摘要：本研究采用Sibbald強飼快速法，應用去盲腸手術公雞，測定并比較了不同纖維素水平下的內源氨基酸排泄量。結果表明，隨著日糧中纖維素含量的增加，雞對纖維素的消化率下降；去盲腸后，低纖維素的消化率降低，而對高纖維日糧的纖維素消化率無影響，去盲腸對低纖維日糧中纖維素消化率影響較大。由此說明，內源排泄量的多少取決于日糧纖維素水平，內源排泄量的測定及校正應采用一定水平的纖維素日糧。?
關鍵詞：纖維素；內源氨基酸排泄量；去盲腸公雞
內源分泌量的測定是氨基酸代謝率測定中爭論最多的問題，很多因素諸如：試驗動物、飼料類型、環(huán)境溫度盲腸微生物、排泄物收集時間等都會影響內源氨基分泌量。最新的研究表明，其主要的因素是纖維和蛋白質，即日糧組成對內源排泄量有影響。為避免上述問題的發(fā)生，最好的辦法是使用標準化的測定技術，但目前尚為見到有關內源排泄量測定方法的技術規(guī)范和明確標準。
1 材料與方法?
1.1 試驗動物?
采用36周齡健康的星雜579公雞6羽，按體重分為兩組，每組3羽，于代謝籠中單個飼養(yǎng)，自由飲水，其中一組公雞在26周齡切除盲腸。術后試雞恢復4周，于試驗前2周在肛門處縫合一個100ml塑料瓶蓋，以便試驗期內收集試雞的排泄物。?
1.2 去盲腸手術?
術前對試雞饑餓24h，仰臥保定，拔掉腹部龍骨至泄殖腔偏左處4×4cm?2左右范圍的雞毛，經消毒后在龍骨下端切開皮膚約3cm，分離皮下脂肪組織和腹肌，暴露出肌胃和十二指腸，將兩條盲腸拉出腹腔，剪斷盲腸，荷包縫合，消毒后按50萬單位/羽注入青霉素和鏈霉素，同時飲喂ORS口服液和多維葡萄糖。?
1.3 試驗方法?
試驗采用改良的Sibbald“TME”法，將3羽雞去盲腸，并將6羽雞分為兩組，每次測定一個樣品，試驗程序為：禁食48h→強飼30g被測飼料→收集 48h排泄物→喂基礎日糧4d→做下一次試驗，把每羽雞收集的排泄物在65℃鼓風烘箱中烘干，回潮24h后稱重，每羽雞的排泄物粉碎制成一個樣品供分析氨基酸等。?
1.4 試驗日糧?
試驗日糧分基礎日糧和纖維日糧（由豌豆淀粉和纖維素組成）兩種，按纖維素含量分為5種，即N、N1、N2、N3、N4，其纖維素含量分別為0、3%、5%、8%、11%。?
1.5 樣品分析?
氨基酸含量用日立835-50型高速氨基酸自動分析儀分析。?
1.6 結果計算和統(tǒng)計分析方法?
各組內源氨基酸排泄量用平均的標準差表示。
2 結果與分析?
2.1 纖維素水平的影響?
不同纖維素水平下的內源氨基酸排泄量結果見表1。?
