硒是動物必需的微量元素之一，它與動物生長、發育和疾病發生有著密切的關系。硒以無機硒和有機硒形式存在，無機硒包括亞硒酸鈉、硒酸鈉、硒化鈉、亞硒酸鈣；有機硒包括硒酵母、硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸等。有機硒的生物利用率高于無機硒，易于動物吸收利用，且有機硒毒性小，不會對人和環境造成不良影響[1]。硒與動物的免疫狀況密切相關，被稱為免疫促進劑[5]。硒能刺激免疫球蛋白及抗體的生成，提高機體體液免疫、細胞免疫和非特異免疫功能；缺硒可導致免疫能力低下，而補硒可提高機體免疫力。日前有機硒對促進生長豬免疫機能方面的研究在國內外報道較少，為尋求抗生素替代品，提高生長豬自身免疫力，以生產優質無公害豬肉而開展了本試驗研究，旨在探討有機硒對生長育肥豬免疫性能的影響，為今后指導生產提供參考。
1 試驗材料及方法
1.1 試驗地點及試驗動物
    試驗在河南省黃泛區農場第一種豬場進行。選擇日齡相近、平均體重（30.0±0.5）kg的杜×長×大三元雜交小母豬20頭，隨機分為2個處理，每個處理10頭，對照組為基礎日糧組，處理組為基礎日糧+有機硒（硒酵母0.02%）。
1.2 試驗飼料及飼養管理 
    試驗日糧營養水平采用NRC(1998)標準，飼料配方及營養水平指標見表1。試驗期間試驗豬飼養管理采用常規飼養管理模式，試驗豬按常規飼養管理程序進行驅蟲和免疫，采用干粉料日喂3次，自由采食、自由飲水，豬只發生病變或異常，要及時處理并記錄豬只耳號。

1.3 試驗檢測指標及方法
1.3.1 血液生化指標
    總蛋白(TP)、球蛋白（GLB）、清蛋白（ALB）、計算血清球蛋白與白蛋白的比值（G/A）。
1.3.2 免疫指標
1.3.2.1 體液免疫指標
    使用牛血清白蛋白(BSA)試劑，采用酶聯免疫吸附測定法，在酶聯免疫自動讀數儀492nm處讀數，以1：50倍稀釋光吸收值表示其抗體生成，測定血清中BSA抗體效價(OD值)。
1.3.2.2 細胞免疫指標
    遲發性過敏反應的測定，在生長豬左腿內側皮下注射植物血球凝集素（PHA），右側注射生理鹽水，測定24h后腿皮褶厚度增厚差值。
1.4 試驗處理
    在正式試驗開始后的第7d，每個處理（對照組和處理組）選取3頭體重相近的健康豬，每千克體重耳后肌肉注射牛血清白蛋白(BSA)1mg進行免疫，并在免疫后的0d(試驗的第7d)、7d(試驗第14d)和21d(試驗第28d)用10ml真空采血管頸靜脈采血5ml，3 000r/min離心15min，制備血清，-20℃冰箱保存備用。
    于試驗正式開始后的第14d，對處理組剩余的豬只隨機選取2頭，進行皮膚過敏試驗。其中在1頭豬的左大腿內側腹骨溝皮下注射0.5ml PHA（250μg/ml），右腿注射0.5ml生理鹽水，圈圓圈標記。并分別于注射前和注射24h后用厚度計測定注射部位的皮褶厚度（3次讀數，求平均值），再求出兩腿皮褶增厚的差值，觀察過敏反應程度。另外1頭左腿注射1ml PHA（250μg/ml），右腿注射1ml生理鹽水(其它處理同上1頭豬)，測定24h后皮褶厚度增厚值。
2 試驗結果與分析
2.1 血液生化指標
    分別于正式試驗開始后的第7d、第14d、第28d前腔靜脈采血制備血清，檢測血清中的總蛋白、白蛋白，并計算血清球蛋白與白蛋白比值（G/A），試驗結果見表2。

