隨著奶牛品種的改良、肉牛肥育技術的迅速普及以及近十幾年來山羊絨在國際市場上的走俏,人們加快了反芻動物過瘤胃蛋白質及氨基酸的研究步伐。Marston早在20世紀20年代就發現含硫氨基酸對羊毛生長的重要性,他于1955年指出,含硫氨基酸中一胱氨酸和半胱氨酸是羊毛角蛋白合成的限制性氨基酸。隨后Reis等(1961、1963)研究了補飼和皺胃灌注含硫氨基酸對羊毛生長和組成的影響,并對含硫氨基酸促羊毛生長的機制進行了探討。本文就反芻動物含硫氨基酸過瘤胃保護應用研究做一綜述。
1 反芻動物含硫氨基酸保護的意義和方法原理
含硫氨基酸(SAA)主要指胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸。反芻動物獲得含硫氨基酸有三種途徑。一是來源于日糧蛋白質,日糧蛋白質在瘤胃中可被微生物降解約60%-80 %,僅有20%-40%的蛋白質進入真胃和小腸;二是來源于反芻動物瘤胃硫素再循環,瘤胃微生物利用飼料和唾液中的含硫化合物(包括SAA)經千一磷酸硫酸途徑(ASP)和3一磷酸腺苷5一磷酸硫酸途徑(PM)合成SAA,未被細菌利用的部分含硫化合物則為瘤胃壁迅速吸收,并被氫化為硫酸鹽而分布于血漿和體液中,血漿中的硫酸鹽可經唾液分泌而重新返回瘤胃,開始新的循環而到達大腸;三是反芻動物內源周轉蛋白質中的SAA,內源周轉蛋白質中含有相當數量的 SAA。Nasset (1965)首次發現,動物的小腸食糜中有大量內源蛋白質存在,而且其數量驚人,足可使殘余的外源氨基酸(飼料來源)稀釋79倍。盧德勛(1986)運用多元回歸分析方法,采用連續灌注和雙同位素標記技術(N15和H3)測定了羊消化道內源蛋白質的周轉量,得出相似的結論。
1.1 含硫氨基酸保護的意義 研究表明,即使瘤胃微生物蛋白質合成達到最大程度,但進入小腸的蛋白質和氨基酸仍難以滿足現代高產奶牛的產奶需要,必需增加進入小腸的真蛋白質和氨基酸的量。這就需要對過瘤胃蛋白質采取保護措施,而蛋白質的過瘤胃保護存在諸多的局限性。因此,人們把研究的重點轉移到過瘤胃氨基酸保護上。許多資料表明,含硫氨基酸在反芻動物生產中具有重要作用,可使奶牛增加奶產量,提高奶中乳蛋白、總固形物比例;可提高肉牛日增重(ADG)和飼料轉化效率(FCR);綿羊補飼含硫氨基酸可提高目增重、羊毛生長速度;可提高山羊口增重和絨的含流水平。
在SAA 來源的前兩個途徑中,由于瘤胃微生物對飼料蛋白質中SAA的利用,導致進入真胃和小腸的過瘤胃SAA數量減少,大大降低了其生物學效價。為了防止SAA在瘤胃內被微生物降解而降低其生物學效價,使之能被反芻動物充分吸收利用,眾多學者對SAA過瘤胃保護(RPSAA)技術進行了探討。
1.2 SAA保護方法原理 過瘤胃保護性氨基酸又稱瘤胃分路氨基酸,就是將AA以某種方式修飾或保護起來,以免在瘤胃內被微生物降解。這類AA產品應公認安全,AA必須是限制性氨基酸,在小腸中能夠被有效吸收。AA過瘤胃保護原理根據保護方法可分為以下幾類:
第一類為氨基酸類似物、衍生物、聚合物。此類保護性SAA主要是蛋氨酸羥基類似物(MHA)和液體蛋氨酸羥基類似物(DL-2一羥基一4一甲硫丁酸棗HMB)。液體HMB目前用作包被或微囊蛋氨酸的替代品,HMB的鈣鹽即MⅡA,已得到廣泛研究。此法的氨基酸過瘤胃保護原理是,當MIM經過瘤胃時其羥基分解變成氨基,完成從類似物到蛋氨酸的轉變,從而達到過瘤胃保護的效果,使蛋氨酸可順利通過瘤胃到達后腸段消化道,極反芻動物消化利用,其保護率可達80 %。