表1不同纖維素水平內源氨基酸排泄量（mg/48h）
成分 N N1 N2 N3 N4
正常 去盲腸 正常 去盲腸 正常 去盲腸 正常 去盲腸 正常 去盲腸
ASP 66.40±13.27 60.17±15.27 53.20±3. 4 0 56.77±13.80 55.77±4.66 58.07±4.99 47.93±6.55 48.33±10.96 56.57±17.27 57.13±9.92
THR 43.17±10.17 48.43±9.31 32.30±4.60 40.50±10.24 36.77±9.70 44.13±2.93 32.83±2.35 35.47±7.25 35.50±8.85 43. 23±9.25
SER 35.30±8.92 35.73±7.73 26.60±3.60 33.53±9.00 35.53±10.28 35.00±2.25 24.73±4.15 28.77±5.40 30.67±6.64 35.23±5.97
GLU 86.83±14.23 74.10±15.60 73.70±4.40 78.47±19.01 78.47±19.81 79.50±3.90 64.93±9.55 66.63±11.88 79.57±21.39 76.60 ±9.90
GLY 129.40±7.86 152.93±35.34 135.50±7.20 203.30±86.23 1 04.87±34.53 148.30±85.28 96.93±27.28 126.23±47.68 150.53±10.71 126.07±28.15
ALA 42.23±5.42 37.37±8.60 39.60±3.70 38.87±10.26 39.63±10.30 39.00±2.14 31.73±5.40 32.23±6.25 38.17±12.48 37.33±7 .11
VAL 49.40±9.44 49.93±12.91 42.47±4.27 49.20±13.64 48.33±12.09 51.60±5.10 39.07±4.20 41.13±9.00 42.60±10.06 46.43±8.79
MET 23.67±3.84 33.20±3.90 15.37±2.40 23.47±7.13 21.73±1.72 28.10±7.02 21.70±1.41 25.33±6.92 22.37±2.47 28.27±10.00
ILE 32.13±6.99 28.30±6.09 27.77±1.72 28.77±7.90 29.33±7.99 28.27±1.40 22.07±4.20 22.33±4.52 26.30±8.88 28.60±5.51
LEU 49.27±11.90 44.30±10.17 39.60±3.66 40.70±12.10 41.8 3±12.46 40.87±3.70 31.33±5.96 33.23±7.00 39.47±14.32 42.80±7.47
TYR 26.97±6.81 26.33±6.77 24.90±2.07 26.17±8.26 23.97±7.80 22.70±3.95 17.07±3.14 18.10±5.05 21.50±7.74 24.17±4.32
PHE 36.53±10.12 32.93±7.48 30.00±2.29 34.23±10.21 35.03±7.65 33.83±4.07 28.27±5.01 31.00±6.16 34.27±7.77 34.23±3.3 4
LYS 40.00±8.35 34.33±8.50 36.17±2.80 47.20±20.70 37.97±8.25 48.27±13.79 29.80±3.68 34.30±10.05 35.07±8.46 33.90±3 .77
HIS 9.47±2.37 9.03±2.68 6.73±1.26 8.60±2.95 6.17±0.45 9.00±2.35 5.43±0.61 7.53±2.29 7.53±1.65 9.60±3.41
ARG 29.17±7.22 21.63±4.76 24.90±2.07 33.50±14.53 25.33±8.57 28.83±5.43 18.97±4.86 21.93±4.75 25.87±7.57 24.10±2.91
PRO 32.80±6.41 34.80±6.22 27.20±4.87 33.17±7.56 34.83±12.13 35.37±2.65 25.53±1.97 27.87±2.73 30.13±5.40 31.57±4.58
CYS 32.60±4.24 36.50±11.07 22.00±1.47 28.80±7.72 27.33 ±12.12 24.17±2.97 29.00±2.36 31.10±10.24 33.70±4.65 33.90±3.77
ΣAA 752.01 765.70 665.61 805.33 682.92 747.09 567.42 631.51 709.82 713.24
注：各組內源氨基酸值均為風干樣中含量?
2.2 試驗期的延長對內源排泄量的影響?
本次試驗安排的代謝試驗程序為：N1→N2→N3→N4→N。從內源氨基酸排泄量測定結果看出，隨代謝試驗期的延長，越到后期未去盲腸雞內源氨基酸排泄量越高，第一期內源總氨基酸排泄量為：665.61mg/48h，最后一期為：765.70mg/48h;但去盲腸雞則不呈現(xiàn)規(guī)律，第一期為：805.33mg/48h，最后一期為：752.81mg/48h。
3 討論?
3.1 內源排泄量測定方法的應用?
Sibbald（1979）提出的用饑餓法測“TME”值，雖具有測試時間短，不受試驗家禽的性別、種類、年齡以及采食量等因素的影響的優(yōu)點，但未考慮不同飼料在家禽體內通過的時間的不一致性，而且這些因素直接影響內源排泄物的數(shù)量和質量，F(xiàn)arrell（1982）雖提出不同看法，并根據(jù)其理論提出新方法，但其論點仍未解決如何排除內源排泄物對代謝物質的干擾問題。Parsons等（1983）的研究結果顯示，無氮日糧的實際組成會影響內源氨基酸的排泄，因為從最基本的生理角度講，飼喂無蛋白日糧都要比長期禁食好得多。內源排泄量可能是不同飼料的固有特點，因此，利用禁食或無氮日糧測得的內源排泄量來校正某待測飼料的真消化率顯然不適合，內源排泄量取決于日糧纖維水平。?