    血清球蛋白的主要作用是用以維持機體血管內滲透壓的平衡和物質的運輸。抗體是球蛋白重要的組成部分，炎癥反應和應激狀態下，血清球蛋白的含量增加。由表2可見，對照組與處理組豬血清總蛋白含量在試驗1～28d時均有上升趨勢；且對照組上升幅度大于處理組，但統計分析差異不顯著（P<0.05）。在整個試驗期間對照組血清中白蛋白含量上升，而且對照組血清中白蛋白含量高于處理組；處理組豬血清中白蛋白含量在試驗的第14d時稍有下降，而在試驗的第28d時上升。在整個試驗期，處理組和對照組血清中G/A值均表現出先升高后降低的趨勢，同時，在試驗的第7d、第14d、第28d，處理組血清中G/A值均高于對照組，其中第7d和第14d時血清中G/A值統計分析差異達到顯著水平（P<0.05）。本試驗結果表明，在經過抗原牛血清白蛋白刺激后，機體的免疫系統被激活，更多的蛋白質用于抗體的合成，隨著抗體產生量的提高，血液中的球蛋白含量隨之增加，G/A值升高。表明有機硒具有提高生長豬體液免疫的作用。
2.2 牛血清白蛋白（BSA）抗體OD值
    前腔靜脈采取BSA免疫后第0d、第7d、第21d的試驗豬血清，檢測BSA抗體OD值。對照組和處理組的牛血清白蛋白（BSA）抗體OD值結果見表3。

    分析發現，在BSA免疫前，豬血清中已經含有BSA抗體，且變異很大，而試驗設計時認為BSA為一種異源蛋白抗原，豬血清中BSA抗體水平應該為零。估計這種抗體是由于許多疫苗如豬瘟疫苗中含有牛血清白蛋白成分(例如作為佐劑)造成的，而在本試驗開始之前，該豬場已對試驗豬群進行過兩次豬瘟疫苗免疫。盡管如此，當以注射BSA抗體OD值為1時，用各時間點的OD值與之比較，則比值仍可出現較明顯的規律性變化，即免疫后第7d時，BSA抗體的OD值均升高，而且，處理組與對照組相比差異達顯著水平(P<0.05)。免疫后第21d時BSA抗體的OD值均下降，且處理組(有機硒組)下降幅度大于對照組，表明有機硒能被用來合成谷胱甘肽過氧化酶（ＧＳＨ-Ｐｘ）,以消除由于應激而產生的更多自由基(主要是通過降低氧化磷酸化的偶聯作用，導致電子滲透的增加和超氧化基的過量產生)，具有降低免疫反應程度，避免機體長期處于高度應激狀態，從而達到促進動物機體生長的作用。
2.3 皮褶厚度增加值
    分別于正式試驗開始后的第7d、第14d、第28d每個處理隨機選擇1頭豬，在豬的左腿內側肌肉注射植物血球凝集素（PHA）0.5ml，右腿內側注射0.5ml生理鹽水；再另外分別選擇1頭豬，在豬的左腿內側肌肉注射植物血球凝集素1.0ml，右腿內側注射1.0ml生理鹽水，并于24h后用厚度測量儀檢測左、右腿皮褶厚度增加值，計算左右腿24h后皮褶厚度增厚差值，試驗結果見表4。

    PHA是一種促有絲分裂原。動物皮下組織對PHA的反應狀況是細胞免疫的一項指標[6-8]。免疫組織學分析，這種皮下反應的主要參與者為單核細胞和致敏的T淋巴細胞，其反應包括局部發炎感染并向皮下擴散，血管周圍白細胞聚集成套狀、水腫以及皮膚膠原蛋白隆起。由表4可見，試驗組豬PHA注射后24h皮褶厚度增厚值大于對照組（在試驗第14d時，0.5ml PHA注射劑量試驗組豬24h后皮褶厚度增厚值小于對照組，這可能與個體差異有關），并且給試驗豬注射1ml PHA皮褶厚度增厚差值大于注射0.5mlPHA劑量時皮褶增厚差值，表明給生長豬注射PHA 24h后皮褶厚度的增厚差值與注射PHA的劑量有關。同時，本試驗結果顯示，在試驗的第14d時，皮褶增厚差值大于第7d時的皮褶增厚差值，而在試驗的第28d時，皮褶增厚差值又下降，表明隨日齡增加，生長豬機體免疫功能逐漸完善。本試驗結果表明，在生長豬飼料中添加有機硒有提高生長豬細胞免疫的作用。
    綜上所述，有機硒(硒酵母)有提高生長豬血液中G/A值的作用，提高牛血清白蛋白（BSA）免疫抗體OD值（免疫第7d時差異達顯著水平，P<0.05）及植物血球凝集素（PHA）刺激皮褶厚度增加值的作用，即具有提高動物機體免疫性能的能力。

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