第二類為包被氨基酸,也稱為包衣氨基酸(RPAA)。此法一是用脂肪酸/pH敏感聚合物的混合物進行表面包被;二是使用含脂肪或飽和脂肪酸及礦物質混合物作表面涂層或基質。另外,氨基酸螫合物也是RPAA的來源。
Rogffi試驗表明:蛋氨酸和賴氨酸的膠囊包被在pH值為5.4時穩定性可達94%,在模擬的腸道環境中(pH=2.9)兩種氨基酸的釋放率為94%。ASh等(1987)將DL一蛋氨酸、高熔點的牛脂(硬脂酸甘油酯)和高嶺土(膨潤土)按2:7(Sib一bald等 1968采用 2: 6: 2)的比例在 60℃下混合,然后將所得混合物放在冷凍機中凝固,在飼喂前用粉碎機將混合物粉碎,再在攪拌機中和糖蜜混合作成飼料飼喂動物。其過瘤胃原理是利用瘤胃pH 值為6左右和皺胃pH值為2左右的差別,選擇中性環境中較穩定而在酸性條件下容易分解的材料包埋氨基酸,被包埋的氨基酸在瘤胃中不能被消化利用,而在真胃中能被消化利用。
根據氨基酸螫合物可提高礦物質的生物利用率這一原理,人們還成功地制造了蛋氨酸鋅和賴氨酸鋅作為RPAA的來源。
第三類為氨基酸真胃灌注。即通過真胃瘺管將SAA一次或連續灌入反芻動物真胃(十二指腸)中的方法,也稱之為完全過瘤胃方法,目的是使SAA完全避開瘤胃微生物的作用而直接到達后腸段消化道。
2 SAA過瘤胃保護的特點
SAA經過瘤胃保護處理后絕大部分可安全通過瘤胃進人后腸段消化道,為反芻動物消化吸收。其各類保護方法各有特點。由于胱氨酸和半胱氨酸保護價格昂貴,因此SAA的保護主要集中在蛋氨酸上。
蛋氨酸羥基類似物(MHA)、衍生物和聚合物可安全通過瘤胃,針對瘤胃與皺胃pH的差異,實現過瘤胃后才開始釋放SAA。這種包被的氨基酸產品有很高的過瘤胃率,是提高過瘤胃蛋氨酸量的有效方法。由于包被層依賴于嚴格的pH值,這些產品與青貯料混合使用時會降低其有效性,而且在瘤胃pH值較低的飼養條件下(如高精料日糧),這類產品的利用受到限制。目前應用最有前途的是包衣蛋氨酸產品,該技術將工藝和材料相結合,對蛋氨酸進行包被或基埋,可較好地防瘤胃降解,在小腸中有很好的釋放性。此類產品利用了反芻動物不同消化部位pH值生理條件的差別而設計,產品在PH為5. 4左右的瘤胃環境內是穩定的,到達真胃后,在pH為2.4的條件下,依靠小腸消化酶的作用,蛋氨酸可游離出來被動物吸收利用。這種過瘤胃蛋氨酸產品的缺陷是在痛胃內僅有部分穩定,過瘤胃后氨基酸的釋放也較少,蛋氨酸的表觀生物效價(過瘤胃率X小腸釋放率)要比利用聚合物包被的蛋氨酸的過瘤胃率低。
蛋氨酸金屬螫合物產品穩定性高,能完好地通過瘤胃,并在小腸被直接吸收,不僅可以提供必需的氨基酸,同時也是一種安全有效的微量元素補充的方法。但是這種產品易引起日糧高鋅,當添加典型水平的氨基酸螫合鋅時,日糧中鋅的濃度有時會高于正常水平10-20倍;另外蛋氨酸鋅成本較高,限制了其廣泛應用。
真胃灌注法,由于受方法可操作性的限制,因此只能用來作研究的試驗手段,無法應用于大規模實際生產。
3 過瘤胃SAA(RPSAA)應用研究進展