3.2纖維日糧對消化代謝率的影響?
影響內源排泄量的因素很多，其主要因素是纖維和蛋白質，Halnan（1949），Anderson等（1958）的早期研究表明，盲腸對纖維類物質的消化作用很小，而Gasaway（1976），Duke等（1984）通過對采食高纖維日糧的野生禽屬動物和家養(yǎng)鳥的觀察表明，盲腸內存在微生物對纖維素的發(fā)酵作用，并且所產生的VFA可以通過盲腸細胞吸收進入體內。Parsons等（1983）發(fā)現(xiàn)，飼用由淀粉和纖維素組成的高纖維純化日糧時，內源氨基酸的排泄量顯著增加，Raharjo等（1984a）及Green（1988）亦指出并證實內源氨基酸排泄量隨日糧纖維含量的增加而增加，但其并不是內源與分泌增加的結果，而是未消化氨基酸排泄量增加所致，并且還發(fā)現(xiàn)日糧中纖維素達12%時，內源氨基酸尚未增加。本試驗的結果與這一論點極為相近。
?3.3 其它因素的影響?
由于雞對飼料的適應期有時長達1個月，所以每期代謝試驗的間隔時間長短很重要。本次試驗間隔時間為3～4天，禁食時間為48h，所以對試雞應激較大，從測定結果也發(fā)現(xiàn)，越是后期未去盲腸雞內源性總氨基酸量越高，而且發(fā)現(xiàn)，去盲腸與否對內源排泄量影響較大，影響其因素較復雜，有待進一步探討。?
4 結論?
從本研究對不同纖維素水平下內源氨基酸排泄量的測定結果可知，去盲腸雞比未去盲腸雞的內源氨基酸排泄量高，并且在低纖維日糧下（3～5%），內源氨基酸的排泄量隨纖維含量的增加而降低；在高纖維日糧下（8～11%），內源氨基酸的排泄量有所提高，表明纖維素含量的高低可影響內源氨基酸的排泄量，利用一定水平的纖維日糧進行內源氨基酸的測定來校正代謝率，可以排除內源對被測飼料物質的影響。本次研究還發(fā)現(xiàn)試驗期和過渡期長短也會影響內源氨基酸的排泄量。
關鍵詞：纖維素；內源氨基酸排泄量；去盲腸公雞
內源分泌量的測定是氨基酸代謝率測定中爭論最多的問題，很多因素諸如：試驗動物、飼料類型、環(huán)境溫度盲腸微生物、排泄物收集時間等都會影響內源氨基分泌量。最新的研究表明，其主要的因素是纖維和蛋白質，即日糧組成對內源排泄量有影響。為避免上述問題的發(fā)生，最好的辦法是使用標準化的測定技術，但目前尚為見到有關內源排泄量測定方法的技術規(guī)范和明確標準。
1 材料與方法?
1.1 試驗動物?
采用36周齡健康的星雜579公雞6羽，按體重分為兩組，每組3羽，于代謝籠中單個飼養(yǎng)，自由飲水，其中一組公雞在26周齡切除盲腸。術后試雞恢復4周，于試驗前2周在肛門處縫合一個100ml塑料瓶蓋，以便試驗期內收集試雞的排泄物。?
1.2 去盲腸手術?
術前對試雞饑餓24h，仰臥保定，拔掉腹部龍骨至泄殖腔偏左處4×4cm?2左右范圍的雞毛，經消毒后在龍骨下端切開皮膚約3cm，分離皮下脂肪組織和腹肌，暴露出肌胃和十二指腸，將兩條盲腸拉出腹腔，剪斷盲腸，荷包縫合，消毒后按50萬單位/羽注入青霉素和鏈霉素，同時飲喂ORS口服液和多維葡萄糖。?
1.3 試驗方法?
試驗采用改良的Sibbald“TME”法，將3羽雞去盲腸，并將6羽雞分為兩組，每次測定一個樣品，試驗程序為：禁食48h→強飼30g被測飼料→收集 48h排泄物→喂基礎日糧4d→做下一次試驗，把每羽雞收集的排泄物在65℃鼓風烘箱中烘干，回潮24h后稱重，每羽雞的排泄物粉碎制成一個樣品供分析氨基酸等。?
