38.17±12.48 | 37.33±7 .11 |
| VAL | 49.40±9.44 | 49.93±12.91 | 42.47±4.27 | 49.20±13.64 | 48.33±12.09 | 51.60±5.10 | 39.07±4.20 | 41.13±9.00 | 42.60±10.06 | 46.43±8.79 |
| MET | 23.67±3.84 | 33.20±3.90 | 15.37±2.40 | 23.47±7.13 | 21.73±1.72 | 28.10±7.02 | 21.70±1.41 | 25.33±6.92 | 22.37±2.47 | 28.27±10.00 |
| ILE | 32.13±6.99 | 28.30±6.09 | 27.77±1.72 | 28.77±7.90 | 29.33±7.99 | 28.27±1.40 | 22.07±4.20 | 22.33±4.52 | 26.30±8.88 | 28.60±5.51 |
| LEU | 49.27±11.90 | 44.30±10.17 | 39.60±3.66 | 40.70±12.10 | 41.8 3±12.46 | 40.87±3.70 | 31.33±5.96 | 33.23±7.00 | 39.47±14.32 | 42.80±7.47 |
| TYR | 26.97±6.81 | 26.33±6.77 | 24.90±2.07 | 26.17±8.26 | 23.97±7.80 | 22.70±3.95 | 17.07±3.14 | 18.10±5.05 | 21.50±7.74 | 24.17±4.32 |
| PHE | 36.53±10.12 | 32.93±7.48 | 30.00±2.29 | 34.23±10.21 | 35.03±7.65 | 33.83±4.07 | 28.27±5.01 | 31.00±6.16 | 34.27±7.77 | 34.23±3.3 4 |
| LYS | 40.00±8.35 | 34.33±8.50 | 36.17±2.80 | 47.20±20.70 | 37.97±8.25 | 48.27±13.79 | 29.80±3.68 | 34.30±10.05 | 35.07±8.46 | 33.90±3 .77 |
| HIS | 9.47±2.37 | 9.03±2.68 | 6.73±1.26 | 8.60±2.95 | 6.17±0.45 | 9.00±2.35 | 5.43±0.61 | 7.53±2.29 | 7.53±1.65 | 9.60±3.41 |
| ARG | 29.17±7.22 | 21.63±4.76 | 24.90±2.07 | 33.50±14.53 | 25.33±8.57 | 28.83±5.43 | 18.97±4.86 | 21.93±4.75 | 25.87±7.57 | 24.10±2.91 |
| PRO | 32.80±6.41 | 34.80±6.22 | 27.20±4.87 | 33.17±7.56 | 34.83±12.13 | 35.37±2.65 | 25.53±1.97 | 27.87±2.73 | 30.13±5.40 | 31.57±4.58 |
| CYS | 32.60±4.24 | 36.50±11.07 | 22.00±1.47 | 28.80±7.72 | 27.33 ±12.12 | 24.17±2.97 | 29.00±2.36 | 31.10±10.24 | 33.70±4.65 | 33.90±3.77 |
| ΣAA | 752.01 | 765.70 | 665.61 | 805.33 | 682.92 | 747.09 | 567.42 | 631.51 | 709.82 | 713.24 |
注：各組內(nèi)源氨基酸值均為風(fēng)干樣中含量?
2.2 試驗(yàn)期的延長對(duì)內(nèi)源排泄量的影響?
本次試驗(yàn)安排的代謝試驗(yàn)程序?yàn)椋篘1→N2→N3→N4→N。從內(nèi)源氨基酸排泄量測定結(jié)果看出，隨代謝試驗(yàn)期的延長，越到后期未去盲腸雞內(nèi)源氨基酸排泄量越高，第一期內(nèi)源總氨基酸排泄量為：665.61mg/48h，最后一期為：765.70mg/48h;但去盲腸雞則不呈現(xiàn)規(guī)律，第一期為：805.33mg/48h，最后一期為：752.81mg/48h。
3 討論?
3.1 內(nèi)源排泄量測定方法的應(yīng)用?
