摘 要:本試驗旨在研究兩種鉻源對熱應激肉雞抗氧化能力的影響。選擇15日齡AA肉仔雞180只,隨機分為3組,1組高溫不加鉻(對照組),2組高溫加酵母鉻,3組高溫加煙酸鉻,鉻添加量為3mg/kg,試驗期4周(15~42d)。結果表明:日糧中添加3 mg/kg鉻,顯著降低了28d、42d 丙二醛和過氧化氫的含量(P<0.05),提高了抗超氧陰離子能力、總抗氧化能力及谷胱甘肽過氧化物酶的活性(P<0.05),顯著提高了28d超氧化物歧化酶活性(P<0.05),但對42d超氧化物歧化酶活性無顯著影響(P>0.05)。因此,熱應激狀態下,日糧中添加鉻可減少脂質過氧化反應、降低過氧化產物生成、提高熱應激肉雞抗氧化能力,但兩種鉻源之間差異不顯著。
關鍵詞:鉻;熱應激;抗氧化;肉雞
肉雞對溫度非常敏感,適宜生產溫度為19~26℃,當環境溫度超過28℃時,其在生產性能、生理機能等方面會受到明顯的不良影響,生產者必須采取各種不同的措施來減少熱應激所帶來的損失。為了緩解或解除熱應激對肉雞的不良影響,除了改善飼養管理和環境外,更重要的是通過營養調控措施來緩解熱應激,提高生產效益。鉻是動物體內必需的微量元素,于1797年被Louis Vauquelin 首次發現,直到1955年,Mertz和Schwars用大鼠試驗證明,鉻是大鼠葡萄糖利用的必須產物,人們才真正認識到鉻的營養作用。近幾年的研究證實,日糧中添加鉻可有效緩解熱應激引起的生產性能下降,提高免疫力。王剛等(2003)研究表明,日糧中添加鉻元素,可改善肉雞生產性能和酮體品質。羅緒剛等(1999)研究表明三價鉻可有效提高飼養肉仔雞的免疫功能。而鉻對熱應激肉雞抗氧化性能影響的研究鮮有報道。本試驗通過向日糧中添加3mg/kg鉻(前期試驗篩選),研究了兩種鉻源對肉雞抗氧化性能的影響,為鉻在生產實際中的應用提供理論依據。
1 材料與方法
1.1 試驗動物及分組
選擇1日齡AA肉仔雞預試兩周后,選擇180只健康、體重相近的肉仔雞,隨機分為3組,每組6個重復,每個重復10只雞。1組為高溫不加鉻組(對照組),2組為高溫加酵母鉻組,3組為高溫加煙酸鉻組,鉻添加量為3mg/kg。酵母鉻鉻含量為1 000mg/kg,煙酸鉻鉻含量為400mg/kg。預試期兩周(1~14d),正試期4周(15~42d)。
1.2 飼養管理
進雛前搞好消毒工作:進雛前7d,沖洗地面、墻壁及育雛設備;進雛前5d,甲醛熏蒸消毒,按每立方米空間30mL甲醛、15g高錳酸鉀對雞舍進行熏蒸,密閉24h。在人工氣候試驗室內進行試驗。高溫模型的建立:每天上午7:30開始升溫,到9:00升至35℃左右,從9:00~17:00維持35±2℃ 8h,19:00降溫至28℃左右,直至次日清晨7:00,溫度維持在28±2℃,相對濕度60%~70%。試驗雞采用籠養方式,自由采食和飲水,按常規進行免疫,預試2周后,進入正試期,定期清理糞便,1~2周齡24h連續光照,以后逐漸過渡為自然光照。用干濕球溫度計記錄雞舍內溫度和濕度,每天記錄3次,分別為上午8:00、下午14:00和晚上20:00。
1.3 基礎日糧組成及營養水平
基礎日糧以玉米和豆粕為主要原料,參照NRC(1994)和中國肉仔雞飼養標準配制。全期分為0~21日齡、22~42日齡兩個飼養階段。兩階段基礎日糧組成和營養水平見表1。
表1 基礎日糧組成及營養水平 %
0~21日齡 | 22~42日齡 | |
玉米 豆粕 魚粉 石粉 磷酸氫鈣 食鹽 油 預混料 ME/(MJ/kg) CP Ca P Lys Met Cr/(mg/kg)a |
57.9 32.0 3.0 0.9 1.4 0.3 3.5 1.0 12.47 20.62 0.97 0.50 1.05 0.36 0.673 |
62.3 28.8 2.0 0.9 1.4 0.3 3.3 1.0 12.59 19.0 0.89 0.46 0.94 0.33 0.785 |
預混料組成(每千克飼料中):0~3w,Mn 66mg;Zn 44mg;Cu 9mg;Fe 50mg;I 0.4mg;VA 8 000IU;VD3 1 000IU;VE 30IU;VK3 1mg; VB1 1mg; VB2 5.5mg; D-泛酸鈣 12mg;煙酸 50mg;VB6 2.5mg;VB12 0.6mg。4~6w,Mn 66mg;Zn 44mg;Cu 9mg;Fe 50mg;I 0.4mg;VA 7 000IU;VD3 875IU;VE 20IU;VK3 1mg;VB1 2mg;VB2 4.5mg;D-泛酸鈣 12mg;煙酸 50mg;VB6 2.5mg;VB12 0.6mg。