1.4 試驗日糧?
試驗日糧分基礎日糧和纖維日糧（由豌豆淀粉和纖維素組成）兩種，按纖維素含量分為5種，即N、N1、N2、N3、N4，其纖維素含量分別為0、3%、5%、8%、11%。?
1.5 樣品分析?
氨基酸含量用日立835-50型高速氨基酸自動分析儀分析。?
1.6 結果計算和統(tǒng)計分析方法?
各組內源氨基酸排泄量用平均的標準差表示。
2 結果與分析?
2.1 纖維素水平的影響?
不同纖維素水平下的內源氨基酸排泄量結果見表1。?
表1不同纖維素水平內源氨基酸排泄量（mg/48h）
成分 N N1 N2 N3 N4
正常 去盲腸 正常 去盲腸 正常 去盲腸 正常 去盲腸 正常 去盲腸
ASP 66.40±13.27 60.17±15.27 53.20±3. 4 0 56.77±13.80 55.77±4.66 58.07±4.99 47.93±6.55 48.33±10.96 56.57±17.27 57.13±9.92
THR 43.17±10.17 48.43±9.31 32.30±4.60 40.50±10.24 36.77±9.70 44.13±2.93 32.83±2.35 35.47±7.25 35.50±8.85 43. 23±9.25
SER 35.30±8.92 35.73±7.73 26.60±3.60 33.53±9.00 35.53±10.28 35.00±2.25 24.73±4.15 28.77±5.40 30.67±6.64 35.23±5.97
GLU 86.83±14.23 74.10±15.60 73.70±4.40 78.47±19.01 78.47±19.81 79.50±3.90 64.93±9.55 66.63±11.88 79.57±21.39 76.60 ±9.90
GLY 129.40±7.86 152.93±35.34 135.50±7.20 203.30±86.23 1 04.87±34.53 148.30±85.28 96.93±27.28 126.23±47.68 150.53±10.71 126.07±28.15
ALA 42.23±5.42 37.37±8.60 39.60±3.70 38.87±10.26 39.63±10.30 39.00±2.14 31.73±5.40 32.23±6.25 38.17±12.48 37.33±7 .11
VAL 49.40±9.44 49.93±12.91 42.47±4.27 49.20±13.64 48.33±12.09 51.60±5.10 39.07±4.20 41.13±9.00 42.60±10.06 46.43±8.79
MET 23.67±3.84 33.20±3.90 15.37±2.40 23.47±7.13 21.73±1.72 28.10±7.02 21.70±1.41 25.33±6.92 22.37±2.47 28.27±10.00
ILE 32.13±6.99 28.30±6.09 27.77±1.72 28.77±7.90 29.33±7.99 28.27±1.40 22.07±4.20 22.33±4.52 26.30±8.88 28.60±5.51
LEU 49.27±11.90 44.30±10.17 39.60±3.66 40.70±12.10 41.8 3±12.46 40.87±3.70 31.33±5.96 33.23±7.00 39.47±14.32 42.80±7.47
TYR 26.97±6.81 26.33±6.77 24.90±2.07 26.17±8.26 23.97±7.80 22.70±3.95 17.07±3.14 18.10±5.05 21.50±7.74 24.17±4.32
PHE 36.53±10.12 32.93±7.48 30.00±2.29 34.23±10.21 35.03±7.65 33.83±4.07 28.27±5.01 31.00±6.16 34.27±7.77 34.23±3.3 4
LYS 40.00±8.35 34.33±8.50 36.17±2.80 47.20±20.70 37.97±8.25 48.27±13.79 29.80±3.68 34.30±10.05 35.07±8.46 33.90±3 .77
HIS 9.47±2.37 9.03±2.68 6.73±1.26 8.60±2.95 6.17±0.45 9.00±2.35 5.43±0.61 7.53±2.29 7.53±1.65 9.60±3.41
ARG 29.17±7.22 21.63±4.76 24.90±2.07 33.50±14.53 25.33±8.57 28.83±5.43 18.97±4.86 21.93±4.75 25.87±7.57 24.10±2.91
PRO 32.80±6.41 34.80±6.22 27.20±4.87 33.17±7.56 34.83±12.13 35.37±2.65 25.53±1.97 27.87±2.73 30.13±5.40 31.57±4.58
CYS 32.60±4.24 36.50±11.07 22.00±1.47 28.80±7.72 27.33 ±12.12 24.17±2.97 29.00±2.36 31.10±10.24 33.70±4.65 33.90±3.77
ΣAA 752.01 765.70 665.61 805.33 682.92 747.09 567.42 631.51 709.82 713.24
注：各組內源氨基酸值均為風干樣中含量?