Sibbald（1979）提出的用饑餓法測“TME”值，雖具有測試時(shí)間短，不受試驗(yàn)家禽的性別、種類、年齡以及采食量等因素的影響的優(yōu)點(diǎn)，但未考慮不同飼料在家禽體內(nèi)通過的時(shí)間的不一致性，而且這些因素直接影響內(nèi)源排泄物的數(shù)量和質(zhì)量，F(xiàn)arrell（1982）雖提出不同看法，并根據(jù)其理論提出新方法，但其論點(diǎn)仍未解決如何排除內(nèi)源排泄物對(duì)代謝物質(zhì)的干擾問題。Parsons等（1983）的研究結(jié)果顯示，無氮日糧的實(shí)際組成會(huì)影響內(nèi)源氨基酸的排泄，因?yàn)閺淖罨镜纳斫嵌戎v，飼喂無蛋白日糧都要比長期禁食好得多。內(nèi)源排泄量可能是不同飼料的固有特點(diǎn)，因此，利用禁食或無氮日糧測得的內(nèi)源排泄量來校正某待測飼料的真消化率顯然不適合，內(nèi)源排泄量取決于日糧纖維水平。?
3.2纖維日糧對(duì)消化代謝率的影響?
影響內(nèi)源排泄量的因素很多，其主要因素是纖維和蛋白質(zhì)，Halnan（1949），Anderson等（1958）的早期研究表明，盲腸對(duì)纖維類物質(zhì)的消化作用很小，而Gasaway（1976），Duke等（1984）通過對(duì)采食高纖維日糧的野生禽屬動(dòng)物和家養(yǎng)鳥的觀察表明，盲腸內(nèi)存在微生物對(duì)纖維素的發(fā)酵作用，并且所產(chǎn)生的VFA可以通過盲腸細(xì)胞吸收進(jìn)入體內(nèi)。Parsons等（1983）發(fā)現(xiàn)，飼用由淀粉和纖維素組成的高纖維純化日糧時(shí)，內(nèi)源氨基酸的排泄量顯著增加，Raharjo等（1984a）及Green（1988）亦指出并證實(shí)內(nèi)源氨基酸排泄量隨日糧纖維含量的增加而增加，但其并不是內(nèi)源與分泌增加的結(jié)果，而是未消化氨基酸排泄量增加所致，并且還發(fā)現(xiàn)日糧中纖維素達(dá)12%時(shí)，內(nèi)源氨基酸尚未增加。本試驗(yàn)的結(jié)果與這一論點(diǎn)極為相近。
?3.3 其它因素的影響?
由于雞對(duì)飼料的適應(yīng)期有時(shí)長達(dá)1個(gè)月，所以每期代謝試驗(yàn)的間隔時(shí)間長短很重要。本次試驗(yàn)間隔時(shí)間為3～4天，禁食時(shí)間為48h，所以對(duì)試雞應(yīng)激較大，從測定結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，越是后期未去盲腸雞內(nèi)源性總氨基酸量越高，而且發(fā)現(xiàn)，去盲腸與否對(duì)內(nèi)源排泄量影響較大，影響其因素較復(fù)雜，有待進(jìn)一步探討。?
4 結(jié)論?
從本研究對(duì)不同纖維素水平下內(nèi)源氨基酸排泄量的測定結(jié)果可知，去盲腸雞比未去盲腸雞的內(nèi)源氨基酸排泄量高，并且在低纖維日糧下（3～5%），內(nèi)源氨基酸的排泄量隨纖維含量的增加而降低；在高纖維日糧下（8～11%），內(nèi)源氨基酸的排泄量有所提高，表明纖維素含量的高低可影響內(nèi)源氨基酸的排泄量，利用一定水平的纖維日糧進(jìn)行內(nèi)源氨基酸的測定來校正代謝率，可以排除內(nèi)源對(duì)被測飼料物質(zhì)的影響。本次研究還發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)期和過渡期長短也會(huì)影響內(nèi)源氨基酸的排泄量。?
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參考文獻(xiàn)略