a:實測值。
1.4 試驗方法與指標測定
應用紫外分光光度法測定過氧化氫(H2O2)、化學比色法測定超氧陰離子(O2- ·)、硫代巴比妥酸(TBA)法測定丙二醛(MDA)、黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶(SOD)、比色法測定總抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽過氧化物酶的活性(GSH-Px)。
以上試劑盒均由南京市建成生物工程研究所提供。
1.5 統計分析
統計數據利用Excel表和SAS8.1軟件方差分析過程(ANOVA)進行,試驗數據以 “平均數±標準差”表示。
2 結果與分析
2.1 對熱應激肉雞血清中H2O2、MDA、O2- ·含量的影響
由表2可知,日糧中添加鉻顯著降低了28d、42d熱應激肉雞血清中H2O2、MDA的含量(P<0.05),顯著提高了抗超氧陰離子的能力(P<0.05);兩種鉻源之間差異不顯著(P>0.05)。
表2 兩種鉻源對熱應激肉雞血清中H2O2、MDA、O2- ·含量的影響
日齡 |
組別 |
H2O2/(mmol/mL) |
MDA/(nmol/mL) |
O2- ·/(U/mL) |
|
1 |
87.17±37.53a |
2.35±0.74a |
84.27±12.43b |
注:同列間標字母相同、相鄰和相隔分別表示差異不顯著(P>0.05)、顯著(P<0.05)和極顯著(P<0.01)。下同。
2.2 對熱應激肉雞血清中SOD、T-AOC、GSH-Px活性的影響
由表3可知,日糧中添加鉻顯著提高了28d、42d T-AOC、GSH-Px的活性(P<0.05),顯著提高了28d SOD的活性(P<0.05),對42d SOD活性無顯著性影響(P>0.05);兩種鉻源之間差異不顯著(P>0.05)。
表3 兩種鉻源對熱應激肉雞血清中T-AOC、SOD、GSH-Px活性的影響
日齡 |
組別 |
T-AOC/(U/mL) |
SOD/(U/mL) |
GSH-Px/(U/0.1mL) |
|
1 |
11.86±3.43b |
140.66±59.81b |
1 866.67±61.66b |
3 討論
肉雞體內脂質含量相對較高,容易發生脂質過氧化反應,產生對機體有害的過氧化產物,且高溫應激易引起機體生理功能紊亂,導致自由基大量生成,造成機體損傷。鉻作為葡萄糖耐受因子的成分參與體內糖脂代謝,并可通過硫氫鍵使胰島素結合到膜受體上,從而增加胰島素效應,抑制胰島素酶。劉軍安等(2007)研究表明,鉻可顯著提高小鼠肝臟中SOD表達量,清除體內大量的自由基。張樹球等(2006)報道,富鉻中藥劑可明顯提高糖尿病腦、肝超氧陰離子自由基清除能力和抗氧化能力。
H2O2具有很強的氧化性,高溫應激時可在機體內迅速生成,對動物機體造成很大的危害。MDA是過氧化脂質分解代謝的產物,與機體自由基產生成正比,可直接反映機體內脂質過氧化的程度,間接反映細胞損傷的程度。O2- ·化學性質活躍,可形成過氧化氫、羥自由基,并和體內多種物質如蛋白質、核酸等反應,造成機體細胞組織的損傷。本試驗結果表明,日糧中添加不同的鉻源能減少熱應激肉雞機體內H2O2和MDA的生成,提高機體抗O2- ·的能力,且兩種鉻源之間無顯著差異。
T-AOC是用于衡量機體抗氧化系統功能狀況的綜合性指標,它是指谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶等酶促體系和由VE、谷胱甘肽、VC等組成的非酶促體系總的抗氧化能力。T-AOC的大小可反映機體抗氧化酶體系和非酶體系對外界應激的代償能力以及機體自由基代謝的能力。SOD能有效清除自由基,阻斷毒性更強的氫氧化陰離子的產生,對細胞起保護作用,機體內存在Mn-SOD和CuZn-SOD兩種SOD,二者相加為總SOD(即T-SOD)。GSH-Px是機體內廣泛存在的一種重要的抗氧化酶,其活性將影響機體內活性氧自由基水平及脂質過氧化終末代謝產物MDA的含量,起到保護細胞膜結構和功能完整的作用。本試驗結果表明,高溫時日糧中添加適量的鉻能顯著提高肉雞機體的T-AOC、SOD和GSH-Px的活性,兩種鉻源之間無明顯差異,能保護肉雞機體免受氧化反應的危害。
4 結論
日糧中添加適量的鉻能有效提高熱應激肉雞的抗氧化性能,兩種鉻源之間差異不顯著。
(參考文獻略)
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