3.l 奶牛過瘤胃保護蛋氨酸可以提高乳蛋白的合成,但對奶產量、乳脂肪量、乳脂率和4%FCM的影響結論不一。MHA在低粗纖維飼糧中,能提高乙酸與丙酸比例,產奶量提高12%-18%。肖定漢(1992)通過給奶牛飼喂保護性蛋氨酸,結果顯示奶產量增加4 %-8%,牛奶蛋白質增加 14 %。據美國《乳業學報》報道,當奶牛的基礎日糧以玉米為主時,蛋氨酸和賴氨酸是酪蛋白合成的限制性氨基酸,過瘤胃蛋氨酸(RPMet)和過瘤胃賴氨酸(RPha)可增加氨基酸在小腸的吸收,促進乳蛋白的合成,但對其他指標無影響。Ymp等(1986)用以玉米青貯、首豬草粉為基礎的日糧添加包被蛋氨酸飼喂奶牛后,得到與前者完全不同的結論。這很可能是由于日糧蛋白質來源及特性不同造成的。大量的研究證明,日糧蛋白質來源及特性是決定進入動物十二指腸氨基酸數量和組成的重要因素(Cecava等,1990;Wlllns等,1991;Me。hen等,1992)。
奶牛日糧中添加過瘤胃保護蛋氨酸還可以提高血液蛋氨酸水平(Rog6。等,1986),同時添加RPMet和RPlys效果更佳。這可能與奶牛的第一限制性氨基酸是蛋氨酸,第二限制性氨基酸為賴氨酸,賴氨酸能促進奶牛對蛋氨酸的利用有關。蛋氨酸鋅已成功作為過瘤胃蛋氨酸的來源,可以提高奶牛泌乳量;而且也用于提高礦物質的生物利用率,提高動物機體免疫機能和降低奶中體細胞數(Spears,1996)。
3.2肉牛和犢牛在育肥牛飼料中添加蛋氨酸鋅,牛口增重提高3.23 %,飼料轉化率提高3.87%,服體品質明顯改善。閹牛飼喂蛋氨酸鋅,肌肉大理石紋評分較高,皮下脂肪較多,腎、骨盆和心臟的脂肪比對照組提高10. 5%。黃牛飼用蛋氨酸鋅效果更明顯,在基礎口糧中添加 500 g蛋氨酸鋅,試驗期 60 d,比對照組提高增重 20.7 %,飼料轉化效率提高15.93%。犢牛日糧中添加MHA,日增重提高11%。
3.3 綿羊和山羊綿羊皺胃灌注及十二指腸灌注蛋氨酸可促進羊毛生長,提高血漿蛋氨酸水平(Munneks,1991)。Reis (1988,1990)研究表明,經瘦管向綿羊皺胃灌注蛋氨酸(2 g/d)和等摩爾高半眈氨酸時,其凈毛生長為處理前的157 %和167%。給美利奴羊皺胃灌注5種(28 g/d)或 10種EAA(都含有 3 g DL一蛋氨酸),可使羊毛產量分別比對照組增加 48%和 86%。在綿羊日糧中添加包被的蛋氨酸可促進羊毛生長,提高日增重和血漿氨基酸水平,還能改善羊毛的理化性能。在美利奴羊日糧中添加 MHA和包被的蛋氨酸,結果凈毛率分別比對照組提高19.0%和 17.5%。斯欽(1993)用棕桐油和動物油包被的蛋氨酸對綿羊進行補飼結果顯示,可提高血漿FAA和跳氨酸含量,明顯提高了日增重和羊毛生長速度。
日糧中添加保護蛋氨酸在山羊的試驗中也得到很好的結果。Sendal指出,保護蛋氨酸可顯著增加山羊體內的N沉積量和體蛋白的合成量。
4 過瘤胃合流氨基酸保護應用研究展望
大量的資料顯示,使用RPMet可以提高奶產量,改善奶牛健康;綿羊補充RPMet可顯著加快羊毛生長和提高羊毛產量。因此,今后如果能在SAA的最佳包被處理方法、氨基酸復合制品的利用及補飼方法等方面進行更深入的研究,并及時地應用于反芻動物生產,必然會給飼養業帶來巨大的經濟效益。