2.2 試驗期的延長對內源排泄量的影響?
本次試驗安排的代謝試驗程序為：N1→N2→N3→N4→N。從內源氨基酸排泄量測定結果看出，隨代謝試驗期的延長，越到后期未去盲腸雞內源氨基酸排泄量越高，第一期內源總氨基酸排泄量為：665.61mg/48h，最后一期為：765.70mg/48h;但去盲腸雞則不呈現(xiàn)規(guī)律，第一期為：805.33mg/48h，最后一期為：752.81mg/48h。
3 討論?
3.1 內源排泄量測定方法的應用?
Sibbald（1979）提出的用饑餓法測“TME”值，雖具有測試時間短，不受試驗家禽的性別、種類、年齡以及采食量等因素的影響的優(yōu)點，但未考慮不同飼料在家禽體內通過的時間的不一致性，而且這些因素直接影響內源排泄物的數(shù)量和質量，F(xiàn)arrell（1982）雖提出不同看法，并根據(jù)其理論提出新方法，但其論點仍未解決如何排除內源排泄物對代謝物質的干擾問題。Parsons等（1983）的研究結果顯示，無氮日糧的實際組成會影響內源氨基酸的排泄，因為從最基本的生理角度講，飼喂無蛋白日糧都要比長期禁食好得多。內源排泄量可能是不同飼料的固有特點，因此，利用禁食或無氮日糧測得的內源排泄量來校正某待測飼料的真消化率顯然不適合，內源排泄量取決于日糧纖維水平。?
3.2纖維日糧對消化代謝率的影響?
影響內源排泄量的因素很多，其主要因素是纖維和蛋白質，Halnan（1949），Anderson等（1958）的早期研究表明，盲腸對纖維類物質的消化作用很小，而Gasaway（1976），Duke等（1984）通過對采食高纖維日糧的野生禽屬動物和家養(yǎng)鳥的觀察表明，盲腸內存在微生物對纖維素的發(fā)酵作用，并且所產生的VFA可以通過盲腸細胞吸收進入體內。Parsons等（1983）發(fā)現(xiàn)，飼用由淀粉和纖維素組成的高纖維純化日糧時，內源氨基酸的排泄量顯著增加，Raharjo等（1984a）及Green（1988）亦指出并證實內源氨基酸排泄量隨日糧纖維含量的增加而增加，但其并不是內源與分泌增加的結果，而是未消化氨基酸排泄量增加所致，并且還發(fā)現(xiàn)日糧中纖維素達12%時，內源氨基酸尚未增加。本試驗的結果與這一論點極為相近。
?3.3 其它因素的影響?
由于雞對飼料的適應期有時長達1個月，所以每期代謝試驗的間隔時間長短很重要。本次試驗間隔時間為3～4天，禁食時間為48h，所以對試雞應激較大，從測定結果也發(fā)現(xiàn)，越是后期未去盲腸雞內源性總氨基酸量越高，而且發(fā)現(xiàn)，去盲腸與否對內源排泄量影響較大，影響其因素較復雜，有待進一步探討。?
4 結論?
從本研究對不同纖維素水平下內源氨基酸排泄量的測定結果可知，去盲腸雞比未去盲腸雞的內源氨基酸排泄量高，并且在低纖維日糧下（3～5%），內源氨基酸的排泄量隨纖維含量的增加而降低；在高纖維日糧下（8～11%），內源氨基酸的排泄量有所提高，表明纖維素含量的高低可影響內源氨基酸的排泄量，利用一定水平的纖維日糧進行內源氨基酸的測定來校正代謝率，可以排除內源對被測飼料物質的影響。本次研究還發(fā)現(xiàn)試驗期和過渡期長短也會影響內源氨基酸的排泄量。
